Том 91, № 4 (2014)

Цель. Выявление у штаммов клебсиелл различного происхождения частоты встречаемости хромосомного ivyC и плазмидного рЦС генов ингибиторов лизоцима. Материалы и методы. Исследованы 129 штаммов, из них K.pneumoniae (n=115) и K.oxytoca (n=14). Штаммы клебсиелл были разделены на 2 группы: 1 группа - 62 штамма (39 изолированы в Казани и 23 штамма выделены от детей с клебсиеллезной инфекцией в Москве). Казанские штаммы были представлены изолятами от детей раннего возраста, получавших стационарное лечение по поводу клебсиеллезной (n=8), респираторной (n=17), ротавирусной (n=5) и гнойно-воспалительной инфекции периода новорожденности (n=9). Вторую группу (n=67) составили штаммы, выделенные у детей, проходивших амбулаторное лечение по поводу дисбактериоза кишечника в Казани (n=37) и в Москве (n=30). Выявление ivyC и рЦС генов проводили с помощью ПЦР (Н.Б.Перунова и др., 2012). Результаты. Детерминанты хромосомного ivyC гена выявлены в 40,3% случаев (52 штамма из 129), плазмидного гена pliC - в 6,9% (9 из 129). Частота встречаемости ivyC гена у штаммов клебсиелл, выделенных от 39 больных детей Казани, составила 46,6% случаев (18 из 39), у клинических штаммов Москвы - 95,5% (22 из 23) случаев, при этом 6 штаммов несли одновременно ivyC и pliC гены. Дисбиозные кишечные штаммы несли хромосомный ivyC ген с частотой 61,2% (41 из 67), один штамм обладал дополнительно pliC геном. Заключение. Наличие у клинических штаммов клебсиелл ivyC и pliC генов ингибиторов лизоцима обеспечивает бактериям селективные преимущества в различных биотопах в процессе бактериальной колонизации слизистой оболочки.

Цель. Оценка эпидемической ситуации по неполиомиелитным энтеровирусным инфекциям в Краснодарском крае в многолетней динамике и характеристика клинического течения энтеровирусных серозных менингитов у госпитализированных больных. Материалы и методы. Ретроспективный анализ проявлений эпидемического процесса неполиомиелитных энтеровирусных инфекций с 2002 по 2012 гг. на территории Краснодарского края по данным Центра гигиены и эпидемиологии в Краснодарском крае. Результаты. Представлена клинико-эпидемиологическая характеристика энтеровирусных инфекций в Краснодарском крае. Продемонстрирован пейзаж энтеровирусов, выделенных из внешней среды некоторых территорий региона и из биологического материала больных различными заболеваниями. Охарактеризованы клинические особенности течения энтеровирусных менингитов. Заключение. Установлено, что наиболее часто передача энтеровирусов осуществляется контактным путем. Клинической проблемой неполиомиелитных энтеровирусных заболеваний является отсутствие патогномоничных симптомов и настороженности врачей различных специальностей в отношении диагностики данных инфекций.

Цель. Оценить иммуностимулирующее и токсическое действие белковых компонентов прототипа вакцины. Материалы и методы. Линейных мышей, морских свинок и кроликов иммунизировали подкожно однократно или двукратно рекомбинантным протективным антигеном (рПА), белком S-слоя (ЕА1) или их комплексом. Активацию структур врожденного иммунитета регистрировали по изменению экспрессии Toll-подобных рецепторов (TLR). Показатели адаптивного иммунитета определяли установленными способами. Токсичность препаратов выявляли с использованием проточной цитофлуориметрии и денситоморфометрии. Результаты. Установлена способность рПА и ЕА1 активировать структуры врожденного иммунитета линейных мышей - TLR 2 и 6 типа. Определены особенности динамики титров анти-ПА антител для каждого вида животных, осуществлено сравнение с антителообразованием при иммунизации Bacillus anthracis СТИ-1. Показано, что двукратная иммунизация биомоделей комплексным препаратом в сочетании с адъювантом обеспечивает защиту от заражения тест-штаммом, сопоставимую с протективностью живой вакцины. В ходе исследования не было выявлено свидетельств повреждающего действия рПА и ЕА1 на клетки и ткани макроорганизма. Заключение. На основании результатов комплексного тестирования прототип разрабатываемой химической сибиреязвенной вакцины обладает высокой иммуногенно-стью, а его белковые компоненты не токсичны для лабораторных животных.

Цель. Разработка методологических подходов идентификации лептоспир с использованием технологии прямого белкового профилирования MALDI-TOF. Материалы и методы. Проведен анализ клеточных белков 34 штаммов лептоспир на приборе Microflex LT с использованием программного обеспечения «MALDI Biotyper 3.0 для идентификации и классификации микроорганизмов». Результаты. Сгенерированы и импортированы в базу данных MALDI Biotyper 3.0 19 референсных спектров эталонных штаммов лептоспир 7 видов. Проведена идентификация 6 штаммов с неопределенным таксономическим положением. Заключение. Апробированная методика позволяет определять вид лептоспир с достоверностью, зависящей от адаптации их к питательным средам, способа подготовки и условий хранения образцов для масс-спектрометрии.

Цель. Оценить эффективность мероприятий, предусмотренных эпидемиологическим надзором за краснухой у беременных женщин. Материалы и методы. Лабораторно обследованы 585 беременных женщин с подозрением на краснуху в 10 Региональных центрах по надзору за корью и краснухой методом ИФА. Результаты. Среди обследованных беременных женщин были выявлены 24 заболевшие краснухой беременные женщины в возрасте 16 - 36 лет, большая часть (91,7%) которых была либо не привита против краснухи, либо имела неизвестный прививочный анамнез: 16 женщин прервали беременность, у 8 женщин беременность закончилась срочными родами. Из 8 новорожденных только у одного ребенка выявлена врожденная краснушная инфекция (ребенок клинически здоров). Заключение. Эпидемиологическое расследование каждого случая краснухи у беременных с обязательным лабораторным обследованием женщин и источника инфекции выявило значительное число восприимчивых к вирусу краснухи женщин детородного возраста, что сохраняет вероятность рождения детей с синдромом врожденной краснухи.

Цель. Сравнительная оценка биологических свойств парагемолитических вибрионов, обусловивших вспышки и спорадические случаи пищевой токсикоинфекции в Приморском крае в 2012 году и в предыдущие годы. Материалы и методы. Изучено 40 клинических штаммов Vibrio parahae-molyticus, выделенных в 2012 г., в сравнении с 62 штаммами из этого региона, охарактеризованных нами ранее. Вирулентность оценена комплексным методом: гемолитическую активность определяли в тесте Канагава (КР), уреазную - на среде Кристенсена. Серотипирование осуществляли с помощью коммерческого набора О/К-сывороток. ПЦР-генотипирование проведено по маркерным генам семи островов патогенности (VPaI-1-7). Результаты. Все штаммы, выделенные от больных в 2012 г., обладали КР-позитивным и уреазонегативным фенотипом, принадлежали к серогруппе О3:К6 и содержали маркерные гены семи VPaI, что позволило считать их представителями «пандемичного» клона, как и другие клинические штаммы из этого региона. Однако среди штаммов 2012 г. выявлено увеличение числа антибиотикорезистентных вариантов по сравнению с изолятами 1997 г. Заключение. Полученные данные свидетельствуют о риске распространения «пандемичного» клона V. parahaemolyticus в Дальневосточном регионе России, об опасной тенденции формирования антибиотикоустойчивых вариантов и о необходимости мониторинга заболеваемости и окружающей среды с обязательной ПЦР-детекцией генов, связанных с вирулентностью, в том числе интегрированных в «острова» патогенности.

Цель Исследование показателей иммунитета и локальной защиты у людей с дисбактериозом кишечника. Материалы и методы. Изучен качественный и количественный состав микробиоценоза кишечника, содержание γ-интерферона (методом ИФА) в копрофильтратах у 204 человек, проанализировны данные иммунограмм 123 человек с бактериологически подтвержденным дисбактериозом. Результаты. Установлено наличие иммунодефицита в основном Т-клеточного типа у 92,7+2,4% людей с дисбактериозом кишечника. Выявлены значительные колебания содержания γ-интерферона в копрофильтратах обследованных лиц (от менее 5 пкг/мл до 240 пкг/мл), определена статистически достоверная зависимость содержания γ-интерферона в копрофильтратах от количества условно патогенных микробов и атипичных эшерихий (в том числе гемолитических) в составе микробиоценоза кишечника. Заключение. Наличие иммунодефицита по Т-клеточному типу у людей с дисбактериозом кишечника сочетается со снижением локальной защиты, а содержание γ-интерферона в копрофильтратах свидетельствует не только о снижении локальной защиты, но, в определенной степени, отражает и степень этого снижения.

Цель. Скрининг новых штаммов микроводорослей на наличие выраженной антагонистической (антибактериальной) активности по отношению к условно патогенным бактериям. Материалы и методы. Исследовано 11 чистых культур зеленых одноклеточных водорослей, выделенных из пресных и соленых водоемов Оренбургской области, на наличие антагонистической активности по отношению к 4 тест-штаммам условно патогенных бактерий фотометрическим методом. Влияние водных экстрактов микроводоросли Astermonas gracilis Artari на скорость самоочищения рапы от Escherichia coli, а также антибактериальная активность пелоида оценены в условиях сокультивирования. Результаты. Чистые культуры зеленых одноклеточных водорослей Scenedesmus obliquus (Turpin) Kutz, Scenedesmus magnus Meyen var. magnus, Pediastrum duplex Meyen var. duplex, Chlorella vulgaris Bory, Monoraphidium arcuatum (Korschikov) Hindak (=Ankistrodesmus arcuatus Korschikov), Dictyosphaerium sp. обладали наиболее выраженной антагонистической активностью по отношению к условно патогенным бактериям. Водный экстракт микроводоросли A. gracilis благодаря антибактериальному действию ускорял самоочищение рапы от E. coli. Пелоид, содержащий экстракты клеток микроорганизмов, оказывал выраженное антибактериальное действие по отношению к условно патогенным бактериям. Заключение. Внутриклеточно локализованные антагонистические вещества из микроводорослей повышают скорость элиминации аллохтонных микроорганизмов, что является одним из механизмов самоочищения водоема и антибактериального действия пелои-да. Исследованные новые штаммы зеленых микроводорослей, благодаря наличию у них выраженной антагонистической активности, могут иметь широкое практическое применение.

Представлен анализ данных литературы и собственных исследований о роли липополисахаридов (эндотоксина) грамотрицательных бактерий при патологии генитального тракта женщин и акушерских осложнениях. Обсуждается роль эндогенной инфекции, ассоциированной с нарушенной микроэкологией кишечного тракта и вагинального биотопа женщин, в развитии эндотоксинемии. Рассматривается участие эндотоксина при эмбриональной резорбции, задержки внутриутробного развития и антенатальной гибели плода, преждевременных родах, преэклампсии, плацентарной дисфункции. Уровень эндотоксинемии и провоспалительных цитокинов является маркером хронического эндогенного инфекционно-воспалительного заболевания различных отделов генитального тракта с поражением различных органов репродуктивной системы женщин.

Представлена модель сибиреязвенной инфекции, в которой определена роль основных факторов патогенности Bacillus anthracis экзотоксина и капсулы. После фагоцитоза спор макрофагами начинается синтез основного компонента экзотоксина - протективного антигена, который в олигомерной форме разрушает фагосомную мембрану. Это ускоряет переход патогена из фагосомы в цитоплазму макрофага. Синтезируемая патогеном поли-D-глютаминовая капсула запускает выход (экзоцитоз) вегетативных клеток из макрофагов и защищает их от рефагоцитоза в просвете лимфатического узла. Вегетативные клетки, активно и беспрепятственно размножаясь в лимфатическом узле, секретируют экзотоксин, который за счет цитотоксического действия разрушает эндотелиальную перегородку между лимфой и кровью. В результате вегетативные клетки попадают в кровь и развивается бактериемия. Патогенетическая картина, наблюдаемая при сибирской язве (многочисленные геморрагии в различных органах и т.п.), связана с локальными нарушениями микроциркуляции различных органов, вызванными действием бактериальных экзопротеаз через активацию фактора Виллебранта. Это приводит к быстрому локальному нарастанию микробной массы и последующему мощному цитотоксическому действию экзотоксина на клетки тканей поражаемого органа. На завершающей стадии инфекции наступает смерть инфицированного организма вследствие вызываемого экзотоксином токсического шока. После смерти инфицированного организма наступает снижение температуры тела и начинается процесс формирования спор в павшем животном: деполимеризация капсулы, укорачивание цепочек, формирование пептидогликанового кортекса. В таком виде споры представляют собой длительный источник сохранения инфекционного агента и распространения инфекции в природе.

Рассмотрено строение поверхностных структур, включая пили (фимбрии), поверхностный белок 67-72р, поверхностный белок DIP 1281, липоарабиноманнан CdiLAM и их роль в процессах адгезии и колонизации Corynebacterium diphtheriaе слизистой оболочки зева. Описаны основные этапы адгезии возбудителя дифтерии, а также способность его адгезинов стимулировать действие факторов врожденного и приобретенного иммунитета. Подчеркнута перспективность создания вакцин, формирующих иммунологическую защиту организма от адгезивной активности С. diphtheriaе, а также препятствующих их колонизации и размножению. Это позволило бы решить проблему дифтерийного бактерионосительства, справиться с которой существующими средствами вакцинопрофилактики невозможно.