Том 89, № 1 (2012)

Цель. Изучение таксономической структуры возбудителей раневой инфекции, распространенности микстов, а также выявление характера их возможной связи с результатами взаимодействия популяций разных микроорганизмов в гнойных ранах. Материалы и методы. Проведено микробиологическое исследование материалов от больных с раневой инфекцией (РИ), из которых в отделениях реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) пролечены 582 чел. (первая группа), а в хирургических отделениях (ХО) 1455 чел. (вторая группа). Определена таксономическая принадлежность и способность к сосуществованию у 4129 штаммов микроорганизмов. Об этиологической роли возбудителей судили на основании значений показателей постоянства (ПП). Виды, встречавшиеся более чем в 50% проб, считали постоянными, от 25 до 50% - добавочными, а менее, чем в 25% - случайными. Определяли также показатели частоты (ПЧ), т.е. долю конкретного вида (рода) микроорганизма (в %) от всех выделенных культур, принятых за 100%. Для выявления значения возбудителей отдельных видов в структуре смешанных популяций микроорганизмов рассчитывали ПЧ - их долю (%) в смешанных популяциях от числа штаммов этого вида, принятых за 100%. Результаты. Значительная часть штаммов микроорганизмов, чаще в отделениях реанимации (65,5%), вызывала нагноения ран в популяциях, смешанных с другими видами возбудителей. В реанимационных и хирургических отделениях не обнаружено постоянных видов возбудителей раневой инфекции. Выявлена ведущая этиологическая роль Staphylococcus aureus (ПЧ 19,2% и 23,9%), а ПЧ штаммов S. aureus в микстах составил 64,6% в ОРИТ и 46,8% в ХО. Показатели других возбудителей РИ в сравниваемых группах оказались сходными. Однако, ПЧ среди микстов в ОРИТ были достоверно большими для стрептококков, не относящихся к виду S. pyogenes (72,5%), а также неферментирующих микроорганизмов (67,2%), а в ХО - у микстов Klebsiella pneumoniae. Для возбудителей раневой инфекции, особенно в ОРИТ, характерно низкое видовое разнообразие, а количество вариантов микстов существенно выше. В ОРИТ чаще развиваются смешанные инфекции, а экологическая общность микроорганизмов достигает больших значений, чем в ХО. Заключение. При анализе микробиологических данных в ОРИТ и ХО выявлены общие закономерности и специфические особенности таксономической структуры, распространенности смешанных популяций и характер их экологической общности при раневой инфекции.

Цель. Комплексная характеристика по фенотипическим признакам и основным генам вирулентности штаммов Yersinia enterocolitica, циркулирующих в различных регионах РФ. Материалы и методы. Исследовано 46 штаммов Y. enterocolitica 2 - 4 биотипов и 401 штамм Y. enterocolitica биотипа 1А, выделенных на 15 административных территориях РФ (Сибирский, Дальневосточный, Северо-Западный, Уральский федеральные округа) от больных людей, грызунов, сельскохозяйственных животных, птиц, из внешней среды. Фаготипирование проводили в референс-лаборатории института Пастера (Париж). Все культуры Y. enterocolitica изучены на наличие генов ail, ystB и ystA методом ПЦР. Наличие плазмиды вирулентности pYV определяли гельэлектрофорезом по методу T. Kieser. Результаты. Изучено 447 штаммов Y. enterocolitica биотипов 1А и 2 - 4. Большинство штаммов принадлежало к серотипам О:3; О:9; О: 5; О: 6,30; О:6,31; О:7,8. Для части штаммов проведено фаготипирование. У штаммов биотипа 1А определены фаготипы Xz и Xo. Штаммы 2 - 4 биотипов, циркулирующие в Сибири и на Дальнем Востоке, характеризовались фаготипами VIII, X3, встречающимися в других странах, и фаготипом Xz, распространенным только в России. Фаготипы IXa, IXb, II, характерные для штаммов из Канады, Южной Африки, Японии, в РФ не выявлены. Все штаммы 2 - 4 биотипов имели гены ail и ystA. Большинство свежевыделенных штаммов содержали pYV. Единственным фактором патогенности, выявленным у 81,3% штаммов биотипа 1А, включая 14 штаммов от больных, являлся ген ystВ. При этом заболевания сопровождались выраженной клинической симптоматикой энтерита и энтероколита. Заключение. Выделение штаммов биотипа 1А от больных обусловливает необходимость проведения диагностических исследований на кишечный иерсиниоз пациентов с диагнозом «острая кишечная инфекция неустановленной этиологии».

Цель. Изучить динамику цитокинов INFƒ, INFƒ, ФНОƒ у здоровых взрослых при введении вакцины гриппозной инактивированной субъединичной моновалентной, штамм А/California/7/2009/ (H1N1). Материалы и методы. Уровень цитокинов INFƒ, INFƒ, ФНОƒ исследовали в сыворотке крови 58 практически здоровых взрослых в возрасте 18 - 60 лет. В работе использовали наборы для иммуноферментного определения уровня цитокинов ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск). Титр антител к штамму А/California/7/ 2009/(H1N1) определяли в аналогичные сроки с использованием реакции микронейтрализации (РМН). Результаты. Дана оценка изменениям уровня цитокинов IFNƒ, IFNƒ и ФНОƒ у здоровых волонтеров, привитых пандемической противогриппозной вакциной. По казано, что вакцина безопасна. Выявлено, что двукратное введение вакцины не сопровождается изменением уровня ФНОƒ, что дополнительно свидетельствует о безопасности пандемической вакцины. По казано, что содержание IFNƒ имеет тенденцию роста у вакцинированных волонтеров. Показатели IFNƒ у волонтеров с нормальным уровнем этого цитокина (до 10 пг/мл) достоверно увеличились после второй вакцинации с 2,66±2,48 до 5,21±2,56. Анализ корреляций показал, что имеется сильная отрицательная связь между уровнем INFƒ, IFNƒ и сероконверсией.

Цель. Изучение антагонистической активности лактобацилл толстой кишки относительно представителей ее аутохтонной бактериальной флоры и возбудителей некоторых острых инфекционных и хронических заболеваний желудочно-кишечного тракта. Материалы и методы. В рамках специально разработанной методики двухэтапного культивирования в условиях комбинированной системы оценена антагонистическая активность 19 культур лактобацилл относительно 28 культур бактерий различной групповой принадлежности и грибов. Результаты исследования оценивали согласно полуколичественной шкале, позволяющей поставить в соответствие той или иной величине зоны задержки роста культуры испытуемого штамма ту или иную (низкую, умеренную, высокую) степень антагонистической активности культуры лактобацилл. Результаты. Лактобациллы толстой кишки проявляли избирательную антагонистическую активность относительно патогенных энтеробактерий (Sal monella enterica Serovar Enteritidis, Shigella flexneri 2b, Yersinia spp.) и следовую относительно Salmonella enterica Serovar Typhimu rium. Степень антагонистической активности лактобацилл относительного широкого круга представителей аутохтонной бактериальной флоры варьировала в весьма широких пределах, не обнаруживая при этом связи ни со своей видовой принадлежностью, ни с популяционным уровнем, ни с групповой принадлежностью объектов антагонистического воздействия. С другой стороны, прослеживалась связь с принадлежностью к определенной микробиоте: являясь весьма активными относительно представителей собственной микробиоты, лактобациллы зачастую проявляли значительно менее выраженный уровень антагонистической активности относительно культур одноименных видов, выделенных из иных микробиот. Заключение. В свете полученных результатов популяционный уровень лактобацилл вряд ли может рассматриваться как единственный критерий полноценности их участия в процессе стабилизации микроэкологического благополучия тол стой кишки, позволяющий составить исчерпывающее представление о степени дисбиотических нарушений в биотопе. В рамках рациональной бактериологической диагностики степени дисбиотических нарушений в толстой кишке наряду с оценкой популяционного уровня лактобацилл следует оценивать и степень их антагонистической активности относительно прочих составляющих той же микробиоты.

Цель. Выделение и сравнение составов экстрацеллюлярных антигенов (ЭЦА) патогенных буркхольдерий в электрофорезе в ПААГ с SDS и использование их для дифференциации этих микроорганизмов иммунодиффузионными методами. Материалы и методы. Изучено 60 штаммов Burkholderia pseudomallei, 14 штаммов B. mallei, 5 штаммов B. thailandensis, 4 штамма B. cepacia. ЭЦА получали по методике Liu на F-агаре, покрытом целлофаном. Электрофорез в ПААГ с SDS проводили в 10% геле по Laemmli, реакцию иммунодиффузии (РИД) в 1% агарозном геле, РИД с живыми культурами, иммуноэлектрофорез (ИЭФ) ставили по общепринятым методикам. Для получения сывороток кроликов иммунизировали смесью ЭЦА с неполным адъювантом Фрейнда. Результаты. Спектры ЭЦА типичных штаммов изучаемых видов буркхольдерий после электрофореза в ПААГ с SDS, окрашенные серебром, имеют 8 - 9 мажорных фракций. Высоким сходством обладают электрофореграммы ЭЦА B. pseudomallei и B. thailandensis. Анализ состава ЭЦА в РИД с иммунными сыворотками к ЭЦА выявил максимальное количество перекрестнореагирующих ЭЦА (3) между B. pseudomallei и B. thailandensis. Эти штаммы имели только по одному перекрестному ЭЦА со штаммом B. mallei. РИД с живыми культурами с иммунной сывороткой к ЭЦА B. thailandensis выявлял ЭЦА у всех штаммов B. pseudomallei, B. thailandensis и не выявлял их у всех штаммов B. mallei. Анализ электрофореграмм, полученных с помощью метода ИЭФ ЭЦА патогенных буркхольдерий с иммунными сыворотками к ЭЦА выявил различия в их составах, достаточные для их дифференцирования. Заключение. Выявленные иммунодиффузионными методами различия составов ЭЦА позволили разработать дополнительные способы дифференциации возбудителей сапа и мелиоидоза.

Цель. Изучение гетерогенности вируса гепатита В у взрослых пациентов с хроническим гепатитом В и определение диагностических возможностей современных тест-систем при выявлении HBsAg с аминокислотными заменами в области главного гидрофильного региона (MHR). Материалы и методы. В 27 изолятах вируса гепатита В, выделенных у пациентов с хронической инфекцией вирусом гепатита В, проживающих в г. Владимире, определена нуклеотидная последовательность участка генома, соответствующего preS1/preS2/S генам. Результаты. Во всех 27 изолятах обнаружен вирус генотипа D, представленный тремя субгенотипами - D1, D2 и D3, выявленными в 18%, 26% и 56%, соответственно. Исходя из распределения нуклеотидных замен в сравниваемых функциональных участках генома ВГВ: сайт, кодирующий вход вируса в клетку (2875 - 2991 н.о.), pre-S2/S промоторный участок (2994 - 3171 н.о.), 5'-концевые последовательности pre-S2 и S-генов (3172 - 154 и 155 - 455 н.о.), MHR (455 - 635 н.о.) и 3'-концевая последовательность S-гена (636-835 н.о.) установлено, что замены сконцентрированы главным образом в промоторном участке S2/S-генов (30,8%). По предсказанной аминокислотной последовательности в 24 из 27 образцов были определены серотипы HBsAg, причем в 17 случаях HBsAg относился к серотипу ayw2 (71%) и в 7 случаях - к серотипу ayw3 (29%). В 5 изолятах идентифицированы аминокислотные замены G145A, M133I, S132T, локализованные в главном гидрофильном регионе, и P217L, S207N, V184A, локализованные в С-конце белка S, связанные с диагностическим и вакцинным ускользанием. Заключение. Изучены диагностические возможности тест-систем при определении HBsAg с известной аминокислотной последовательностью в области MHR. Показаны приблизительно одинаковые возможности шести тест-систем выявлять HBsAg с наличием аминокислотных замен G145A, M133I и S132T, локализованных в MHR.

Цель. Исследование экспрессии генов врожденного иммунитета (TLR9 и BD-2) в эпителиальных клетках роговицы мышей на модели вирусного кератита при применении иммунотерапии. Материалы и методы. Выделение РНК из клеток роговицы проводили с использованием комплектов реагентов RNeasy Mini Kit (Qiagen) и «РИБО-сорб» (ИЛС, РФ). Для проведения ПЦР использовали «Набор для проведения ПЦР-РВ в присутствии интеркалирующего красителя SYBR Green I» (Синтол, Россия). Данные по экспрессии генов представлены в десятичных логарифмах (относительно 1 млн копий гена ƒ-актина). Результаты. У мышей линии C57Bl/6 к 1 суткам после инфицирования вирус определялся у 33% мышей, к 3 суткам - у 90%, к 7 суткам число инфицированных мышей начало уменьшаться. Установлено, что в роговице мышей, инфицированных ВПГ-1, наблюдалось достоверное снижение экспрессии гена TLR9, Применение комплекса природных цитокинов и противомикробных пептидов (препарата Суперлимф) вызывало статистически значимое повышенные уровня экспрессии исследуемых генов TLR9 и BD-2. Заключение. Модель вирусного кератита и анализ экспрессии генов распознающего рецептора TLR9 и дефенсина (BD-2) могут быть использованы для изучения механизма действия различных препаратов на течение вирусной инфекции в тканях глаза и оценки возможности их применения в комплексной терапии офтальмогерпеса.

Цель. Изучение показателей окислительного стресса и апоптоза нейтрофилов у больных анкилозирующим спондилитом, системной красной волчанкой, системной склеродермией и ревматической болезнью сердца. Материалы и методы. Обследованы 240 больных ревматическими заболеваниями и 25 здоровых добровольцев группы контроля. Выделение нейтрофилов периферической крови проводили на двойном градиенте плотности фиколла-урографина. Функциональную активность клеток исследовали хемилюминесцентным методом. Экспрессию проапоптозного антигена bak нейтрофилами изучали с использованием стрептавидин-биотинового метода. Для анализа продукции оксида азота нейтрофилами использовали реактив Грисса. Результаты. Обнаружено усиление процессов кислородзависимого метаболизма нейтрофилов у больных анкилозирующим спондилитом в сравнении с больными системной красной волчанкой и системной склеродермией. Системная красная волчанка характеризуется более высокой биоцидностью нейтрофилов в сравнении с таковой при системной склеродермии и ревматической болезни сердца. Усиление активности нейтрофильных гранулоцитов при анкилозирующем спондилите сопровождается ростом образования супероксид-аниона. Несмотря на высокий уровень метаболической активности, нейтрофилы больных анкилозирующим спондилитом обладают низким функциональным резервом, а наиболее высокий резервный потенциал имеют нейтрофилы больных системной склеродермией. Заключение. Различия показателей экспрессии нейтрофилами факторов окислительного стресса зависят от нозологической формы, отличаясь уровнем продукции и резервом образования активных форм кислорода.

В обзоре рассматриваются особенности хантавирусного пульмонального синдрома - зоонозной природно-очаговой полиэтиологической вирусной инфекции, характеризующейся поражением легких. Рассмотрены этиология заболевания, основные характеристики возбудителей, эпидемиология, контагиозность, патогенез, клиническая картина этой патологии. Описана лабораторная диагностика, лечение и профилактика хантавирусного пульмонального синдрома.