Том 90, № 4 (2013)

Цель. Изучение экстрактов растений, обладающих способностью нейтрализовать цитотоксическую активность гемолизина. Материалы и методы. Использованы препараты очищенного и рекомбинантного гемолизина V.cholerae eltor, а также супернатанты штаммов V.cholerae. Определение цитотоксической активности гемолизина и нейтрализующей активности растительных экстрактов проводили с помощью культур клеток СНО-К1 и CaCo2. Результаты. Из 9 водных экстрактов только три - экстракты ревеня, кермека и дуба нейтрализовали гемолизин в культуре клеток СНО-К1 и CaCo2, тогда как остальные экстракты (хмеля, базилика, чистотела, грецкого ореха, тысячелистника и зверобоя) не обладали антицитотоксическим эффектом. Нейтрализующие свойства экстрактов проявляются при их совместном инкубировании с препаратами гемолизинов и супернатантами штаммов V.cholerae уже в течение 10 минут. Заключение. Экстракты растений, обладающие антицитотоксической активностью в отношении гемолизина, перспективны для разработки лечебно-профилактических препаратов.

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) остается актуальной природно-очаговой нетрансмиссивной инфекцией, составляя более 90% в структуре всех геморрагических лихорадок, регистрируемых на территории Российской Федерации. В целом в многолетней динамике заболеваемости ГЛПС в России отмечается выраженная тенденция к росту со средним приростом заболеваемости 1,7% ежегодно, что связано как с улучшением клинической и лабораторной диагностики, так и с объективным ростом заболеваемости. В настоящее время создана нормативная методическая база для организации эпидемиологического надзора и профилактики ГЛПС в Российской Федерации.

Цель. Выявить особенности микрофлоры верхних дыхательных путей на примере флоры небных миндалин и уровень антител к внутриклеточным паразитам как маркеров этиологических факторов респираторных инфекций у детей школьного возраста в период ремиссии. Материалы и методы. Обследованы 466 детей, относящихся к группам часто и эпизодически болеющих. Всем детям проводили бактериологическое исследование мазков с поверхности небных миндалин. Методом ИФА с помощью соответствующих коммерческих тест-систем определяли уровень IgG к Herpes simplex virus, Cytomegalovirus, Chlamydophila pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Human respiratory syncytial virus в сыворотке крови в соответствии с инструкцией по применению. Результаты. В период ремиссии инфекционного процесса в структуре микрофлоры верхних дыхательных путей у часто болеющих детей выявлены характерные отличия от их эпизодически болеющих сверстников. У детей с частыми респираторными инфекциями также обнаружена большая распространенность антител к внутриклеточным возбудителям этих заболеваний. В группе часто болеющих выявлена прямая корреляция между частотой инфекционных заболеваний дыхательных путей и распространенностью носительства патогенных и условно патогенных микроорганизмов, а также с повышением антител к Herpesviridae, Cytomegalovirus, C. pneumoniae и M. pneumoniae. Заключение. Большую распространенность внутри- и внеклеточных инфекционных агентов, а также их ассоциаций можно рассматривать как одну из причин недостаточной эффективности профилактических мероприятий у часто болеющих детей.

Цель. Изучить реакцию клеток APUD-системы лимфоидных органов и кишечника морских свинок на этапах морфо- и иммуногенеза в ответ на введение вакцинного штамма Yersinia pestis EV линии НИИЭГ. Материалы и методы. Вакцинный процесс моделировали на морских свинках при подкожном заражении животных культурой вакцинного штамма Yersinia pestis EV линии НИИЭГ. Для гистологического исследования забирали кусочки тимуса, селезенки, лимфатических узлов и участок двенадцатиперстной кишки. Препараты окрашивали растворами гематоксилина и эозина, импрегнировали серебром по Гримелиусу и Массону в модификации Гамперля. Результаты. Установлен дозозависимый характер влияния противочумной вакцинации на реакцию апудоцитов в иммуно-компетентных органах и двенадцатиперстной кишке биомоделей, косвенно отражающий направленность процессов иммуногенеза в центральных и периферических органах иммунной системы. Показано, что изменение количества и морфофункционального состояния апудоцитов в кишечнике иммунизированных морских свинок свидетельствует о заинтересованности этого сегмента APUD-системы в процессах иммуногенеза при чуме. Заключение. Установлен диапазон изменений количества и функционального состояния апудоцитов в лимфоидных органах и кишечнике животных при противочумной вакцинации. Определены количественные параметры морфофункционального состояния апудоцитов кишечника, которые могут быть использованы для характеристики выраженности адаптационно-компенсаторных процессов в организме биомоделей при моделировании любого экспериментального вакцинного процесса, а также в качестве дополнительного косвенного показателя при оценке реактогенности живых вакцин против чумы.

Цель. Изучение влияния метаболитов Н 2О 2-продуцирующих лактобацилл на ферментативную и бактерицидную активность лизоцима. Материалы и методы. Использованы 9 Н 2О 2-продуцирующих вагинальных лактобацилл, Micrococcus luteus NCTC 2665, Escherichia coli ГИСК № 240367, Lactobacillus acidophilus ИКВС № 37. Способность лактобацилл продуцировать Н 2О 2 оценивали по окислению тетраметилбензидина перокси-дазой. Лизоцим модифицировали путем смешивания с равными объемами метаболитов лактобацилл, в контроле использовали метаболиты Н 2О 2-продуцирующих вагинальных лактобацилл, предварительно обработанные каталазой. Ферментативную активность лизоцима определяли по скорости лизиса M.luteus, бактерицидную - по выживаемости E.coli на среде Эндо и L. acidophilus - на среде MRS. Результаты. Выявлено снижение ферментативной активности лизоцима вследствие его контакта с метаболитами Н 2О 2-продуцирующих лактобацилл. Этот эффект сопровождался ростом бактерицидной активности лизоцима в отношении E. coli и уменьшением в отношении L. acidophilus. Степень изменения ферментативной и бактерицидной активности лизоцима метаболитами лактобацилл зависела от концентрации в них пероксида водорода. Заключение. Модификация лизоцима метаболитами Н 2О 2-продуцирующих лактобацилл, приводящая к оппозитному изменению его активности в отношении автохтонных и аллохтонных бактерий, является одним из механизмов формирования стабильного микробного биоценоза в организме человека.

Цель. Изучение видового состава и биологических свойств микроорганизмов, выделенных из нижнего отдела дыхательных путей 34 больных хирургических отделений при искусственной вентиляции легких. Материалы и методы. Выделено и идентифицировано общепринятыми методами 59 штаммов микроорганизмов из трахеобронхиального секрета больных при интубации и экстубации. У изолятов определена гемолитическая и анти-лизоцимная активность по описанным ранее методам (Бухарин О.В., 1999). Результаты. При экстубации установлено повышение обсемененности микроорганизмами трахеобронхиального секрета больных, увеличение видового разнообразия микроорганизмов и частоты встречаемости высоковирулентных штаммов, характеризующихся способностью гемолизировать эритроциты и высокими значениями антилизоцимной активности. Заключение. Полученные данные могут быть использованы для прогнозирования риска развития заболеваний дыхательной системы.

Цель. Выбор информативных биомаркеров для диагностики инфицирования Mycobacterium tuberculosis и дифференциальной диагностики активного туберкулеза (ТБ) легких и латентной туберкулезной инфекции (ЛТБИ). Материалы и методы. Обследованы 54 больных туберкулезом, 47 контактных по ТБ лиц и 43 здоровых донора. Всем лицам, включенным в исследование, выполнен «QuantiFERON-TB Gold In-Tube» («Cellestis», Австралия). Измерены значения спонтанной (NIL) и антигениндуцированной (AG)про-дукции 10 цитокинов (EGF, MIP-1p, VEGF, IL-2, IL-4, IL-6, IL-1a, IFN-a2, TGFa, TNFa), также как и sIL-2Ra и sCD40L с использованием технологии XMap. Также определяли уровень IP-10 у 48 чел методом ИФА. Результаты. Шесть из 13 биомаркеров различали активный ТБ и ЛТБИ. В результате построения дерева решений в программе JMP 9.0. были выбраны три наиболее значимых маркера. Использование комбинации цитокинов IFNy AG-NIL, TGFa NIL и IL-6 AG позволило разделить больных ТБ и контактных лиц с чувствительностью 96,3 % и специфичностью 80,7% (ППК=0,9). Мы также наблюдали очень высокий уровень IP-10 и IL-2, который коррелировал с IFNy AG-NIL (r= 0,71 и 0,79 соответственно). Заключение. IL-2 и IP-10 также, как и IFNy, могут использоваться в качестве полезных биомаркеров в качестве первого этапа для диагностики инфицирования M. tuberculosis. На втором этапе предлагается проводить определение IL-6, IFNy и TGFa для дифференциальной диагностики активного ТБ и ЛТБИ.

Приведены данные об антимикробных пептидах (АМП) лактобацилл, механизме их повреждающего действия, химической природе и генетическом контроле. Вне зависимости от источника выделения АМП лактобацилл, исключая реутерин, являются пептидами с низкой молекулярной массой (4-6 kDa), отличаются друг от друга по химическому строению, чувствительности к температуре, действию различных ферментов, активны при нейтральном или чаще при низких значениях рН. Особое значение имеют механизмы, обеспечивающие тонкую регуляцию фенотипической экспрессии синтеза бактериоцинов и формирование иммунитета к их воздействию. Активность, а главное, уровень их продукции зависит от условий, в которых находятся эти бактерии, и контролируется трехкомпонентной системой регуляции. Эта система включает в себя сигнальный пептид (феромон), сенсорную гистидинкиназу, белок регулятор, активирующий транскрипцию. Устойчивость продуцента к действию собственного бактериоцина обеспечивается так называемым «белком иммунитета». АМП лактобацилл способны влиять на сеп-тообразование, синтез пептидогликана и белка, воздействовать на цитоплазматические мембраны, вызывая их дестабилизацию. Описаны этапы повреждающего действия: взаимодействие эффекторных пептидов с мембраной чувствительной клетки, позиционирование пептида в области соединения с белковым рецептором, погружение в сердцевину мембран спиральной структуры с образованием поры и истощением пула АТФ, приводящие к гибели клетки. Защиту от АМП определяют специфические белки, блокирующие формирование поры в мембране прямым связыванием повреждающих молекул или их рецепторов. Обсуждены перспективы дальнейших исследований роли антимикробных пептидов лактобацилл.