INDEXES OF IMMUNITY AND LOCAL PROTECTION IN HUMANS WITH INTESTINE DYSBACTERIOSIS

Full Text

Нормальная микрофлора организма человека и особенно микрофлора кишечника, где микробное население наиболее велико и разнообразно по составу, играют значительную роль в поддержании гомеостаза макроорганизма. Изменения состава нормальной микрофлоры являются показателем эндоэкологического неблагополучия и наступают, как правило, задолго до проявления патологических процессов различной локализации [1, 3, 9]. Накопление в окружающей среде разнообразных по механизму действия ксенобиотиков, способных даже в низких концентрациях оказывать неблагоприятное действие, являются одной из причин нарушения состава микробиоценозов полостей организма человека, сообщающихся с окружающей средой, что определяется понятием дисбактериоз. Дисбактериозы кишечника - широко распространенное состояние, выявляемое практически у 80 - 90% населения. Следствием этого состояния может быть нарушение колонизационной резистентности кишечника, обмена веществ, формирование иммунодефицитов, развитие хронических воспалительных процессов [2]. Цель работы - оценка состояния иммунитета и степени локальной защиты у людей с дисбактериозом кишечника. Проанализированы материалы от 204 человек, обратившихся в диагностический центр РНИИМП для обследования на дисбактериоз кишечника. Бактериологическое исследование на дисбактериоз кишечника и оценку степени выраженности проводили в соответствии с отраслевым стандартом Минздрва РФ [7]. В качестве показателя степени локальной защиты определяли содержание в копро-фильтратах людей с бактериологически подтвержденным дисбактериозом кишечника у-ИНФ, являющегося главным медиатором клеточного ответа Th1 типа, осуществляющего как иммунную защиту, так и развитие специфического иммунитета при бактериальных, вирусных и протозойных инфекциях [5]. Иммунный статус оценивали путем анализа иммунограмм, выполненных в специализированных иммунологических лабораториях. Наличиеие в копрофильтратах у-ИНФ выявляли с помощью набора реагентов «Вектор-Бест». Полученные результаты обрабатывали методами вариационного и статистического анализа на персональном компьютере по программам, разработанным в пакете EXCEL с использованием библиотеки статистических функций. Достоверность различий между исследуемыми группами определяли с помощью t-критерия Стьюдента. Проведенное бактериологическое исследование установило наличие дисбактериоза кишечника у 201 человека (98,5%) из 204 обследованных людей. В общих чертах изменение состава микробиоценоза характеризовалось умеренным снижением содержания бифидобактерий (до lg 8,03+1,4), несколько более выраженным снижением количества лактобацилл (lg 6,5+1,4) и эшерихий с нормальной ферментной активностью (lg 6,5+1,7). Отмечали увеличение содержания эшерихий со сниженной ферментативной активностью, гемолитических эшерихий, циторатпозитивных энтеробактерий, стафилококков, в том числе золотистых, грибов рода Candida. Анализ иммунограмм 123 человек с бактериологически подтвержденным дисбактериозом выявил наличие иммунодефицита в 114 случаях (92,7+2,4%), среди них наиболее часто встречался дефект фагоцитоза (89,4+3,6%), гипогаммаглобулинемия со снижением содержания IgA (86,4+3,2%). Нарушения в системе Т-клеточного иммунитета выявлены у 101 человека (82,1+4,7%), среди которых наиболее характерным было снижение количества Т-супрессоров СД-8 (58,4+0,6%), увеличение количества Т0-клеток (30,7+1,2%), снижение содержания нормальных киллеров (NK) СД 16+56 - до 5-8% (34,1+0,8%) и повышение уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) (29,7+3,4%). Количество у-ИНФ было исследовано в 204 (30,2+4,6%) копрофильтратах. Так, как в нашем исследовании были выявлены 3 человека с нормомикробиоценозом кишечника, содержание у-ИНФ в их копрофильтратах позволило нам, хоть и ориентировочно из-за малого количества наблюдений, судить о количестве данного цитокина в норме, которое в среднем составляло 1,67 пкг/мл. Проведенное исследование показало, что содержание у-ИНФ в копрофильтратах людей с дисбактериозом подвержено значительным индивидуальным колебаниям (от количества менее 5 мкг/мл до 240 пкг/мл). При этом очень низкое количество у-ИНФ (менее 5 пкг/мл) было выявлено у 95 человек (47,34+5,1%) из числа обследованных. В зависимости от количества у-ИНФ в копрофильтратах все 106 человек были разделены на 3 группы: с низким количеством у-ИНФ (содержание от 5 до 10 пкг/мл), средним (от 10 до 40 пкг/мл) и высоким (от 40 до 100 и более пкг/мл). Низкое количество у-ИНФ было обнаружено у 48 человек (23,9+6,1%), среднее - установлено в 38 копрофильтратах (18,9+2,7%) и только в 20 случаях зарегистрировано высокое (9,95+6,3). Известно, что кишечные эпителиоциты могут быть источником у-ИНФ, вызывающего повышение проницаемости слизистой оболочки кишечника [6]. Большинство авторов при определении содержания у-ИНФ оценивают его количество в сыворотке крови, вместе с тем, содержание у-ИНФ непосредственно в копрофильтратах может дать более достоверную информацию о степени местной защиты и свидетельствовать о наличие воспаления, вызванного дисбиозными микроорганизмами [1, 5]. В связи с этим, нами было сопоставлено содержание у-ИНФ в копрофильтратах людей в зависимости от состава микробиоценоза кишечника. Однако анализ полученных данных выявил отсутствие какой-либо зависимости содержания у-ИНФ в копрофильтратах от количества бифидобактерий в составе кишечного микробиоценоза. Статистически достоверных различий в количестве бифидобактерий у людей с очень низким (менее 5 пкг/ мл), низким, средним и высоким содержанием у-ИНФ в копрофильтратах не обнаружено. Подобная закономерность отмечена и в отношении общего количества эшерихий. Их количество в микробиоценозе кишечника у пациентов всех наблюдаемых групп примерно одинаково. Некоторая тенденция к снижению количества лактобацилл отмечена у пациентов в случае средних и высоких показателей уровня у-ИНФ в копрофильтратах (lg 6,1 + 1,3 и 5,9+1,7, соответственно). Для пациентов с содержанием у-ИНФ менее 5 пкг/мл характерным являлось сравнительно невысокое содержание в кишечнике цитратпозитивных энтеробактерий (6,4+1,4%), стафилококков (5,2+1,3%) и грибов рода Candida (6,4+1,4%). Частота указанных микроорганизмов увеличивалась в группе лиц с содержанием до 10 пкг/мл, особенно значительно увеличивалась частота встречаемости протеев (для лиц со средним количеством t=4,1, для лиц с высоким t=5,4). В группах лиц со средним и высоким содержанием у-ИНФ также отмечается достоверное увеличение частоты обнаружения атипичных (со сниженной ферментативной активностью и гемолитических эшерихий) (t=3,1 и 2,7 соответственно). Так как возрастание в составе микробиоценоза кишечника частоты обнаружения условно патогенных микроорганизмов и атипичных эшерихий является одним из показателей изменения колонизационной резистентности и снижения локальной защиты, можно полагать, что увеличение содержания у-ИНФ в копрофильтратах может являться признаком снижения локальной защиты, а различия в содержании у-ИНФ в копрофильтратах отражать степень этого снижения [1, 4]. Таким образом, содержание у-ИНФ в копрофильтратах при дисбактериозе кишечника подвержено значительным колебаниям, установлена статистически достоверная зависимость количества у-ИНФ в копрофильтратах от содержания условно патогенных микроорганизмов и атипичных эшерихий в составе микробиоценоза. Установленный нами «цитокиновый хаос» характерен для дисбактериоза кишечника с явлениями транслокации эндотоксина (ЛПС) грамотрицательных микроорганизмов из просвета кишечника в системный кровоток [2, 4]. Различия в содержании у-ИНФ в копрофильтратах свидетельствуют о разной степени нарушения локальной защиты слизистой оболочки при кишечном дисбактериозе.

About the authors

M. N Gapon

Research Institute of Microbiology and Parasitology, Rostov-on-Don, Russia

L. N Ternovskaya

Research Institute of Microbiology and Parasitology, Rostov-on-Don, Russia

O. V Denisenko

Research Institute of Microbiology and Parasitology, Rostov-on-Don, Russia

V. Ya Zarubinsky

Research Institute of Microbiology and Parasitology, Rostov-on-Don, Russia

References

Supplementary files