DOT-IMMUNOASSAY USING GOLD NANOPARTICLE MARKED COLLOID GOLD FOR THE DETECTION OF BOTULINIC TOXIN IN CLINICAL MATERIAL AND FOOD PRODUCTS

Cover Page


Cite item

Full Text

Abstract

Aim. Construction of test-systems for dot-immunoassay using colloid gold nanoparticles as a marker of specific antibodies for the detection of botulinic toxin in clinical material and food products. Materials and methods. 20 nm gold nanoparticles were used as a marker of specific antibodies. IgGs were isolated from polyvalent diagnostic sera against type А, В, С, E, F botulin toxins produced by SPC Allergen (Stavropol) with 5000 - 10 000 ME activity. Botulin toxin in clinical material (blood sera) from 3 patients with established botulism clinical diagnosis as well as food product (home-made mushroom soup solyanka) was determined by dot immunoassay on nitrocellulose membrane. Results. Botulin toxin was detected in all the studied samples (blood sera from 3 patients and the soup) that was registered in the patient No. 1 at the 1:2112 dilution of fhe studied sample, in patient No. 2 - 1:32, in patients No. 3 - 1:1056, in the food product - 1:8. Botulin toxin was not detected in the negative control (pure cultures of the dysentery cauzative agents and intestine yersinosis, blood sera of the patient with All and a healthy individual as well as canned beans in tomato sauce and canned green peas). Conclusion. A highly sensitive specific test-system was developed for dot-immunoassay based on the commercial anti-botulin antibodies labelled with colloid gold particles that allows to detect botulin toxins within 2 hours in the sample volume of 1 - 2 microlites .

About the authors

T. Yu. Zagoskina

Irkutsk Research Institute for Plague Control

Author for correspondence.
Email: noemail@neicon.ru
Россия

E. L. Chaporgina

Irkutsk Research Institute for Plague Control

Email: noemail@neicon.ru
Россия

E. Yu. Markov

Irkutsk Research Institute for Plague Control

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Yu. O. Popova

Irkutsk Research Institute for Plague Control

Email: noemail@neicon.ru
Россия

T. M. Dolgova

Irkutsk Research Institute for Plague Control

Email: noemail@neicon.ru
Россия

O. V. Gavrilova

Irkutsk Research Institute for Plague Control

Email: noemail@neicon.ru
Россия

T. S. Taikova

Irkutsk Research Institute for Plague Control

Email: noemail@neicon.ru
Россия

S. V. Balakhonov

Irkutsk Research Institute for Plague Control

Email: noemail@neicon.ru
Россия

References

  1. Загоскина Т.Ю., Балахонов С.В., Марков Е.Ю., Николаев В,Б., Субычева Е.Н., Чапоргина Е.А., Михайлов Е.П., Бодрых О.Б., Попова Ю.О. Апробация диагностических тест-систем с использованием наночастиц серебра в качестве маркеров специфических антител для скрининга исследуемого материала на наличие антигенов возбудителей чумы, бруцеллеза, туляремии и ботулотоксина в дот-иммуноанализе. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2014, 4: 61-64.
  2. Загоскина Т.Ю., Голубинский Е.П., Меринов С.ГГ, Полтавченко А.Г., Марков Е.Ю. Современные подходы к конструированию диагностических тест-систем с использованием неорганических корпускулярных меток. Бюлл. ВСНЦ СО РАМН. 2004, 1 (2): 176-180.
  3. Загоскина Т.Ю., Калиновский А.И., Марков Е.Ю., Докорина А.А., Голубинский Е.П. Использование специфических антител, меченных частицами коллоидного серебра, для выявления антигенов бруцелл методом дот-иммуноанализа. Клин. лаб. диагностика. 2002, 6; 38-39.
  4. Загоскина Т.Ю., Чеснокова М.В., Климов В.Т., ПоповаЮ.О., Марков Е.Ю., Старикова О.А. Конструирование тест-системы с наночастицами коллоидного серебра для обнаружения возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза в дот-иммуноанализе. Журн. микробиол. 2017, 1: 55-61.
  5. Картужанский АЛ., Красный-Адмони Л.В. Химия и физика фотографического процесса. Л., Химия, 1987.
  6. Носкова О.А., Загоскина Т.Ю., Субычева Е.Н., Марков Е.Ю., Попова Ю.О., Гриднева Л.Г, Михайлов Е.П. Применение дот-иммуноанализа для выявления антигенов чумного микроба в полевом материале. Проблемы особо опасных инфекций. 2014, 3: 69-71,
  7. McKinney М.М., Parkinson A. A simple, non-chromatographic procedure to purify immunoglobulins from serum and ascites fluid. J. Immunol. Meth. 1987, 96 (2): 271-278.
  8. Panfilova E., Shirokov A., KhlebtsovB. etal. Multiplexed dot immunoassay using Ag nanocubes, Au/Ag alloy nanoparticles, and Au/Ag nanocages. Nano Research. 2012, 5 (2): 124-134.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML

Copyright (c) 2017 Zagoskina T.Y., Chaporgina E.L., Markov E.Y., Popova Y.O., Dolgova T.M., Gavrilova O.V., Taikova T.S., Balakhonov S.V.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies