Том 87, № 1 (2010)

Цель. Изучение микрофлоры нижних дыха- тельных путей разных возрастных групп детей, больных муковисцидозом, в динамике для вы- явления ее изменчивости и определения воз- можных источников инфекционных осложне- ний. Материалы и методы. Проанализирована 141 история болезни детей, больных муковис- цидозом, разных возрастных гру пп, прож и- вающих в ра з личны х рег иона х Российской Федерации. В динамике обследованы 84 ре- бен к а, бол ьн ы х м у ковисц и дозом, ж и т елей Москвы и Московской области, проходивших лечение амбулаторно и в стационаре. Для иден- тификации и характеристики микроорганиз- мов использованы микробиологические, мо- лек ул я рно-г енет и ческ ие и стат ист и ческ ие методы исследования. Результаты. Установлено, что хроническая синегнойная, стафилококко- вая или смешанная инфекция начинает диа- гностироваться у 25% детей у же в возрасте 1 — 4 лет, а к 18 годам выявляется у 80% больных м у ковисци дозом. В 2/3 сл у чаев вы явл яется ассоциация микроорганизмов, причем у го- спитализированных больных эти ассоциации представлены в 60% случаев 3 — 5 микроорга- низмами. В составе ассоциаций кроме основ- ны х возбудителей Pseudomonas aer uginosa и Staphylococcus aureus часто встречаются пред- ставители грамотрицательных неферментиру- ющих микроорганизмов — Burkholderia cepacia, Stenotrophomonas maltoph i l ia, Aci netobacter baumanii, что, вероятно, обусловлено тропиз- мом этих видов микроорганизмов к легочной ткани. Заключение. Для больных муковисцидо- зом характерным проявлением является хро- ническая смешанная инфекция. Расшифровка возможных механизмов инфицирования лег- ких больных муковисцидозом позволит раз- работать систему профилактики инфекцион- ных легочных осложнений у таких больных.

Цель. Проведение генотипирования штаммов Hib, изолированных в регионах России, и характеристика генетических связей типированных штаммов со штаммами, выделенными на других территориях. Материалы и методы. Методом мультилокусного секвенирования-типирования проведена генетическая характеристика 31 штамма Haemophilus influenzae серотипа b, выделенного в регионах России в период 2005-2008 гг. Результаты. У изученных штаммов наблюдается 11 вариантов сиквенс-типов, шесть из которых были описаны в предыдущих иссле- дованиях, пять - впервые выявлены при про- ведении данной работы. Наиболее часто встречались штаммы с ST-92 (13, или 42% штаммов) и ST-6 (6, или 19% штаммов). Типированные штаммы распределены по двум клональным комплексам. Клональный комплекс «А1/А2» («ST-6») объединяет все типированные штаммы, за исключением штамма с ST-93, входящего в клональный комплекс «B1b» («ST-93»). Большинство изученных штаммов (19, или 61%) имеют отличие от «центрального» сиквенс-типа клонального комплекса «А1/А2» («ST-6») не более чем по одному аллелю. Заключение. Клональная структура исследованных штаммов аналогична распределению, наблюдаемому у московских и зарубежных штаммов.

Цель. Оценить уровень антител у беременных женщин к антигенам дифтерийных, коклюшных и столбнячных микробов. Материалы и методы. Обследованы 102 практически здоровые беременные женщины в возрасте от 18 до 35 лет. Противодифтерийные и противостолбнячные антитела выявляли с помощью реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) с дифтерийным и столбнячным антигенными диагностикумами. Антитела к антигенам Bordetella pertussis определяли с помошью реакции агглютинации (РА) и иммуноферментного анализа (ИФА). Результаты. Защитные титры противодифтерийных и противостолбнячных антител обнаружены соответственно у 91,2 и 94,1% обследованных, а высокие - у 24,5 и 27,4%. В ИФА низкие титры IgG к антигенам коклюшного микроба обнаружены у 70,6% обследованных, а средние и высокие - у 22,5 и 6,9% соответственно. Условно защитные титры противококлюшных антител в РА имели 10,8 % обследованных. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о высоком уровне защищенности беременных женщин против дифтерии и столбняка и низком уровне противококлюшного иммунитета.

Цель. На клинических данных и в эксперименте на животных изучить особенности специфического иммунитета у больных дифтерией. Материалы и методы. Исследовали сыворотки крови 80 больных (инфекционная клиническая больница № 2, Москва), леченных противодифтерийной сывороткой (концерн «Иммуноген», Ставрополь). Локализованная дифтерия ротоглотки выявлена у 29 больных, распространенная — у 8, субтоксическая — у 3, токсическая I степени — у 19, II — у 12, III — у 9 чел. Экспериментальную часть проводили на беспородных кроликах весом 3,0 — 3,5 кг. Содержание антитоксина в сыворотках крови определяли в реакции пассивной гемагглютинации с коммерческим антигенным эритроцитарным диагностикумом (НИИВС им. И.И. Мечникова, Москва). Результаты. У контрольных кроликов, не имевших базисного иммунитета, дробное введение токсина в течение 5 дней не приводило к изменению иммунного статуса, и после введения противодифтерийной сыворотки динамика содержания антитоксина в сыворотке их крови была аналогична той, которую мы наблюдали после введения сыворотки интактным животным. Максимум содержания антитоксина (1,0 — 2,0 МЕ в 1 мл) отмечали через 1 — 3 суток, а к 13 — 15 суткам антитоксин в сыворотки крови не определялся. В сыворотке крови у 59 из 80 обследованных больных (74%) был обнаружен дифтерийный антитоксин в концентрации от 0,03 до 40,0 МЕ в 1 мл. Только у 21 больного (26%) антитоксин в сыворотке крови обнаружен не был. Заключение. Наличие антитоксина в сыворотке крови свидетельствует об активной иммунной реакции организма на инфекцию и включении специфических механизмов иммунитета по принципу «бустер-эффекта», что позволяет прогнозировать более легкое течение болезни. Отсутствие антитоксина в сыворотке крови больного при поступлении в клинику свидетельствует, что инфекционный процесс развивается на фоне отсутствия специфического иммунитета, что предполагает вероятность развития тяжелых форм дифтерии.

Цель. Определение степени экспрессии Toll- подобных рецепторов (TLRs) в селезенке и лимфатических узлах мышей при мукозальных методах иммунизации. Материалы и методы. Иммунизацию мышей поликомпонентной вакциной Иммуновак ® проводили мукозально и подкожно. У иммунизированных мышей определяли уровень экспрессии TLRs в селе- зенке, лимфатических узлах, ассоциированных с органами дыхания, и в тонком кишечнике методом проточной цитометрии. Результаты. После иммунизации мышей подкожным, интраназальным и пероральным способами по различным схемам уровень экспрессии TLRs был различным. При непарентеральных методах введения отмечена значительная экспрессия TLR9 и отсутствие экспрессии TLR2. При пероральном методе экспрессию TLRs выявляли в лимфоидной ткани, ассоциированной с органами желудочно-кишечного тракта, дыхательных путей и селезенки; при интраназальном — в лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистой органов дыхания, а при подкожной — в селезенке и лимфоидной ткани, ассоциированной с органами дыхания. Заключение. При пероральном методе иммунизации экспрессия TLRs была установлена во всех исследованных органах, в том числе в селезенке. Участие селезенки в этом процессе позволяет предположить формирование не только местного, но и системного иммунитета.

Цель. Продемонстрировать возможность создания на основе фосфоресцентного анализа (ФОСФАН) теста для одновременного выявления и дифференциации специфических IgG к вирусам к лещевого энцефалита (КЭ) и лихорадки Запа дного Нила (ЛЗН). Материалы и методы. В работе использовали 26 сывороток больных ЛЗН, 25 — КЭ и 66 — клинически здоровых доноров крови. Иммуноанализ проводили в лунках планшета, на дне которых были «напечатаны» активные микрозоны в виде комплекса вирусспецифических антигенов с иммобилизованными моноклональными антителами; в каждую лунку был включен внутренний контроль специфичности. Видовую принадлежность антител определяли на основе не менее чем 2-кратного превышения значения коэффициента позитивности (P/N) обследуемой пробы с гомологичным антигеном над гетерологичным. Результаты. ФОСФАН обеспечивает одновременное выявление в сыворотке крови человека IgG к двум родственным флавивирусам: ЛЗН и КЭ. Использование критерия P/N, оцениваемого с гомологичным и гетерологичным антигеном, позволило правильно установить видовую принадлежность антител при анализе примерно 90% сывороток больных ЛЗН и КЭ. Заключение. ФОСФАН позволяет выявлять и дифференцировать IgG к вирусам ЛЗН и КЭ при исследовании одной пробы сыворотки в одной лунке планшета без снижения чувствительности по сравнению с ИФА при раздельном тестировании проб. Это обеспечивает экономию биоматериала и является преимуществом

Цель. Определение влияния состава питательной среды на антагонистические свойства штамма B.рumilus «Пашков». Материалы и методы. В исследовании использовали штаммы B.subtilis 3H, B.subtilis 534, B.subtilis 1719, B.рumilus «Пашков». Для определения антагонистической активности использова ли тест-штаммы бактерий из коллекции ГИСК им. Л.А.Тарасевича. Выращивание культуры бактерий B.рumilus на средах № 9, № 5, ВК-2, Спицайзена и L-бульоне проводили периодическим культивированием в течение 72 часов в условиях постоянной аэрации при температуре 37°C. Ингибирующее действие отобранных проб оценивали по влиянию на кинетику роста тесткультур с помощью микробиологического анализатора с планшетным фотометром «BIOSCREEN/iEMS — reader MF» фирмы «LabMetod» (Финляндия). Результаты. Выраженные антагонистические свойства проявляются на средах № 9 и № 5 с максимальным значением на третьи сутки. При добавлении лактозы на примере среды № 9 удалось увеличить бактериостатический эффект (БСЭ) как против отдельных штаммов, так и в совокупности против всех тест-штаммов — в среднем на 16%. Подбор оптимальной концентрации различных компонентов позволил создать новую питательную среду, обеспечивающую максимальную антагонистическую активность у изученного штамма B.pumilus. Заключение. На примере культивирования спорообразующего штамма B.рumilus «Пашков» подтверждено влияние состава питательной среды на антагонистические свойства в отношении патогенных и условно патогенных бактерий. Оптимизация углеводного, солевого и других компонентов питательной среды позволила повысить до 100% БСЭ штамма B.рumilus «Пашков» как в отношении отдельных тест-штаммов, так и в совокупности против всех тест-штаммов. Данное исследование открывает перспективы получения субстанций направленного пробиотического действия.

Цель. На клиническом материале и в экспериментах на животных оценить эффективность различных дозировок противодифтерийной лошадиной сыворотки (ПДС). Материалы и методы. На 12 кроликах и 51 морской свинке исследовали протективные свойства и динамику содержания гетерологичных антител в сыворотках их крови при в/м введении различных доз ПДС, а также в сыворотках крови 26 больных, получавших однократно в/м различные дозы ПДС, и сыворотках 10 больных с разными по тяжести течения формами дифтерии, получившими в суммарных дозах 100-1500 тыс. ME на курс лечения. Содержание антитоксина в сыворотках крови определяли в РПГА, а также в реакции нейтрализации токсина по Иенсену на кроликах. Результаты. В опытах на лабораторных животных, получивших ПДС в дозе 150 ME на 1 кг веса, выявлен высокий защитный эффект. Так, кролики, содержавшие через 24 часа после введения ПДС 1,0-1,25 МЕ/мл антитоксина в сыворотке крови, были в 50-250 раз более устойчивы к дермонекротическому действию дифтерийного токсина по сравнению с кроликами, не получавшими ПДС. Морские свинки, содержавшие через 24-48 часов после введения 150 ME ПДС на 1 кг веса 0,5-2,0 МЕ/мл антитоксина в сыворотке крови, в 100% случаев были защищены от 35-50 LD 50 дифтерийного токсина. После прекращения введения ПДС наблюдалось резкое снижение концентрации антитоксина, и к 7 суткам антитоксин в сыворотке крови не определялся. Повышение концентрации антитоксина в крови животных не было адекватным количеству введенной ПДС. При изучении сыворотки крови 26 больных, получивших однократно внутримышечно различные дозы ПДС, установлено, что дозы, равные 20 000-30 000 ME, обеспечивают наличие в сыворотке крови больных 0,5-3,0 МЕ/мл антитоксина; 50 000 ME - 1,25-10,0 МЕ/мл; 70 000 - 100 000 ME - 2,5 - 20,0 МЕ/мл. Заключение. Относительно малые дозы ПДС обеспечивают достаточно высокую степень защиты от дифтерийного токсина, что следует учитывать при лечении больных дифтерией.

Дана современная редакция гипотезы И.И.Мечникова об ассоциации соматических болезней с инфекционными агентами. Перечислены бактерии и вирусы, ассоциированные с миокардитами, разными видами кардиомиопатии, атеросклерозом, гастритами, язвенной болезнью кишечника и двенадцатиперстной кишки, диабетом типа 1. Суммированы данные литературы, свидетельствующие о том, что вакцина против гриппа уменьшает среди пожилых людей в зимний период число инфарктов и инсультов со смертельным исходом и число госпитализаций по поводу обострения хронической сердечно-сосудистой и цереброваскулярной патологии. Рассмотрены данные о вероятности совпадения прививок против гриппа с днями внезапной смерти пожилых людей.

Приводятся данные по разработке и изучению адъювантов гриппозных вакцин для профилактики гриппа человека и птиц. Рассмотрены требования к перспективным адъювантам и основные группы адъювантов: минеральные соли алюминия, производные сквалена, полигликозиды и иммуномодуляторы, а также экспериментальные адъюванты. Представлены данные анализа результатов ряда клинических исследований гриппозных вакцин с адъювантами против вирусов гриппа птиц. На основании анализа опубликованных данных сделан вывод о перспективности гриппозных вакцин с применением новых адъювантов.