STUDY OF PROTECTIVE PROPERTIES OF RECOMBINANT ATOXIC FORM OF EXOTOXIN A AND RECOMBINANT OUTER MEMBRANE PROTEIN F OF PSEUDOMONAS AERUGINOSA


Cite item

Full Text

Abstract

Aim. To obtain recombinant atoxic form of Pseudomonas aeruginosa exotoxin A and assess its protective properties during simultaneous administration with recombinant protein F in experiment. Materials and methods. Genetic methods were employed for construction of deletion variant of P.aeruginosa exotoxin A gene, whereas Escherichia coli cells were used for transformation. Purification of proteins was performed by common method. White outbred mice were used for immunization and experimental infection was produced by intraperitoneal administration of live virulent culture of P.aeruginosa strain PA103. Results. The gene coding defect form of P.aeruginosa exotoxin A with lacked 106 C-terminal aminoacid residues was cloned. Synthesized protein was nontoxic and immunogenic. Recombinant variants of anatoxin A and outer membrane protein F of P.aeruginosa protected animals from experimental infection caused by toxigenic strain PA103 of P.aeruginosa if were administered separately or concomitantly. Nonetheless, the highest protective effect was observed after immunization with both proteins. Conclusion. Studied recombinant toxoid and OprF could be the candidates for inclusion in vaccines for prevention of pseudomonas infection.

Full Text

ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ РЕКОМБИНАНТНОЙ АТОКСИЧНОЙ ФОРМЫ ЭКЗОТОКСИНА АИ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ PSEUDOMONAS AERUGINOSA
×

About the authors

N. A Mikhaylova

Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia

Yu. V Vertiev

Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia

A. A Kaloshin

Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia

M. A Isakov

Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia

References

  1. Беляков В.Д., Ряпис Л.А., Илюхин В.И. Псевдомонады и псевдомонозы. М., Медицина, 1990.
  2. Злыгостев С.А., Гатауллин А.Г., Калошин А.А. и др. Исследование защитных свойств рекомбинантного белка F наружной мембраны (OprF) Pseudomonas aeruginosa. Журн. микробиол. экспер. иммунол. 2006, 7: 43-47.
  3. Исаков М.А., Калошин А.А., Михайлова Н.А. Получение рекомбинантного экзотоксина А Pseudomonas aeruginosa. Биотехнология. 2009, 3: 29-33.
  4. Калошин А.А., Злыгостев С.А., Торопчина Ю.Н. и др. Получение рекомбинантного белка F наружной мембраны (OprF) Pseudomonas aeruginosa и изучение его антигенных свойств. Журн. микробиол. 2005, 5: 50-53.
  5. Макаренко Т.А., Станиславский Е.С. Иммунологическое изучение белков клеточной стенки Pseudomonas aeruginosa. Там же. 1996, 2: 7-9.
  6. Михайлова Н.А., Шаймухаметов Ф.А., Кузнецова Т.Н., Мороз А.Ф. Пат. 1481962 С СССР А61К35/74. Способ обезвреживания очищенного экзотоксина А синегнойной палочки.
  7. Остерман Л.Д. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. М., 1981.
  8. Руднов В.А. Антибиотикотерапия госпитальных инфекций, вызванных P.aeruginosa. Рус. мед. журн. 2005, 13 (7): 485-490.
  9. Страчунский Л.С., Решедько Г.К., Стецюк О.У. и др. Сравнительная активность антисинегнойных антибиотиков в отношении нозокомиальных штаммов Pseudomonas aeruginosa, выделенных в отделениях реанимации и интенсивной терапии России. Клинич. микробиол. антимикроб. химиотер. 2003, 5: 35-46.
  10. Allured V.S., Collier R.J., Carroll S.F., McKay D.B. Structure of exotoxin A of Pseudomonas aeruginosa at 3 A angstrom resolution. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986, 83: 1320-1324.
  11. Liu P. V. The roles of various fractions of Pseudomonas aeruginosa in its pathogenesis. III. Identity of the lethal toxins produced in vitro and in vivo. J. Infect. Dis. 1966, 116: 481-489.
  12. Liu P. V. Exotoxins of Pseudomonas aeruginosa. I. Factors that influence the production of exotoxin A. Ibid. 1986, 128: 506-513.
  13. Mutharia L.M., Nicas T.I., Hancock R.E.W. Outer membrane proteins of Pseudomonas aeruginosa serotype strains. Ibid. 1982, 146: 770-779.
  14. Rawling E.G., Martin N.L., Hancock R.E. Epitope mapping of the pseudomonas aeruginosa major outer membrane porin protein OprF. Infect Immun. 1995, 63 (1): 38-42.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2010 Mikhaylova N.A., Vertiev Y.V., Kaloshin A.A., Isakov M.A.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies