Том 91, № 5 (2014)

Цель. Изучение видового состава и факторов патогенности стафилококков, выделенных из кишечного биотопа детей с ВИЧ-инфекцией. Материалы и методы. Выделено и идентифицировано 75 штаммов стафилококков от ВИЧ-позитивных и 45 штаммов от ВИЧ-негативных детей. Изучены факторы специфической адгезии, колонизационный потенциал, факторы инвазии и токсинообразование стафилококков. Результаты. Установлено, что у ВИЧ-инфицированных детей доминировали Staphylococcus aureus, Staphylococcus xylosus, Staphylococcus epidermidis. Количественный уровень S.aureus составлял 1,8х10 7 КОЕ/г. Показано, что адгезия, продукция гемолизина, ДНКазы не отличались от группы сравнения (p>0,05). Липазная активность у стафилококков от ВИЧ-инфицированных детей была выше, чем в контрольной группе (p<0,05). Заключение. Полученные данные раскрывают некоторые механизмы развития эндогенных инфекций у ВИЧ-инфицированных детей.

Цель. Сравнительный анализ показателей гуморального и клеточного иммунитета у вакцинированных против туляремии людей. Материалы и методы. В реакции непрямой гемагглютинации и реакции лейкоцитолиза с тулярином были изучены образцы сывороток и крови 258 иммунизированных людей. Результаты. Показано, что 73% обследованных имели как специфические антитела, так и положительные значения клеточного иммунитета. Наличие противотуляремийного иммунитета зарегистрировано у 26 из 30 людей, иммунизированных 10 - 20 лет назад. Однако у 76 человек (26%) мы обнаружили расхождение результатов двух использованных методов, что затрудняет оценку состояния специфического иммунитета. Так, использование только одного метода, характеризующего либо гуморальный, либо клеточный иммунитет, не дает объективной информации. Заключение. Для повышения достоверности результатов оценки состояния противотуля-ремийного иммунитета целесообразно использование двух методов, направленных на выявление как специфических антител, так и реакции гиперчувствительности замедленного типа. Только положительные иммунологические показатели обоих тестов подтверждают наличие иммунитета против Francisella tularensis и возможность переноса сроков ревакцинации.

Цель. Определить частоту антител к поверхностному (анти-HBs) и сердцевинному (анти-HBc) антигенам гепатита В у населения Санкт-Петербурга различного возраста для оценки протективного коллективного иммунитета к вирусу гепатита В (ГВ). Материалы и методы. Сыворотки крови 970 человек (491 мужчин, 479 женщин) 10 возрастных групп от 0 до 50 лет и старше исследованы на наличие anti-HBs и anti-HBc IgG методом имму-ноферментного анализа с использованием коммерческих диагностических тест систем. Результаты. В целом анти-HBs в концентрации 5 мМЕ/мл и более выявлены у 603 обследованных (62,2%). Анти-HBs в концентрации 10 мМЕ/мл и более выявлены у 53,9%. Частота анти-HBs в протективном титре у лиц мужского и женского пола в целом оказалась одинаковой (52,6% и 55,2% соответственно). Сопоставление повозрастных показателей серопротекции и заболеваемости острым ГВ в Санкт-Петербурге выявило обратную корреляционную зависимость средней силы (r=-0,54). Заключение. Результаты работы подтверждают высокую эффективность программы вакцинопрофилактики ГВ в Санкт-Петербурге и акцентируют внимание на необходимости проведения и далее широких мероприятий по иммунизации населения против ГВ.

Цель. Исследование противовирусной активности морапренилфосфатов (МПФ) против вируса простого герпеса 1 типа (ВПГ1) in vitro и при экспериментальной инфекции, вызванной ВПГ1 у мышей. Материалы и методы. Активность МПФ in vitro испытывали по способности подавлять образование симпластов на клетках VERO, которые заражали ВПГ1 , штамм VR-3. Для опытов in vivo отобрали серию МПФ, которая подавляла вирус-индуцированное симпластообразование в 30 раз. Противовирусную активность МПФ in vivo изучали у зараженных ВПГ1 мышей при введении его как по профилактической, так и по лечебной схемам. Результаты. МПФ в дозе 20 мкг/мышь при п/к введении проявлял выраженное лечебно-профилактическое действие. Впервые экспериментально показана эффективность МПФ при клинически выраженном герпесе на фоне развивающейся неврологической симптоматики. Визуальное наблюдение за мышами, которым вводили МПФ при появлении первых клинических симптомов болезни, показало, что на фоне инъекций препарата клинические признаки прекращались через 2 - 3 суток и не регистрировались, по крайней мере, в течение всего периода наблюдений (14 суток). Заключение. Показано, что активная герпетическая инфекция сопровождается увеличением экспрессии FoxP3 в тимусе. Обсуждаются возможные механизмы антивирусного эффекта МПФ.

Цель. Изучить влияние бесклеточных метаболитов Escherichia coli разных фаз развития на фагоцитарную активность нейтрофилов на фоне воздействия гормона беременности - эстриола (E 3). Материалы и методы. Метаболиты E. coli К12 (wt) отбирали в конце фаз адаптации и логарифмического роста путем фильтрации после культивирования при 37 оС на LB бульоне. Нейтрофилы гепаринизированной венозной крови здоровых небеременных женщин (фолликулярная фаза, n=8) инкубировали 1 ч с E 3 в концентрации 2 нг/мл и 20 нг/мл, затем 30 мин с метаболитами E. coli, средой LB или раствором Хенкса при 37 оС. Оценку фагоцитарной активности проводили по ингибированию биолюминесценции E. coli K12 TG1 lux+. Результаты. Экзометаболиты логарифмической фазы роста культуры E. coli ингибировали фагоцитоз нейтрофилов после 40 - 60 мин инкубации, в отличие от метаболитов фазы адаптации при сравнении с LB средой. Культивирование нейтрофилов после гормональной обработки в LB среде, обладающей способностью стимулировать фагоцитоз нейтрофилов по сравнению с раствором Хенкса, не изменяло их фагоцитарной активности. Однако ингибирующее влияние E 3 в концентрации 20 нг/мл на фагоцитоз нейтрофилов по сравнению с контролем проявлялось в растворе Хенкса (на 50 - 60 мин) и после воздействия метаболитов фазы адаптации культуры E. coli (на 40 - 60 мин). Заключение. Е 3 в концентрации, экстраполированной с его уровня в III триместре беременности, может способствовать снижению противомикробного потенциала нейтрофилов на начальных этапах роста патогенных микроорганизмов.

Цель. Создание ПЦР тест-системы для определения бактерий класса Actinobacteria, относящихся к двум родам, наиболее широко представленным среди облигатно анаэробной микробиоты в кишечнике человека: Bifidobacterium и Pronionibacterium. Материалы и методы. Восемь штаммов бактерий Bifidobacterium spp. и 6 штаммов бактерий рода Propionibacterium идентифицированы по морфологическим, культуральным и биохимическим свойствам. Выделение матричной ДНК штаммов для ПЦР проведено комплектом «ДНК-Экспресс» (НПФ «Литех», Россия). Праймеры для определения родовой принадлежности облигатных анаэробов разработаны на основе вариабельности гена 16S РНК с использованием программного обеспечения «Lasergene 7.1» («DNASTAR, Inc.», США). ПЦР-скрининг выделенной ДНК осуществлен на основе праймеров и реагентов ООО «Синтол». Детекцию ампликонов производили методом агарозного гель-электрофореза. Результаты. Мультиплексирование двух разных праймерных пар в одной пробе при температуре отжига 68°C в течение 30 циклов показало наличие неспецифических ампликонов, образующихся в пробах с ДНК-матрицей бифидобактерий. Повышение температуры отжига до 70°C и сокращение количества циклов ПЦР до 25 привело к исключению образования неспецифических ампликонов. Поскольку применяемая температура отжига достигла области значений, оптимальных для работы Taq-полимеразы, удалось реализовать алгоритм двухфазной ПЦР. Это решение позволило достичь сокращения общего времени реакции до 45 минут. Дальнейшее повышение температуры отжига до 72°C и сокращение фазы элонгации вплоть до 15 секунд при 30 циклах ПЦР не привело к видимому снижению эффективности реакции. Заключение. Разработана ускоренная система идентификации бактерий родов Bifidobacterium и Pronionibacterium c помощью системы двухфазной множественной ПЦР. Полученная система является частью системы скрининговой идентификации основных родов и видов культивируемых облигатно анаэробных бактерий, выделяемых из биотопов кишечника человека.

Цель. Изучение экспериментально производственных серий «Стафиловак-2» по накоплению специфических IgG и безопасности. Материалы и методы. Опытные производственные образцы стафилококковой вакцины изучены по накоплению специфических IgG в сыворотках иммунизированных мышей линии BALB/c в ИФА. Безопасность вакцины оценивали в тестах острой и хронической токсичности, включающих патоморфологические и гистологические, гематологические и биохимические исследования, изучение влияния на центральную нервную систему. Результаты. Отмечено статистически значимое (в 2,6-3,0 раза) увеличение уровня IgG в сыворотках иммунизированных животных по сравнению с контролем. В экспериментах изучения острой и хронической токсичности ни на одном сроке наблюдения прирост в массе тела и массе внутренних органов не отличался от данных, полученных у контрольных животных. Ни по одному из изученных методов оценки безопасности изучаемые серии вакцин не показали отличий от контроля. Заключение. Рекомендуемая для подкожного введения человеку доза 200 мкг является экспериментально обоснованной и может служить основанием для проведения клинического исследования стафилококковой вакцины на людях.

Цель. Изучить возможность формирования индуцированной резистентности возбудителей гнойно-септических инфекций (ГСИ) к дезинфицирующим средствам (ДС) в бактерицидной концентрации. Материалы и методы. В эксперименте на тест-объектах из дерева и пластика проводили ежедневное воздействие бактерицидными концентрациями препаратов группы четвертично-аммониевых соединений (ЧАС) на штамм Enterobacter cloacae, имеющий неполную чувствительность к тем же дезинфектантам на тех же тест-объектах. Воздействие осуществляли до момента перехода от неполной чувствительности к устойчивости. Результаты. Установлено, что по отношению к различным дезинфектантам группы ЧАС в антибактериальных концентрациях, предусмотренных инструкциями, штамм E. cloacae, исходно обладающий неполной чувствительностью, приобретает устойчивость на тест-объектах из дерева и пластика после 2 - 12 воздействий препаратов. Заключение. Полученные данные свидетельствуют, что устойчивость возбудителей ГСИ к дезинфектантам может происходить не только под воздействием низких концентраций препаратов, но и при использовании средств дезинфекции в бактерицидной концентрации.

Обсуждаются эпидемиологические аспекты экологии возбудителей пищевых инфекций, укоренившихся в современных техногенных очагах, созданных человеком в урбоценозах, к которым относятся агрокомплексы по выращиванию животных, овощей в открытом и закрытом грунте. Почва и источники водоснабжения с широкой транспортирующей сетью, где микроорганизмы обитают в среде при благоприятных условиях для жизнедеятельности и роста (гумусные отложения, температурный режим, оптимальный рН, ассоциации с гидробионтами, формирование биопленок), являются мощными вторичными резервуарами возбудителей инфекций. Рассматриваются некоторые молекулярно-генетические механизмы полигостальности грамотрицательных бактерий и листерий.