Том 94, № 6 (2017)

Цель. Изучение дитотоксического воздействия штаммов Yersinia pestis с различной степенью вирулентности на лейкоциты цельной дефибринированной крови человека. Материалы и методы. В работе использовано 15 штаммов Y. pestis. ДНК-гистограммы регистрировали с помощью проточного цитофлуориметра. Результаты. Экспериментально обоснована возможность использования показателя цитотоксичности для дифференциации штаммов Y. pestis на вирулентные и авирулентные. Полученные данные сопоставимы с показателем LD₅o для мышей и не противоречат молекулярно-генетическим характеристикам штаммов. Заключение. Предлагаемый подход позволяет получать достоверные результаты и является перспективным для оценки вирулентности штаммов Y. pestis.

Цель. Изучение молекулярно-генетических особенностей MRSA, вызывающих гнойно-воспалительные осложнения у онкологических больных. Материалы и методы. В работе использованы бактериологический метод, молекулярно-генетические методы - ПЦР. М-ПЦР, секвенирование. Результаты. Доля MRSA среди стафилококковых инфекций у онкологических больных в 2003 - 2007 гг. составила 37,6%, а в 2010 - 2015 гг. возросла до 51.3%. При исследовании молекулярно-генетических особенностей выделенных штаммов MRSA установили наличие двух основных клонов: ST239/spa3(t037)/SCCmecIfIA и ST8/ spai(t008)/SCCmecIVc. Представители клонов отличались уровнем резистентности к антибактериальным препаратам. Заключение. У онкологических больных в Красноярске выявлено распространение двух вариантов MRSA -- ST239i

Цель. Изучение современных проявлений манифестного и скрыто протекающего эпидемического процесса Эпштейна-Барр инфекции, а также выявлении ее особенностей среди женщин детородного возраста и новорожденных. Материалы и методы. Проведен эпидемиологический анализ заболеваемости инфекционным мононуклеозом и ВИЧ-инфекцией в Российской Федерации. Изучены тенденции динамики заболеваемости, ее распределение по территориям и возрастным группам. На неблагополучной территории проведено изучение частоты выявления маркеров инфицирования у женщин фертильного возраста, в т.ч. ВИЧ-инфицированных беременных, а также новорожденных. Результаты. Установлено, что несмотря на сложности диагностики, заболеваемость инфекционным мононуклеозом следует рассматривать как индикатор манифестно протекающего эпидемического процесса Эпштейна-Барр инфекции. У беременных ВИЧ-инфицированных женщин, в отличие от здоровых беременных, маркеры острой инфекции, протекавшей без клинических проявлений, наблюдались достоверно чаще. Максимальная интенсивность активно протекающего эпидемического процесса выявлена среди беременных 15 - 19 лет, находящихся в латентной стадии течения ВИЧ-инфекции с заражением при внутривенном введении наркотиков. В более старших возрастных группах беременных наблюдалась реинфекция. Высокая инфицированность новорожденных, а также обнаружение маркеров острой инфекции свидетельствуют о необходимости дальнейших исследований с целью получения строгих доказательств вертикальной передачи возбудителя. Заключение. Получены доказательства высокой активности эпидемического процесса Эпштейна-Барр инфекции среди женщин фертильного возраста. Максимальная частота маркеров инфицирования выявлена среди ВИЧ-инфицированных беременных, что повышает риск внутриутробного инфицирования плода и новорожденных.

Цель. Исследовать влияние термостабильного (ТСТ) и термолабильного (ТЛТ) летальных токсинов Yersinia pseudotuberculosis на формирование биопленки этими бактериями. Материалы и методы. Для выделения токсинов и проведения экспериментов использовали штамм Y. pseudotuberculosis 512 (рУУ48МД, рУМ82МД) и штамм 2517, несущий плазмиду вирулентности pYV и утративший ее. Результаты. В присутствии ТЛТ наблюдалась стимуляция образования биопленки при 20°С как штаммом 2517 (pYV+), несущим плазмиду вирулентности, так и бесплазмидным штаммом 2517 (pYV). При низкой положительной температуре (6 - 8°С) ТЛТ снижал количество сформированной биопленки. ТСТ ингибировал образование биопленки обоими исследуемыми штаммами Y. pseudotubercuiosis при инкубации в течение 3 суток при 20°С и 6 - 8°С. Со снижением температуры степень ингибирования уменьшалась. Заключение. Оба белковых токсина Y. pseudotuberculosis влияют на формирование биопленки бактериями псевдотуберкулеза, однако воздействие ТЛТ и ТСТ на процессы образования биопленки различаются, и механизм такого действия токсинов предстоит выяснить.

Цель. Исследование влияния методов иммобилизации эритропоэтина на чувствительность выявления специфических IgG к человеческому эритропоэтину (чЭПО) в сыворотках крови экспериментальный животных. Материалы и методы. В работе использовали сыворотки крови кроликов и морских свинок, полученных после введения препаратов эритропоэтина. Схемы иммуноферментного метода включали варианты пассивной иммобилизации человеческого рекомбинантного эритропоэтина (чрЭПО) на планшете и два варианта иммунохимической иммобилизации: связывание биотинилированного чрЭПО в лунках планшета с пассивно иммобилизованным стрептавидином и связывание чрЭПО с пассивно иммобилизованными на планшетах антителами к эритропоэтину. Результаты. Показано, что иммунохимическая иммобилизация приводит к повышению чувствительности в диапазоне от 2 до 10 раз при выявлении антител к чЭПО по сравнению с пассивной иммобилизацией. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о значительном влиянии метода иммобилизации чрЭПО на чувствительность выявления антител к чЭПО. При выявлении антител к нативным конформационным эпитопам иммунохимическая иммобилизация является предпочтительной.

Цель. Получение рекомбинантного аналога полноразмерного белка ORF3 вируса гепатита Е (ВГЕ) 1 генотипа. Материалы и методы. Штаммы Escherichia coli, плазмидные векторы, серологический и клинический материал, иммуноферментные тест-системы. Молекулярно-биологические, биоинформационные, биотехнологические, биохимические и серологические методы. Результаты. Из препарата РНК ВГЕ 1 генотипа, выделенного от больного из Киргизии, получена рекомбинантная плазмида, содержащая ДНК копию субгеномной вирусной РНК. С использованием данной плазмиды получены штаммы E.coli - продуценты рекомбинантного антигена ORF3 ВГЕ 1 генотипа в виде слитного с Р-галактозидазой E.coli полипептида, содержащего полноразмерную копию белка ORF3. Для повышения уровня экспрессии рекомбинантного белка проведена оптимизация кодонов клонированного фрагмента кДНК. Рекомбинантный белок ORF3 выделен из телец-включений биомассы штамма-продуцента и очищен методом эксклюзионной хроматографии. Антигенная специфичность полученного полипептида подтверждена методами иммуноферментного анализа и вестерн-блоттинга со специфическими сыворотками. Заключение. Разработан рекомбинантный антиген ORF3 ВГЕ 1 генотипа и экспериментально показана возможность его применения в диагностических тестах.

Цель. Исследование влияния пробиотических бактерий Lactobacillus plantarum 8РАЗ и Escherichia coli Ml7 и липополисахаридов на ультраструктуру плотных контактов энтероцитов слизистых оболочек тощей кишки крыс. Материалы и методы. В работе применяли липополисахарид Escherichia coli (Sigma-Aldrich, Германия) и пробиотические бактерии L. plantarum 8РАЗ и Е. coli Ml7. Исследование выполняли на крысах самцах линии Wistar. Сравнительный анализ ультратонкого строения энтероцитов и плотных контактов проводили при последовательной инкубации тощей кишки крыс с пробиотическими бактериями L. plantarum 8РАЗ и Е. coli М17, липополисахаридами и комплексом указанных бактерий с липополисахаридами. Результаты. Воздействие L. plantarum 8РАЗ на слизистую оболочку тощей кишки крыс по ряду признаков оказалось сходным с действием Е. coli Ml7, что проявлялось в сохранении интактной структуры межклеточного пространства и плотных контактов. При этом обнаруженные в цитоплазме энтероцитов полые сферические включения с фрагментами бактерий, окруженных мембранами, свидетельствовали о возможности проникновения пробиотических бактерий через слизистую оболочку тощей кишки трансцеллюлярным путем. При одновременном воздействии на энтероциты тощей кишки комплекса из пробиотических бактерий с липополисахаридами деструктивных изменений в структуре плотных контактов не отмечали, однако в значительном числе случаев бактериальные клетки обнаруживались в межклеточном пространстве рядом с бокаловидными клетками. Заключение. Выявлен сходный характер воздействия грамположительных бактерий L. plantarum 8РАЗ и грамотрицательных бактерий Е. coli М17 и их комплексов с липополисахаридами на плотные контакты эпителиоцитов тощей кишки. На основании морфологического анализа высказано предположение о возможном влиянии липополисахаридов на участие пробиотических бактерий в парацеллюлярном транспорте, однако в отсутствие липополисахаридов пробиотические бактерии, возможно, проникали через слизистую оболочку тощей кишки крыс трансцеллюлярным путем.

В обзоре даны современные сведения о строении, генетическом разнообразии и факторах патогенности пневмовирусов - респираторно-синцитиального вируса человека (PC-вируса) и метапневмовируса человека, в связи с образованием нового семейства Pneumoviridae по решению международного совета по таксономии вирусов в 2016 году Представлены результаты собственных клинико-эпидемиологических исследований в сравнении с данными литературы. Выявлена цикличность циркуляции РС-вируса. Проведено сравнение клинико-эпидемиологических характеристик данных инфекций. Показана лидирующая роль PC-вируса при ОРВИ детей и значимость метапневмовируса как этиологического агента респираторной инфекции взрослых. Подчеркивается важная роль обоих вирусов в развитии инфекций нижних отделов дыхательных путей. Проанализированы факторы, способствующие широкой распространенности PC-вируса у больных ОРЗ детей. Рассмотрены аспекты профилактики данных инфекций.

Инфекции, вызываемые условно патогенными микроорганизмами (УПМ), занимают особое положение. В микробных ассоциациях УПМ проще реализовать свой невысокий патогенный потенциал, потенциируя свойства друг друга. Группа полиэтиологичных инфекций, вызываемых УПМ, достаточно разнообразна с точки зрения нозоформ и нозогрупп. В их число входят так называемые гнойно-септические инфекции (ГСИ), которые также весьма разнообразны и по клинико-эпидемиологическим, и этиологическим характеристикам. Научные данные демонстрируют актуальность проблемы полиэтиологичных инфекций, особенно в хирургии, и свидетельствуют об отсутствии систематизированных данных о всем спектре и составе микробных ассоциаций при разных инфекциях, количественной оценки, недостаточном изучении свойств с сравнении с моновозбудителями. Проблема полиэтиологичных инфекций практически не изучена с эпидемиологических позиций, только единичные исследования посвящены изучению внутрибольничного инфицирования микробными ассоциациями, не разработан микробиологический мониторинг. В связи с этим, требуется комплексное исследований полиэтиологичных инфекций в сравнении с моноэтиологичными для выявления особенностей и разработки эпиднадзора и контроля.