Том 91, № 3 (2014)

Цель. Изучение продукции бактериальных про- и антиоксидантов в вагинальном биотопе и анализ их роли в регуляции механизмов гомеостаза симбиоза. Материалы и методы. Исследовали продукцию пероксида водорода, ингибиторов каталазы и антиоксидантов у бактерий, выделенных от 63 женщин с эубиозом влагалища и у 53 - с дисбиозом. Продукцию про- и антиоксидантов регулировали лактатом, летучими жирными кислотами, полиаминами и экзополисахаридами Lactobacillus plantarum и Corynebacterium minutissimum, бактерицидность метаболитов пероксидпродуцирующих лактобацилл усиливали добавлением ионов железа (II). Результаты. Для состояния эубиоза отмечен высокий уровень продукции прооксидантов и антиоксидантов, а их соотношение близко к единице, для биотопов с дисбиозом характерно многократное преобладание уровня микробных антиоксидантов над прооксидантами. Пероксидпродуцирующие симбионты являются важным компонентом системы генерации гидроксильных радикалов, которые являются высокоэффективным дезинфектантом широкого спектра действия. Заключение. Поддержание баланса продукции про- и антиоксидантов симбионтами определяет гомеостаз симбиоза вагинального биотопа. Выявленная высокая биоцидная активность гидроксильных радикалов, образующихся из пероксида водорода нормофлоры за счет создания оптимальных условий для их генерации путем подбора соответствующих концентраций ионов железа (II) и Н2О2, открывает перспективы разработки новых способов дезинфекции.

Цель. Исследовать особенности экспрессии иммунореактивности слизистых в зависимости от их топики и этиопатогенеза патологического процесса. Материалы и методы. Проанализированы данные 30 клинически здоровых детей и 77 детей с острыми и рецидивирующими заболеваниями респираторного тракта: 51 - с острым и 15 - с хроническим бронхитом; а также 132 женщин: 41 - с активной стадией острой урогенитальной хламидийной инфекции, 29 - с рецидивами хронического процесса, 30 - с безрецидивной формой и 32 клинически здоровые женщины. Анализировали содержание в слюне и отделяемом слизистых урогенитального тракта IgG, sIgА и секреторного компонента, ИЛ-1β, 4, 6, 8, 9, 10, 12, γ-ИФН, α-ФНО и ГМ-КСФ, уровень экспрессии генов TLR-2, TLR-3, TLR-4, TLR-8, а также содержание лизоцима, общего белка и лейкоцитов. Результаты. Подтверждена массивность, универсальность и практически одномоментный запуск механизмов иммунного реагирования слизистых на интервенцию чужеродных агентов независимо от их локализации. Четко прослеживается зависимость экспрессии иммунореактивности от формы патологического процесса, его локализации и качественных и количественных характеристик инфекционного агента. Наиболее высокий уровень клиниколабораторных и иммунологических показателей свойственен пациентам с острыми процессами в слизистых урогенитального тракта (цервикальном канале и уретре), особенно вызванным микст-инфекциями. Заключение. Иммунодиагностические показатели слизистых, среди которых наиболее выделяется система TLR, обладают высокими информационными свойствами, позволяющими не только диагностировать воспалительный процесс, но и дифференцировать его форму и характер течения.

Цель. Изучение распределения генов и гаплотипов системы HLA A, B, DRB1, DQA1, DQB1 у здоровых лиц и больных туберкулезом легких представителей русской популяции Челябинской области для выделения маркеров риска развития различных клинических форм туберкулеза. Материалы и методы. Исследуемую группу составили 86 пациентов, больных туберкулезом легких Противотуберкулезного диспансера №3 г. Челябинск русской национальности. Группу сравнения составили 239 здоровых доноров Челябинской областной станции переливания крови русской национальности. HLA-типирование проводили методом мульти-праймерной полимеразной цепной реакции - PCR SSP, генотипирование HLA II - наборами НПФ «ДНК-технология» («ДНК-технология», Россия) HLA I класса по методикам, описанным в статье Downing J.M.G. et al. (2004). Детекцию результатов проводили методом электрофореза. Результаты. У больных туберкулезом легких установлена высокая частота встречаемости гаплотипа HLA DRB1*16-DQA1*01:02-DQB1*05:02/4. У больных с фиброзно-кавернозной формой повышена частота встречаемости генов В*08 и DRB1*03, и не встречались гены DRB1*07 и DQA1*02:01. При очаговой форме определена высокая частота аллелей HLA В*15 и HLA DRB1*15 по сравнению с инфильтративной формой. Гаплотип HLA A*01-B*08-DRB1*03-DQA1*05:01-DQB1*02:01 встречался только в группах больных с более тяжелыми формами туберкулеза. Заключение. Выделены маркеры чувствительности к клиническим фенотипам туберкулеза.

В промышленно развитых странах отмечается увеличение числа заболеваний, обусловленных нарушенным состоянием иммунной системы, в том числе связанных с аллергией. Аллергические заболевания, как правило, протекают на фоне разных распространенных воспалительных заболеваний, возникающих в детском возрасте. Активно исследуется роль микрофлоры кишечника в ее взаимодействии с иммунной системой и определяющие факторы в аллергизации детей. Было показано, что снижение риска развития аллергии в последующей жизни у детей, выросших в сельской местности, может быть связано с микроорганизмами, присутствующими в этой среде. И поэтому положительный потенциал фермерских хозяйств сейчас рассматривают как результат активации врожденного иммунитета с помощью микробных компонентов. Выделенный из коровников Acinetobacter lwoffii F78 способен защитить мышей в эксперементальной модели аллергии путем активации TM-поляризационной программы дендритных клеток. Кроме того, важная роль в патогенезе аллергических заболеваний принадлежит тучным клеткам. Пробиотические лактобациллы могут ослаблять активацию тучных клеток и высвобождение медиаторов воспаления, связанных с аллергическими реакциями. Способность кишечной микрофлоры влиять на иммунный ответ привела к новым подходам в терапии, которые используют эти различия в микробиоте в лечении и профилактике больных аллергией. И поэтому, основываясь на «гигенической гипотезе» возникновения аллергии, высказывается суждение, что ранние манипуляции с микробными сообществами кишечника могут предложить новую стратегию для предотвращения аллергической сенсибилизации.

Благодаря бурному развитию молекулярно-биологических и генетических методов исследования в инфектологии, а также использованию адекватных моделей (колонизация ткани респираторного эпителия человека, мышиные модели колонизации, сепсиса и менингита) за последние десятилетия достигнут существенный прогресс в области изучения факторов патогенности пневмококка. Помимо известного фактора патогенности - капсульного полисахарида, у пневмококка к настоящему времени выявлено несколько десятков поверхностных белков, обеспечивающих адгезию, колонизацию и инвазию. Токсическим фактором и одновременно фактором инвазии в мозг является пневмолизин. Многие из известных факторов патогенности участвуют в образовании биопленки, способствующей длительной колонизации носоглотки. У части поверхностных белков и пневмолизина доказана их протективная активность, что создает основу для разработки новых рациональных пневмококковых вакцин как альтернативу полисахаридным.

Понятие «молекулярная эпидемиология» введено в научную литературу Kilburn E. et al. в 1973 году. Первый период в развитии молекулярной зпидемиологии инфекционных болезней может быть назван «генотипическим» (80-90-е годы ХХ века). В ходе его создавалась методология молекулярного маркирования патогенов для целей мониторинга их распространения и детекции вспышек (новая номенклатура коринебактерий дифтерии на основе риботипирования; международная сеть PulseNet для мониторинга инфекций пищевого происхождения; международная база данных сполиготипов микобактерий туберкулеза). Второй - «геномный» период начался в нулевые годы ХХ! века. Молекулярная эпидемиология быстро прошла путь от единичных маркеров (генотипов, или отдельных генов) до расшифровки полного генома патогенов. Геномный подход и понятия «пангеном», «коровый геном», «мобилеом», «резистом», «вирулом» и др. заняли важное место в изучении эмержентных и пандемичных инфекций. Знания о генетических механизмах, ведущих к возникновению и глобальной диссеминации новых патогенов, придают молекулярной эпидемиологии собственное научное содержание и превращают ее из методического направления в самостоятельную отрасль эпидемиологии. Третий - «метагеномный» период начинается в наши дни на базе метагеномного подхода, который позволяет без процедуры культивирования определять всю совокупность геномов в исследуемом образце. В ближайшей перспективе это приведет к смене вековой парадигмы диагностики и надзора за инфекциями: вместо поиска отдельных (целевых) патогенов - к характеристике полного спектра микроорганизмов в материале от больных или пробах внешней среды с его идентификацией на любую таксономическую глубину. В системах регионального и глобального эпидемиологического надзора будет реализован всеобъемлющий мониторинг всех известных и вновь появляющихся патогенов с построением и ведением метагеномных паспортов сред обитания человека.

В обзоре кратко представлены принципы и этапы проведения таких высокоэффективных методов разделения белков как капиллярный, 2D гель-электрофорез, жидкостная хроматография, возможность их успешной комбинации с тандемной масс-спектрометрией и применения в различных областях протеомики. Рассмотрены основные задачи протеомного анализа, а также пути их решения с помощью масс-спектрометрии. В обзоре описаны два основных подхода при идентификации белков, даны характеристики и показаны возможности различных аналитических программных методов top-down и bоttom-uр протеомики.