Том 88, № 4 (2011)

Цель . Сравнительный анализ штаммов Yersinia pestis с различными биологическими свойствами по содержанию ДНК в отдельных клетках. Материалы и методы . Использовали вирулентный штамм 231, авирулентный штамм КМ 260 (12) [231], являющийся его изогенной (бесплазмидной) производной, и вакцинный штамм ЕV НИИЭГ. Готовили 2-суточные агаровые культуры исследуемых штаммов, выращенные при 28°C, а также их субкультуры, полученные путем подращивания исходных культур при аэрации на жидкой питательной среде при 37°С. Фиксированные бактерии окрашивали по ДНК смесью бромида этидия и митрамицина, а затем исследовали на проточном цитофлуориметре для определения в исследуемых бактериальных популяциях долевого соотношения клеток с относительно низким и высоким содержанием ДНК. Степень неоднородности бактериальной популяции оценивали по значению коэффициента вариации ДНК гистограмм. Результаты . К 6 ч роста при 37°C в оптически неплотных бактериальных культурах устанавливалась высокая степень неоднородности по содержанию ДНК на клетку, связанная с активацией в бактериях процесса репликации ДНК. К 48 ч роста эта неоднородность полностью исчезала в культурах вирулентного штамма и сохранялась в культурах авирулентного штамма возбудителя чумы. Вакцинный штамм занимал промежуточное положение по исследуемым показателям. Заключение . Дальнейшие исследования неоднородности культур возбудителя чумы по содержанию ДНК на клетку могут стать основой для оперативной дифференциации штаммов по степени патогенности (опасности) для человека, а значит, и требований по обеспечению безопасных условий работы с данным микроорганизмом.

Цель. Исследование микробного пейзажа ран при гнойно-некротических осложнениях у больных с синдромом диабетической стопы (СДС), а также возможности подавления развития в этих ранах бактериальных биопленок методом ультразвуковой кавитации (УЗК). Материалы и методы . В исследование включены две рандомизированные группы больных: основная, состоящая из 145 человек с гнойно-некротическими осложнениями СДС, у которых применяли ультразвуковую кавитацию, и группа сравнения из 86 пациентов, находившихся на базисном лечении. В основной группе для обработки ран применяли аппарат «Sonoca-180» фирмы Söring (Германия), позволяющий совместить процесс механической обработки ран и антибактериальное действие низкочастотного ультразвука. Бактериологическим методом исследовали количественный и качественный состав микрофлоры ран с параллельным использованием трансмиссионной и сканирующей электронной микроскопии в динамике лечения методом УЗК. Результаты. У больных с СДС обнаружены бактериальные биопленки, содержащие скопления микроорганизмов в составе полисахаридного матрикса, фиксированные к поверхности плотных структур ран на надкостнице. В микробном пейзаже ран у пациентов с СДС в 21% случаев обнаруживали аэробно-анаэробную микрофлору, при этом ассоциации включали, в основном, от 2 до 5 видов бактерий — представителей родов Peptococcus, Peptostreptococcus, Prevоtella, Bacteroides. Реже обнаруживали бактерий родов Staphylococcus, Acinetobacter, Pseudomonas, Escherichia и Klebsiella. Применение УЗК в основной группе в короткие сроки приводило к снижению уровня микробной контаминации ран. Заключение. Метод УЗК по сравнению с классическим способом лечения осложнений при СДС, позволяет у больных с гнойно-некротическими осложнениями не только механически удалять некротизированные ткани, но и эффективно подавлять сформировавшиеся в ранах бактериальные биопленки, что способствует ускорению процесса выздоровления и подготовки пациентов к дальнейшему пластическому хирургическому вмешательству.

Цель. Изучение культуральных, вирусологических, антигенных свойств 89 изолятов пандемического вируса гриппа А(H1N1)2009, выделенных на территории Российской Федерации с мая 2009 г. по март 2010 г. Материалы и методы . Свойства выделенных изолятов изучали в сравнении с референс-штаммом A/California/04/2009 (H1N1). Результаты. Изучение биологических свойств и анализ нуклеотидных последовательностей геномов выделенных изолятов показали их тесное родство с референс-штаммом. Заключение. Слежение за генетическими, вирусологическими, антигенными свойства- ми изолятов пандемического вируса гриппа A(H1N1)2009, проведенное в период с мая 2009 г. по март 2010 г., не выявило существенных изменений в указанных свойствах вируса или появления мутаций, способных при- вести к такого рода изменениям.

Цель. Изучение механизма вирусингибирующего действия полиэлектролитов (ПЭ) полистиролсульфоната (ПСС) различной степени полимеризации и полиаллиламина (ПАА) молекулярной массой 60 кДа в отношении вируса кори. Материалы и методы. Объектом исследования служил вирус кори штамм Ленинград-16. Кинетику снижения инфекционного титра вируса после взаимодействия с ПСС со степенью полимеризации 8 (ПСС 8), 31, 77, 170, 360, 430 и ПАА определяли методом титрования с определением цитопатогенного действия в перевиваемой культуре клеток Vero. Спектры кругового дихроизма и флуоресценции вирусных белков были получены с помощью спектрофотометра Zenith 200st (РФ) и дихрографа Jasco J-810 (Япония). Результаты. Выявлено достоверное снижение инфекционного титра вируса кори после взаимодействия с ПСС со степенью полимеризации 8 и ПАА в концентрациях 30 мМ. Анализ спектров кругового дихроизма и белковой флуоресценции позволил выявить механизм взаимодействия указанных ПЭ с поверхностными белками вируса кори. Он заключается в повреждении вторичной структуры вирусных белков гидрофобным поляр- ным остовом данных ПЭ, а также во взаимодействии полианиона ПСС 8 с положительными зарядами белковых групп, что приводит к образованию петель и хвостов, разрушающих α-спирали. Заключение. Используемые в работе ПЭ можно рассматривать как потенциально возможные противовирусные препараты, а методы кругового дихроизма и белковой флуоресценции применять для выявления повреждений вторичной структуры вирусных белков агентами различной природы.

Цель. Оценка изменений регуляции иммунного ответа и возможного риска антенатальных нарушений развития плода в поствакцинальном периоде у беременных, привитых против гриппа A (H1N1). Материалы и методы. Женщин вакцинировали во II триместре физиологически протекающей беременности вакциной «МоноГриппол плюс». В определенные сроки вакцинального периода (перед вакцинацией, на 7, 30 сутки) оценивали основные биохимические маркеры в сыворотке крови (аланин аминотрансфераза, аспартат аминотрансфераза, лактатдегигдрогеназа, щелочная фосфатаза, креатинин, мочевина) и уровень ключевых цитокинов в спонтанном и стимулированном тестах (ИЛ-1α, ИЛ-1РА, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10, ИФНγ, ФНОα). Безопасность вакцинации для плода и развития трофобласта оценивали по уровню хорионического гонадотропина человека (ХГЧ), альфа-фетопротеина (АФП) и трофобластического бета-1-гликопротеина (ТБГ). Результаты. При вакцинации в 13% случаев отмечены слабо выраженные местные реакции, в 26,1% — общие системные реакции в виде слабости, головокружения, головной боли. Уровень основных биохимических мар- керов на 7 и 30 сутки после вакцинации каких-либо достоверно значимых отличий от исходных значений не имел (р>0,05). Уровень цитокинов в спонтанном и стимулированном тестах также существенно не изменялся. Маркеры течения беременности и развития плода (ХГЧ, АФП и ТБГ) в двух группах наблюдения имели сопоставимые значения. Заключение. Вакцинация беременных против гриппа A (H1N1) отечественным субъединичным препаратом «МоноГриппол плюс» по выраженности воздействия на общий метаболический и иммунологический гомеостаз, а также на течение беременности показывает реактивность, сопоставимую с контрольной группой, и свидетельствует о ее безопасности.

Цель . Разработать метод определения антицитокиновой активности (АЦА) микроорганизмов, изучить распространенность и выраженность АЦА в отношении про- и противоспалительных цитокинов у патогенных и условно патогенных бактерий. Материалы и методы. Определена АЦА у 72 штаммов микроорганизмов включая представителей кишечной микрофлоры и штаммы патогенных бактерий (сальмонеллы и гонококки). Изучение способности супернатантов и клеток живых культур микроорганизмов вызывать изменение концентрации про- (ИФН-γ, ФНО-α, ИЛ-6) и противовоспалительных цитокинов (ИЛ-4, ИЛ-10) проводили путем коинкубирования экзометаболитов и живых клеток бактерий, грибов с рекомбинантными цитокинами. Результаты. Разработан методический подход, позволивший определить АЦА, распространенность которой среди исследуемых микроорганизмов составляла 50-62%. Снижение концентрации цитокинов в среде отмечено при коинкубировании их с супернатантами (в 56% случаев) и в меньшей степени - с клетками живых культур (44%) исследуемых бактерий и грибов. Экспрессия антицитокиновой активности была максимально выражена в отношении ФНО-α (Bifidobacterium spp. и Lactobacillus spp., Neisseria gonorrhoeae), ИФН-γ (N.gonorrhoeae и Salmonella enterica) и ИЛ-10 (Bifidobacterium spp. и Lactobacillus spp.). Заключение. Полученные данные расширяют представления о модификации патогенными и условно патогенными микроорганизмами динамики цитокинов, что может влиять на течение и исход инфекционного процесса.

Цель . Исследование способности рекомбинантного белка FlaA западносибирского изолята Borrelia garinii 20047 реагировать с антителами сывороток больных иксодовым клещевом боррелиозом. Материалы и методы . В работе использовали рекомбинантный антиген FlaA, сыворотки больных иксодовым клещевом боррелиозом, генно-инженерные методы, метод твёрдофазного ИФА и методы параметрической и непараметрической статистики. Результаты . Получена рекомбинантная форма зрелого флагеллярного белка FlaA B.garinii 20047. При исследовании методом ИФА сывороток больных иксодовым клещевым боррелиозом с мигрирующей эритемой и без нее IgM или IgG к антигену FlaA выявлены более, чем в 30% сывороток. Показатель обнаружения IgM к антигену FlaA в сыворотках больных иксодовым клещевым боррелиозом c мигрирующей эритемой и без нее составил 43,3 и 33,3% соответственно. Заключение . Полученные результаты свидетельствуют о существенной антигенной активности рекомбинантного белка FlaA западно-сибирского изолята B. garinii и перспективах его использования для серодиагностики иксодового клещевого боррелиоза.

Цель. Оценить поствакцинальный иммунитет против гриппа у больных с бронхо-легочной патологией. Материалы и методы. В исследовании участвовали 22 больных с бронхо-легочной патологией, вакцинированных против гриппа препаратом «Гриппол плюс». По данным медицинской документации отслеживалась частота гриппа и острых респираторных заболеваний (ОРЗ), частота и длительность обострений основного заболевания. Для оценки иммуногенности вакцины использовали реакцию торможения гемагглютинации в парных сыворотках до вакцинации и через 6 и 12 мес после ее проведения. Результаты. Ни у одного пациента в течение года грипп диагностирован не был. Выявлено снижение частоты ОРЗ на 37%. Частота обострений основного заболевания уменьшилась в 1,9 раза, длительность обострений - в 2 раза. В работе пред- ставлены показатели иммуногенности для штаммов A/H1N1/Brisbane/59/07, A/H3N2/ Uruguay/716/2007, B/Florida/4/2006. Иммуногенность штамма B/Brisbane/60/2008, не входящего в состав вакцины, недостаточна для формирования адекватной защиты. При сравнении иммуногенности вакцины у больных с бронхо-легочной патологией и здоровых лиц статистических отличий не выявлено. Заключение. Вакцина «Гриппол плюс» для больных с заболеваниями органов дыхания является иммуногенной и оказывает клинический эффект, снижая заболеваемость гриппом и часто- ту обострений основного заболевания

Цель. Изучение инфицированности Helicobacter pylori населения Северо-Западного Федерального Округа в том числе Санкт- Петербурга, в 2007 - 2009 гг . Материалы и методы. Обследован 1021 человек с различными патологиями пищеварительного тракта, а также субъективно здоровые лица и доноры крови. Среди обследованных были 378 детей и подростков в возрасте до 19 лет и 643 взрослых в возрасте 20 - 80 лет. В сыворотке крови определяли IgG к комплексному антигену H.pylori и IgG к его токсину CagA. Результаты. Инфицированность детей и подростков была равна 40,48%, инфицированность CagA-позитивными штаммами - 34,92%. Среди взрослого населения эти показатели составили 63,61 и 49,61% соответственно. В ходе 3-летнего наблюдения отмечена тенденция к возрастанию частоты CagA-позитивных штаммов среди детей и подростков. Распространенность инфекции H.pylori у субъективно здоровых лиц, больных онкологическими за- болеваниями кишечника и раком желудка, была равна 55,1; 67,16 и 83,33% соответственно. Заключение. Высокая инфицированность и распространенность CagA-позитивных штаммов среди детей и подростков рассматривается как вероятная причина роста частоты гастритов и язвенной болезни в данных возрастных группах.

Цель. Оценить реактогенность, безопасность и иммуногенность «Ультрагривак» - вакцины гриппозной аллантоисной интраназальной живой, созданной на основе реассортантного штамма А/17/Утка/Потсдам/ 86/92 H5N2 [17/H5], при проведении 2 фазы клинических испытаний с использованием двух схем иммунизации. Материалы и методы. Исследовали 4 группы добровольцев: 1 группа - 40 человек вакцинированы двукратно с интервалом 10 сут; 2 группа - 40 человек вакцинированы двукратно с интервалом 21 сут; 3 группа (контроль) - 10 человек получали плацебо двукратно с интервалом 10 сут; 4 группа (контроль) - 10 человек получали плацебо двукратно с интервалом 21 сут. Оценивали местный (секреторный IgA), клеточный и гуморальный иммунный ответ. Гуморальный иммунный ответ оценивался по интенсивности прироста среднегеометрических титров антител к двум штаммам вируса гриппа А/17/Утка/Потсдам/86/92 H5N2 [17/ H5] и А/Chicken/Suzdalka/Nov-11/2005 (H5N1) и по уровню достоверных (4-кратных и более) сероконверсий антител после вакцинации. Результаты. После применения «Ультрагривак» уровень секреторных IgA в полости носа вакцинированных добровольцев в группах с ревакцинацией через 10 и 21 сут достоверно повышался. Повторная иммунизация с интервалом 10 или 21 сут значительно усиливала поствакцинальный гуморальный иммунный ответ. При этом индукция гуморального иммунного ответа при двукратной вакцинации с интервалом 10 сут была не менее эффективной, чем через 21 сут. Заключение. Вакцина гриппозная аллантоисная интраназальная живая «Ультрагривак» ареактогенна, безвредна для вакцинируемых, безопасна для окружающих, а также обладает иммуногенными свойствами не только по отношению к гомологичному вирусу А(H5N2), но и к штамму вируса гриппа А(H5N1).

Профилактика инфекционных заболеваний, передаваемых клещами - важная проблема современной медицины. Один из перспективных способов ее осуществления - создание вакцин против укуса клеща (антиклещевых вакцин). В обзоре описаны современные методы контроля за инфекционными заболеваниями, передающимися клещами. Рассмотрены особенности естественного и искусственного антиклещевого иммунитета. Описаны кандидатные антигены клещей для конструирования вакцин против укусов клещей рода Ixodes. Дана оценка перспективности использования антиклещевых вакцин против клещевых трансмиссивных инфекций.

Приводятся данные литературы и обсуждаются проблемы профилактики гриппа в разных возрастных группах населения. Профилактика гриппа новорожденных возможна за счет индукции материнских антител, что диктует необходимость вакцинации против гриппа беременных. Среди детей проблема профилактики гриппа наиболее остро стоит в возрасте от 6 месяцев до 2 лет. Для иммунизации детей этих возрастных групп необходимы более эффективные вакцины, не вызывающие при этом неблагоприятные реакции. Профилактика гриппа у здоровых работающих взрослых крайне важна для снижения экономического ущерба при эпидемиях этого заболевания. Для профилактики гриппа у пожилых лиц целесообразно использовать новые более эффективные вакцины с адъювантами. Оптимальный метод профилактики гриппа у всего населения - массовая вакцинация детей (80%), при которой помимо формируемой защиты детей может снизиться на 80% заболеваемость гриппом в остальных возрастных группах невакцинированного населения.