ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ РЕКОМБИНАНТНОЙ АТОКСИЧНОЙ ФОРМЫ ЭКЗОТОКСИНА АИ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ PSEUDOMONAS AERUGINOSA


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Получение рекомбинантной атоксичной формы экзотоксина A Pseudomonas aeruginosa и оценка его протективных свойств при совместном введении с рекомбинантным белком F в эксперименте. Материалы и методы. Использовали генетические методы для получения делеционного варианта гена экзотоксина А P. aeruginosa, для трансформации — клетки Escherichia coli. Очистку белков осуществляли общепринятым методом. Для иммунизации использовали белых беспородных мышей, воспроизведение экспериментальной инфекции осуществляли при внутрибрюшинном введении живой вирулентной культуры синегнойной палочки штамма РА103. Результаты . Клонирован ген, кодирующий дефектную форму экзотоксина А P.aeruginosa, у которой отсутствовали 106 С-концевых аминокислотных остатков. Синтезированный рекомбинантный белок оказался нетоксичным и иммуногенным. Рекомбинантные варианты анатоксина А и белка F наружной мембраны P.aeruginosa совместно и в отдельности защищали животных от экспериментальной инфекции, вызываемой токсигенным штаммом PA103 синегнойной палочки. При этом наилучший протективный эффект наблюдался при совместной иммунизации обоими белками. Заключение. Исследуемые рекомбинантные анатоксин и OprF могут быть кандидатами для включения в состав вакцины для профилактики синегнойной инфекции.

Полный текст

ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ РЕКОМБИНАНТНОЙ АТОКСИЧНОЙ ФОРМЫ ЭКЗОТОКСИНА АИ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ PSEUDOMONAS AERUGINOSA
×

Об авторах

Н. А Михайлова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Ю. В Вертиев

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

А. А Калошин

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

М. А Исаков

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Список литературы

  1. Беляков В.Д., Ряпис Л.А., Илюхин В.И. Псевдомонады и псевдомонозы. М., Медицина, 1990.
  2. Злыгостев С.А., Гатауллин А.Г., Калошин А.А. и др. Исследование защитных свойств рекомбинантного белка F наружной мембраны (OprF) Pseudomonas aeruginosa. Журн. микробиол. экспер. иммунол. 2006, 7: 43-47.
  3. Исаков М.А., Калошин А.А., Михайлова Н.А. Получение рекомбинантного экзотоксина А Pseudomonas aeruginosa. Биотехнология. 2009, 3: 29-33.
  4. Калошин А.А., Злыгостев С.А., Торопчина Ю.Н. и др. Получение рекомбинантного белка F наружной мембраны (OprF) Pseudomonas aeruginosa и изучение его антигенных свойств. Журн. микробиол. 2005, 5: 50-53.
  5. Макаренко Т.А., Станиславский Е.С. Иммунологическое изучение белков клеточной стенки Pseudomonas aeruginosa. Там же. 1996, 2: 7-9.
  6. Михайлова Н.А., Шаймухаметов Ф.А., Кузнецова Т.Н., Мороз А.Ф. Пат. 1481962 С СССР А61К35/74. Способ обезвреживания очищенного экзотоксина А синегнойной палочки.
  7. Остерман Л.Д. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. М., 1981.
  8. Руднов В.А. Антибиотикотерапия госпитальных инфекций, вызванных P.aeruginosa. Рус. мед. журн. 2005, 13 (7): 485-490.
  9. Страчунский Л.С., Решедько Г.К., Стецюк О.У. и др. Сравнительная активность антисинегнойных антибиотиков в отношении нозокомиальных штаммов Pseudomonas aeruginosa, выделенных в отделениях реанимации и интенсивной терапии России. Клинич. микробиол. антимикроб. химиотер. 2003, 5: 35-46.
  10. Allured V.S., Collier R.J., Carroll S.F., McKay D.B. Structure of exotoxin A of Pseudomonas aeruginosa at 3 A angstrom resolution. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986, 83: 1320-1324.
  11. Liu P. V. The roles of various fractions of Pseudomonas aeruginosa in its pathogenesis. III. Identity of the lethal toxins produced in vitro and in vivo. J. Infect. Dis. 1966, 116: 481-489.
  12. Liu P. V. Exotoxins of Pseudomonas aeruginosa. I. Factors that influence the production of exotoxin A. Ibid. 1986, 128: 506-513.
  13. Mutharia L.M., Nicas T.I., Hancock R.E.W. Outer membrane proteins of Pseudomonas aeruginosa serotype strains. Ibid. 1982, 146: 770-779.
  14. Rawling E.G., Martin N.L., Hancock R.E. Epitope mapping of the pseudomonas aeruginosa major outer membrane porin protein OprF. Infect Immun. 1995, 63 (1): 38-42.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Михайлова Н.А., Вертиев Ю.В., Калошин А.А., Исаков М.А., 2010

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах