Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии

Актуальность. Вирус гепатита Е (ВГЕ) — частая причина вирусных гепатитов не только на территориях с низким уровнем водоснабжения и гигиены, но и в промышленно развитых странах. Важнейшей проблемой совершенствования системы диагностики гепатита Е остаётся разработка тестов быстрого определения серомаркеров инфекции для применения в условиях отсутствия специального оборудования и обученного персонала.

Цель работы — получение конъюгатов наночастиц коллоидного золота (НЧЗ) нескольких размеров с рекомбинантным антигеном ORF2 ВГЕ 3-го генотипа и оценка возможности их применения в иммуноанализе для выявления антител к ВГЕ.

Материалы и методы. Исследовали специфические поликлональные и моноклональные антитела, рекомбинантный антиген ORF2 ВГЕ 3-го генотипа, образцы сывороток крови людей с диагнозом острого гепатита. Осуществляли синтез НЧЗ и их конъюгатов с рекомбинантным антигеном, иммуноферментный анализ, дот-иммуноанализ, иммунохроматографический анализ, использовали метод просвечивающей электронной микроскопии.

Результаты. Цитратным методом с использованием различных концентраций восстановителя синтезированы 3 препарата НЧЗ. На их основе получены конъюгаты с рекомбинантным антигеном ORF2 ВГЕ 3-го генотипа, иммунореактивность которых подтверждена методом дот-иммуноанализа с образцами сывороток крови, содержащими специфические иммуноглобулины класса G (IgG). Для применения в иммунохроматографическом анализе отобран конъюгат на основе НЧЗ диаметром 41 нм. Отработаны условия получения мультимембранного композита, включая формирование аналитической и контрольной линий и зоны конъюгата, изготовлены тест-полоски и проведены испытания полученного конъюгата методом иммунохроматографического анализа с образцами сывороток крови, предварительно охарактеризованными по содержанию IgG-антител к ВГЕ. Показана высокая иммунореактивность полученного конъюгата: антитела к вирусу выявлены в 100% обследованных IgG-положительных проб сывороток (n = 17) и не обнаружены в отрицательных пробах (n = 17).

Выводы. Получены иммунореагенты (рекомбинантный антиген, антитела, конъюгат), которые могут быть использованы при создании тест-систем для экспресс-диагностики ВГЕ.

Введение. Всемирная организация здравоохранения в 2022 г. объявила оспу обезьян чрезвычайной ситуацией в области здравоохранения. Вирус оспы обезьян (MPV) принадлежит к роду Orthopoxvirus семейства Poxviridae. Ортопоксвирусы во время репликации образуют 2 отдельные формы вирусных частиц: экзоцитозом выделяется оболочечный внеклеточный вирион (EEV), а зрелый внутриклеточный вирион (IMV) высвобождается в результате лизиса клеток. У этих двух форм вирионов отличаются наборы поверхностных белков, что обусловливает их различия в иммуногенности и инфекционности.

Цель работы — оценка иммуногенной и протективной активности 9 поверхностных антигенов вируса осповакцины.

Материал и методы. Геномы рекомбинантных аденовирусов человека 2-го серотипа, несущих поверхностные антигены вируса осповакцины, получали методом гомологичной рекомбинации в бактериальных клетках с последующей сборкой аденовирусных частиц в клетках НЕК293. Иммуногенные и протективные свойства полученных рекомбинантных аденовирусов изучали на мышах BALB/c. Сыворотки крови после иммунизации животных исследовали методом иммуноферментного анализа на наличие антител к вирусу осповакцины. Протективные свойства оценивали на летальной модели инфекции мышей после интраназального заражения вирусом осповакцины штамма Western Reserve.

Результаты. Наиболее иммуногенными и протективными антигенами вируса осповакцины в составе рекомбинантных аденовирусов человека 2-го серотипа были гликопротеин В5 оболочечного внеклеточного вириона и мембранно-ассоциированный белок Н3 зрелого внутриклеточного вириона. При изучении защитной эффективности антигенов показана 100% эффективность В5 и Н3 при интраназальной иммунизации.

Заключение. При использовании панели рекомбинантных аденовирусных векторов, несущих гены поверхностных белков вируса осповакцины, показано, что оптимальная защита может быть достигнута с помощью комбинации антигенов оболочечного и зрелого вирионов. Данный подход может быть использован при разработке новых поливалентных вакцин против различных вирусных инфекций.

Введение. Данные о распространённости cостояния после COVID-19 (Post-COVID-19 condition, РСС) у детей различаются из-за отсутствия конкретных диагностических критериев, надёжных биомаркеров и ограничений многих проведённых исследований. Важно изучить связь между РСС, функциональными расстройствами в прошлом и любыми событиями после перенесённого COVID-19, чтобы оценить истинное бремя РСС у детей.

Цель — определение распространённости РСС во взаимосвязи с исходными функциональными расстройствами у детей в течение года после нетяжёлой формы COVID-19 и острой респираторной вирусной инфекции (ОРВИ) другой этиологии.

Материалы и методы. В проспективное исследование методом сплошной выборки включены дети младше 18 лет, госпитализированные в больницу с подозрением на COVID-19, у которых COVID-19 был подтверждён в полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (n = 121) или исключён молекулярным и серологическим методами (группа ОРВИ; n = 105). Информация о пациентах собрана с сентября 2020 г. по декабрь 2021 г. путём анкетирования в индексных точках: при выписке из больницы и через 1, 3, 6 и 12 мес. Тяжёлые формы COVID-19 и пациенты с хроническими заболеваниями были исключены. Учитывали функциональные расстройства в анамнезе и любые события, связанные с нарушением здоровья, в течение года наблюдения, выраженность симптомов. Анализ проведён в группах детей < 6 лет и ≥ 6 лет. Симптомы были сгруппированы в кластеры.

Результаты. Симптомы определены с частотой 32% у детей < 6 лет и 39% у детей ≥ 6 лет. Наиболее распространёнными были психоэмоциональный, респираторный кластеры и синдром вегетативных дисфункций (СВД). Симптомы в большинстве случаев были лёгкими с продолжительностью 3–6 мес. После поправки на возраст, СВД в анамнезе и повторные эпизоды ОРВИ не установлено разницы распространённости симптомов между подтверждённым и исключённым COVID-19, кроме гипосмии, частота которой у детей ≥ 6 лет уменьшилась с 14,3% при выписке из больницы до 2,4% через год. Среди пациентов без истории СВД в прошлом и без повторных ОРВИ в течение года РСС de novo было редким явлением (2,7–8,0%) без отличий между COVID-19 и ОРВИ другой этиологии. Риски РСС были существенно повышены у пациентов с СВД в анамнезе: скорректированное отношение шансов через 1 мес — 3,19 (95% ДИ 1,89–5,38), через 6 мес — 3,33 (95% ДИ 1,81–6,15). Множественные (5–25) и устойчивые (во всех индексных точках) симптомы, оценённые пациентами как существенные, возникали de novo редко — 1,7% (95% ДИ 0,4–4,9), но значительно чаще у детей с СВД в анамнезе — 25% (95% ДИ 13,6–39,6%); разница — 23,3% (10,9–35,7%); отношение шансов 14,8 (4,4–50,6); р < 0,001. Повторные эпизоды ОРВИ были важным фактором риска увеличения жалоб когнитивного кластера и ваготонического СВД через 3–6 мес наблюдения.

Заключение. Получены результаты, косвенно поддерживающие концепцию, в которой РСС представляет собой соматоформное функциональное расстройство, вероятно, социогенного характера у тревожных на исходном уровне пациентов. Некоторые пациенты с последствиями COVID-19 и ОРВИ действительно нуждаются в медицинской и психосоциальной реабилитации. Изучение РСС представляет новые аспекты последствий широко распространённых респираторных вирусных инфекций.

Введение. Энтерококки, являющиеся представителями нормобиоты кишечника, играют важную роль в обеспечении колонизационной резистентности слизистых оболочек, продуцируя антимикробные соединения, и поэтому широко используются в качестве основы пробиотических препаратов. В последнее десятилетие серьёзной клинической проблемой стали инфекции, вызванные грибами рода Candida. В связи с этим актуальной является оценка пробиотических характеристик штамма Enterococcus faecium 18 и изучение его противогрибковой активности.

Цель работы — исследовать влияние штамма E. faecium 18 на рост и зрелую биоплёнку грибов рода Candida, а также охарактеризовать его агрегационную и коагрегационную способности.

Материалы и методы. Влияние на рост грибов определяли по динамике оптической плотности бульонных культур, воздействие супернатанта энтерококка на сформированные биоплёнки исследовали в стерильных полистироловых 96-луночных планшетах. Пробиотический потенциал E. faecium 18 оценивали по его способности к аутоагрегации и коагрегационному взаимодействию с 20 штаммами грибов рода Candida разных видов: C. albicans, C. krusei, C. kefir, C. glabrata. Для получения изображений использовали метод сканирующей электронной микроскопии.

Результаты. Показано ингибирующее действие супернатанта E. faecium 18 на рост грибов рода Candida всех исследуемых видов, а также их зрелые биоплёнки. Уровень ингибирования роста сформированных биоплёнок у non-albicans видов составил 58,6–72,9%; у C. albicans — 51,4%. Показатели аутоагрегации E. faecium 18 составили 57,6% через 2 ч инкубации и 60,4% через 5 ч. Штамм E. faecium 18 демонстрировал разные уровни коагрегации с исследованными видами грибов рода Candida, при этом индекс показателя через 5 ч культивирования оказался выше у видов non-albicans, максимальным значением характеризовался вид C. glabrata (85,6%).

Заключение. Полученные экспериментальные данные позволяют рассматривать изученный штамм в качестве основы пробиотика, оказывающего антикандидозное действие.

Введение. Изучение генотипического разнообразия вирусов гепатитов имеет большое значение при проведении анализа эпидемиологической обстановки на конкретной территории, позволяя отслеживать возможные пути передачи инфекции, появление и распространение новых вариантов вирусов.

Цель — оценить динамику заболеваемости хроническими формами вирусных гепатитов В (ХГВ) и С (ХГС) на территории Хабаровского края за 2013–2023 гг., провести анализ генетического разнообразия вирусов гепатитов В (HBV) и С (HCV), циркулирующих в Хабаровске.

Материалы и методы. Ретроспективный анализ заболеваемости ХГВ и ХГС по Хабаровскому краю проведён за 11 лет по данным отчётов Управления Роспотребнадзора по Хабаровскому краю. Выполнен серологический и молекулярно-генетический анализ 112 образцов плазмы крови пациентов с диагнозом «хронический вирусный гепатит», проживающих на территории Хабаровска.

Результаты. В Хабаровском крае с 2013 по 2023 г. заболеваемость ХГС снизилась с 50,0 до 44,6 случая на 100 тыс. населения, а ХГВ — с 10,2 до 8,2. ДНК HBV обнаружена в 21 из 36 образцов плазмы крови пациентов с выявленными серологическими маркерами HBV. Среди 17 исследованных образцов генотип D HBV обнаружен в 15 случаях, представленный субгенотипами D1 и D2, субтип А2 — в 2 образцах. Мутаций лекарственной устойчивости не обнаружено. РНК HCV выявлена в 54 из 78 проб плазмы крови с положительным результатом иммуноферментного анализа на наличие антител (IgG + IgM) к HCV. На территории Хабаровска установлена циркуляция субтипов HCV — 1b, 1а, 3а, 2а, 2с с преобладанием субтипа 1b.

Заключение. Заболеваемость ХГС и ХГВ в Хабаровском крае за 11-летний период наблюдения имела ярко выраженную тенденцию убыли. Результаты исследования дополняют существующие представления о циркуляции геновариантов HBV и HCV на территории России.

Понятие резистотипа представляет собой новую характеристику бактериальных сообществ, отличную от их таксономического состава. Сейчас термином «резистотип» принято обозначать специфические кластеры внутри резистома, обладающие характерным фенотипическим профилем или набором генов резистентности к антимикробным препаратам. В отличие от традиционных подходов, которые фокусируются на отдельных генах резистентности или фенотипических проявлениях устойчивости, анализ резистотипов позволяет рассматривать устойчивость на более комплексном уровне, объединяя различные гены и их взаимодействия в рамках микробных популяций или целого микробного сообщества.

Цели и задачи обзора: проанализировать и обобщить актуальные данные о способах выявления и анализа резистотипов отдельных видов микроорганизмов и бактериальных сообществ.

Проведён анализ источников литературы, посвящённых выявлению резистотипов отдельных видов бактерий и бактериальных сообществ человека и сельскохозяйственных животных за прошедшие 10 лет.

На текущий момент выявление резистотипов микроорганизмов не является распространённой практикой для исследований, связанных с анализом резистентности. Для определения резистотипов изолятов бактерий используются фенотипические методы исследования, редко дополняемые генетическими или геномными данными. Для установления резистома и резистотипов сообществ микроорганизмов используются методы метагеномного секвенирования и биоинформатического анализа.

Заключение. Выявление резистотипов даёт дополнительную оценку резистома в различных популяциях микроорганизмов. Анализ резистотипов может быть применён как в клинической практике — для подбора наиболее подходящего метода терапии, так и в сельском хозяйстве — для улучшения контроля за антибиотикоустойчивостью микроорганизмов, патогенных для животных.