Том 88, № 2 (2011)

Цель. Определение способности к экспрес- сии генов холерного токсина (ХТ) вибрионами не О1/не О139 методом ИФА и оценка биологического действия их супернатантов на культуры клеток. Материалы и методы. Исследованию подвергнуто 39 штаммов V. cholerae различных серологических групп. Определение гемолитической активности штаммов проводили в пробе Грейга, а продукции холерного токсина — в GM1-ИФА и перевиваемых клеточных линиях, регистрируя, цитотонический, цитотоксический и протеолитический эффект. Результаты. В работе с использованием 29 музейных штаммов холерных вибрионов не О1/не О139, выделенных от людей, показано, что метод GM1-ИФА не позволяет выявить продукцию ХТ у этих штаммов in vitro. Методом GM1-ИФА ХТ был выявлен только в одном супернатанте штамма вибрионов не О1/не О139 в количестве ОП=0,577, что гораздо меньше, чем у штаммов вибрионов О1 (ОП=2,176). На культуре клеток супернатанты вибрионов не О1/не О139 вызывали удлинение лишь единичных клеток при разведении их до 1:100. Заключение. Для оценки токсинопродуцирующей способности штаммов V. cholerae не О1/не О139 более чувствительным методом является цитологическая модель, которую целесообразно использовать.

Цель. Генетическая и антигенная характе- ристика штаммов Neisseria meningitidis, выделенных в очагах менингококковой инфекции от лиц, находящихся в контакте с больным генерализованной формой менингококковой инфекции. Материалы и методы. Исследованы штаммы, выделенные в 2007—2009 гг. на территории Москвы при проведении обследования лиц, контактировавших с больным в очагах менингококковой инфекции. Использованы методики мультилокусного секвенирования-типирования, генетического субтипирования и типирования фрагмента VR (FetA). Результаты. Информация об исследованных штаммах внесена в базу данных http:// pubmlst.org/neisseria/. У 12 штаммов найдены не описанные ранее сиквенс-типы, у двух штаммов не удалось определить сиквенс-тип, и у двух штаммов отсутствовал фрагмент VR (FetA). Менингококки серогруппы А имели антигенный профиль «P1.5-2,10: F3-5» и принадлежали сиквенс-типам ST-75 и ST-3349, что не позволяет говорить об импорте на наблюдаемую территорию эпидемически значимых штаммов. Все типированные штаммы серогруппы С и один штамм серогруппы В входят в клональный комплекс «ST-41/44 complex/Lineage 3». Субтипы штаммов менингококков серогруппы С совпадают с субтипами, выявленными у штаммов, вызывавших генерализованные формы инфекции, в то время как у носительских штаммов серогруппы В антигенный профиль отличается от антигенного профиля штаммов, выделенных от больных. Негруппируемые штаммы отличает высокий уровень генетического и антигенного разнообразия: только для 6 из 16 штаммов (37,5%) удалось определить сиквенстип, обнаруженный ранее, все эти штаммы входят в клональный комплекс «ST-53 complex», объединяющий преимущественно носительские штаммы. Заключение. Соотношение между популяцией менингококков, циркулирующих среди населения Москвы, и субпопуляцией, способной вызвать генерализованные формы менингококковой инфекции (ГФМИ), различно для менингококков разных серогрупп. Негруппируемые штаммы, выделенные от носителей, значительно отличаются от штаммов, вызывающих ГМФИ.

Цель. Оценка иммунобиологических свойств рекомбинантных атоксичных форм экзотоксина А Pseudomonas aeruginosa. Материалы и методы . Получены и исследованы 3 рекомбинантные атоксичные формы экзотоксина A P.aeruginosa: аTох1, состоящая только из домена I экзотоксина A; аTох1,2, включающая домены I и II; и аTох1,2, Δ 3 , имеющая в своем составе до- мен ы I, II и часть домена III. Результаты. Выраженными антигенными свойствами обладали формы аTох1,2 и аTох1,2, Δ3. Препараты этих рекомбинантных белков оказались иммуногенны и защищали в эксперименте животных от поражения экзотоксином А. Заключение. Полученные результаты могут быть использованы для конструирования иммунобиологических препаратов направленного действия.

Цель. Сравнение концентрации α-фетопротеина (АФП) в образцах сыворотки крови женщин на ранних стадиях беременности с положительным и неопределенным результатами исследования на анти-ВГС. Материалы и методы. Исследовали образцы сывороток крови женщин в I триместре беременности в тест-системах планшетного формата для иммуноферментного анализа с комплексным и раздельным определением антител к антигенам вируса гепатита С (ВГС). Результаты. Концентрация АФП у женщин в I триместре беременности, имеющих анти-ВГС антитела, выше, чем у женщин без анти-ВГС. Концентрация АФП в образцах сыворотки крови беременных с неопределенным результатом выявления анти-ВГС выше, чем в образцах сыворотки крови беременных без анти-ВГС. Различий между анти-ВГС позитивными образцами и образцами с неопределенным результатом исследования по уровню сывороточного АФП обнаружено не было. Заключение. Повышенную концентрацию АФП в I триместре беременности выявляют не только у женщин с ВГС-инфекцией, но и у женщин с неопределенным результатом исследования анти-ВГС, что свидетельствует о возможной эпидемиологической близости этих групп.

Цель. Оценка адгезивных свойств микро- организмов, колонизирующих открытые биотопы организма больных ревматоидным артритом и системной красной волчанкой. Материалы и методы. Проведено изучение микрофлоры слизистой оболочки носа и мочи у 62 больных ревматическими заболеваниями (32 — ревматоидным артритом и 30 системной красной волчанкой). Выделено 57 штаммов условно патогенных бактерий включая представителей родов Staphylococcus, Escherichia, Klebsiella, Morganella и Enterobacter. Проанализированы на модели эритроцитов адгезивные свойства бактерий, выделенных при ревматических заболеваниях, музейных культур и клинических штаммов cтандартным методом. Результаты. Бактерии, выделенные при ревматических заболеваниях, характеризовались выраженным адгезивным потенциалом. Более существенно адгезивные свойства проявлялись у бактерий семейства Enterobacteriaceae. Установлена неоднородность штаммов по степени адгезивных свойств, выявлены родовые и видовые особенности адгезивного потенциала бактерий. Заключение. Микроорганизмы, колонизирующие организм больных ревматическими заболеваниями, имеют высокий адгезивный потенциал, что может повышать риск развития инфекций с их участием.

Цель. Оценка диагностической значимости определения уровня липополисахарид-связывающего белка (LBP) при различных инфекционных процессах и дисбиозах. Материалы и методы. Исследованы сыворотки больных сальмонеллезом, урогенитальным хламидиозом, внебольничной пневмонией, полипозным риносинуситом и бактериальным вагинозом. Результаты. Уровень LBP при сальмонеллезе был ниже, нежели у здоровых, и снижался при увеличении степени тяжести заболевания. При хламидиозе выявлены более высокие значения LBP. При внебольничной пневмонии показана прямая корреляция уровня LBP с этиологией и тяжестью заболевания. При полипозном риносинусите концентрация LBP обратно коррелировала с продолжительностью заболевания и прямо — с продолжительностью ремиссии. При бактериальном вагинозе выявлено двукратное увеличение средней концентрации LBP в крови и зависимость от длительности дисбиоза. Заключение. При различных патологических состояниях и дисбиозах наблюдается разнонаправленная модуляция антиэндотоксиновой защиты.

Цель. Оценить степень контаминации объектов внешней среды Legionella pneumophila стационаров г. Нижний Новгород и Нижегородской области и выявить потенциально опасные объекты. Материалы и методы. Проведено исследование 433 смывов с объектов внешней среды и 43 проб воды системы горячего водоснабжения и воды бассейнов в различных отделениях 4 многопрофильных стационаров. С помощью ПЦР в режиме реального времени выявляли ДНК в образцах из окружающей среды. Результаты. ДНК L. pneumophila обнаружена в 41 (9,47%) смыве с объектов внешней среды и в 2 (4,65%) пробах воды горячего водоснабжения. Выявлено, что чаще всего эти бактерии обнаруживались на объектах внешней среды физиотерапевтических отделений. Отмечено повторное выделение легионелл с одних и тех же объектов. Заключение. Выявлена возможность циркуляции легионелл в многопрофильных стационарах. Определены отделения высокого риска циркуляции и объекты риска — резервуары L.pneumophila в ЛПУ.

Цель. Определение уровня сывороточной концентрации ЛПС и ЛПС-связывающего белка (ЛСБ), а также оценка его прогностической значимости у онкологических больных с сепсисом. Материалы и методы. Были проанализированы образцы крови 17 здоровых доноров и 46 онкологических больных с диагнозом сепсис с использованием наборов реагентов фирмы «Hycult biotechnology» (Netherlands). Результаты. У онкологических больных с сепсисом содержание сывороточного ЛПС достоверно повышено. В крови умерших больных выявляли значительное снижение содержания ЛСБ. Заключение. Динамическое нарастание концентрации ЛПС и снижение уровня ЛПС-связывающего белка в крови онкологических больных следует рассматривать как прогностически неблагоприятные признаки при сепсисе.

Цель. Изучение оптимальных условий роллерного культивирования холодоадаптированного реассортантного вакцинного штамма вируса гриппа А/17/Утка/Потсдам/86/92 (H5N2) в культурах клеток MDCK и Vero, выращенных в питательных средах на основе ферментативных гидролизатов соевой и рисовой муки, полученных с помощью трипсина и бромелайна. Материалы и методы. Вакцинный штамм культивировали в роллерах в присутствии растительных протеаз на клетках MDCK и Vero, выращенных в питательных средах на основе растительных гидролизатов. Полученные культуральные образцы вакцинного штамма лиофильно высушивали и оценивали сохранение их инфекционности. Результаты. При культивировании вакцинного штамма в культурах клеток MDCK и Vero, выращенных в экспериментальных средах, содержащих сниженное количество (2 и 3%) сыворотки крови плодов коровы («Gibco», США) соответственно, обнаружены высокие титры в присутствии растительных протеаз: 4 мкг/мл папаина и 20 мкг/мл бромелайна. Заключение. Использование растительных ферментов и питательных сред на основе ферментативных растительных гидролизатов, в том числе полученных с помощью бромелайна, для культивирования вакцинного штамма на культурах клеток MDCK и Vero в роллерах могут сделать производство гриппозных вакцин более безопасным и экономичным.

В обзоре представлены данные литературы об основных иммунобиологических свойствах чумных вакцин первого поколения, а также о направлениях в разработке новых средств специфической профилактики чумы: реком- бинантных живых, химических, антиидиоти- пических, ДНК-вакцин. Оцениваются их ожидаемые достоинства и недостатки, пер- спективы разработки и практического при- менения в системе противоэпидемических мероприятий.

Использование тетрамеров главного ком- плекса гистосовместимости (MHC-тетра- меров) в обнаружении и анализе специфич- ных для антигена T-клеток совместно с проточной цитометрией открыло новые воз- можности для анализа Т-клеточного ответа. МНС-мультимеры позволяют обнаруживать T-клетки, направленные против вирусных, опухолевых или вакцинных антигенов с ис- ключительной чувствительностью и специ- фичностью. Эта техника стала «золотым стандартом» для количественного определе- ния T-клеточного иммунного ответа. Рас- сматриваются некоторые аспекты анализа с помощью МНС-тетрамеров и обсуждается важная роль этой технологии в оценке эффек- тивности Т-клеточного ответа при испытани- ях вакцин против ВИЧ, а также у пациентов, инфицированных ВИЧ.