Том 90, № 2 (2013)

Цель. Селекция высокомукоидного морфотипа Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (Streptococcus zooepidemicus) и исследование его морфологических, физиологических, биохимических и технологических характеристик в части обеспечения повышенной секреции им гиалуроновой кислоты (ГК). Материалы и методы. Глубинное культивирование осуществляли в стеклянных колбах без отбойников на 100 мл или в лабораторных биореакторах на 1,5 или 10 л. Для культивирования применяли среды LB, MRS. Мутагенез осуществляли УФ облучением с последующей селекцией мукоидного морфотипа. ГК определяли карбазольным методом или после исчерпывающего кислотного гидролиза по реакции N-ацетилглюкозамина с реактивом Моргана-Элсона. Общую гиалуронидазную активность оценивали вискозиметрически. Определение размеров клеток и капсул, способности сбраживания углеводов и другие микробиологические, физиологические и биохимические тесты выполняли по стандартным методикам. Результаты. Выявлена нестабильность капсульного фенотипа штамма S. zooepidemicus B-8014, которая объясняется, по всей видимости, образованием при определенных условиях бактериальной гиалуронидазы. Это подтверждается и снижением концентрации ГК в культуральной жидкости на пред- и стационарной фазах роста. Мутагенезом с последующей селекцией получен мукоидный штамм S. zooepidemicus КБ-04, характеризующийся увеличенными капсулами. Штамм исследован на предмет образования ГК. Оптимизация состава питательной среды, физико-химических условий и режимов культивирования позволили существенно повысить выход ГК. Заключение. Проведены исследования морфологических, физиологических, биохимических и технологических характеристик полученного мутагенезом с последующей селекцией высокомукоидного штамма S. zooepidemicus КБ-04, оптимизированы условия его культивирования и состав питательной среды по источнику углерода и содержанию ионов двухвалентных металлов.

Цель. Изучить влияние низкотемпературной («холодной») электролитной плазмы (ХЭП) на выживаемость некоторых видов микоплазм, растущих на агаре, а также микоплазм, наиболее часто контаминирующих перевиваемые линии клеток человека нормального и злокачественного происхождения с целью деконтаминации. Материалы и методы. Mycoplasma hominis, Mycoplasma arginini и Aholeplasma laidlawii, выращенные на агаре, и микоплазмы, контаминировавшие перевиваемые линии клеток человека нормального (МТ4) и злокачественного (HeLa) происхождения. Источник плазмы - аппарат «Плазмотом», генерирующий ХЭП при нормальном атмосферном давлении и температуре окружающей среды. Облучение плазмой проводили с соблюдением одинаковых режимов для всех вариантов биологического субстрата. Продолжительность воздействия выбирали произвольно от 15 до 300 сек. Результаты. Показано выраженное бактерицидное действие высоких доз ХЭП на все испытанные варианты микоплазм, облученные сразу после посева на агар. Однако после пассажа зарегистрировано остаточное число выживших колоний. Пассаж колоний, облученных в выросшем состоянии даже высокими дозами ХЭП, также показал выживание остаточного числа бактерий у всех испытанных видов микоплазм. Облучение M.hominis сразу после посева малыми дозами ХЭП приводило к формированию необычных «мини-колоний», идентичных выделенным от людей, инфицированных этой же микоплазмой. При микробиологическом высеве в агар культуральной жидкости от двух спонтанно контами-нированных штаммов перевиваемых клеток человека и облученных ХЭП роста микоплазм не обнаружено. Заключение. ХЭП обладает выраженными бактерицидными свойствами на разные виды микоплазм как растущие на агаре, так и контаминирующие эукариотические клетки. Однако даже при высоких дозах облучения ХЭП незначительная часть бактериальных клеток, растущих на агаре, все же выживает. Это может указывать на высокую степень гетерогенности и адаптации микоплазм, подвергавшихся даже такому жесткому воздействию, как холодная плазма с плазмахимическим механизмом разрушения биологического субстрата.

Приведены данные о заболеваемости хроническими вирусными гепатитами, в том числе с цирротической стадией болезни, и показатели смертности в С.-Петербурге. Показана необходимость выделения в МКБ-10 и статистической отчетности диагноза хронический вирусный гепатит с исходом в цирроз (цирротическая стадия). При использовании диагноза цирроз печени вирусной этиологии заболевание регистрируется в структуре болезней печени, что не позволяет иметь сведения о неблагоприятных исходах хронического вирусного гепатита и для полноценного учета заболеваемости.

Цель. Изучение состояния коллективного иммунитета к полиомиелиту в 7 регионах России за последние 3 года. Материалы и методы. Исследовано на антитела к вирусу полиомиелита 2579 сывороток. Антитела (АТ) к 3 типам вируса определяли в реакции нейтрализации в культуре клеток RD. Состояние коллективного иммунитета у обследуваемых оценивали по проценту лиц с АТ к типу полиовируса и средней геометрической титра АТ. О циркуляции диких полиовирусов судили по наличию штаммоспецифических АТ к диким и вакцинным вирусам у обследованных детей (исследовано 311 сывороток). Результаты. Показатели коллективного иммунитета к полиомиелиту как в отдельных обследованных регионах, так и в отдельных возрастных группах, как правило, высокие. Полученные результаты позволяют сделать вывод, что качество вакцинопрофилактики в обследованных областях хорошее. Занос дикого полиовируса 1 типа из Таджикистана в 2010 году вызвал заболевание у 7 постоянных жителей России, в то время как в Таджикистане возникла эпидемия, поразившая более 700 человек. Заключение. Проведенные исследования подтвердили необходимость продолжать в стране качественную вакцинопрофилактику полиомиелита, несмотря на отсутствие циркуляции диких полиовирусов, которые могут быть занесены в любое время.

Цель. Изучение возможности длительного сохранения в макроорганизме антигенов, ДНК клеток микоплазм и живых клеток патогена в составе ЦИК на фоне персистирующих антигенных биоструктур. Материалы и методы. Для определения антигенов и ДНК использовали реакции агрегат-гемагглютинации, прямой иммунофлюоресценции и метод ПЦР. Циркулирующие иммунные комплексы из проб сыворотки крови выделяли по M.Digeon et al., выделение микоплазм из ЦИК осуществляли на среде SP-4, видовую идентичность выделенных мини-колоний подтверждали методом ПЦР в реальном времени. Результаты. У больных с урогенитальной и респираторной патологией частота обнаружения антигенов Мycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma pneumoniae в свободном состоянии составила 63,3; 53,1 и 80,82% случаев соответственно. Специфические ЦИК у больных с верифицированным респираторным микоплазмозом через месяц от начала заболевания регистрировали у больных с тяжелым течением заболевания, при бронхитах и при заболеваниях верхних дыхательных путей - в 92,5; 74,7 и 25,7 % случаев соответственно. У детей, больных бронхиальной астмой, частота обнаружения антигенов и ДНК клеток M.pneumoniae в свободном состоянии составила 72,6 и 12,33%, в составе ЦИК - в 60,27 и в 43,8 случаев соответственно. Антигены и ДНК М.hominis в крови в этой группе больных были выявлены в 32,9 и 26,02% , в составе ЦИК - в 53,42 и 52,05% случаев соответственно. При повторном обследовании 12 детей после проведения этиотропного лечения (в основном, через 1,5-6 месяцев) в 75% случаев были обнаружены как антигены M. pneumoniae , так и антигены М. hominis в свободном состоянии и в составе ЦИК. ДНК клеток этих видов микоплазм выявили в 20 и 33% , в составе ЦИК-в 41,6 и 50% случаев соответственно. У 5 больных через 6 месяцев (в одном случае через 1 год) ДНК и антигены микоплазм были идентифицированы в ЦИК или в сыворотке крови. При культивировании компонентов ЦИК, преципитированных из 5 образцов крови этой группы больных, содержащих ДНК М. hominis, в 4 случаях выделили культуру мини-колоний М. hominis. Заключение. Показана возможность длительной персистенции антигенов, ДНК и целых клеток микоплазм как в свободном состоянии, так и в составе ЦИК у больных с респираторной и урогенитальной патологией. Таким образом, ЦИК являются своеобразным депо, местом сохранения не только различных клеточных компонентов микоплазм, но и живых клеток.

Цель. Изучение штаммов Н. pylori, циркулирующих в Санкт-Петербурге, среди пациентов с различной патологией желудочно-кишечного тракта, а также изучение частоты инфекцирования Н. pylori по данным серологических маркеров среди данной группы больных. Материалы и методы. С помощью серологического метода были обследованы 162 человека с различными хроническими заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки. Исследовано наличие в сыворотке крови IgG к бактериальному антигену H.pylori и IgG к его токсину-CagA. Бактериологически обследованы 129 пациентов, исследованию подлежали биоптаты слизистой оболочки желудка. Для изучения штаммов H. pylori (49) и биоптатов (36) слизистой оболочки желудка применяли ПЦР в формате реального времени. Результаты. Проведенный анализ показал, что на территории Санкт-Петербурга преобладают штаммы H. pylori, имеющие ген cagA (81,63% выделенных штаммов). При генотипировании штаммов по vacA установлено, что чаще встречался генотип s1m1 (в 57,14% случаев). Доля CagA-позитивных штаммов у больных в Санкт-Петербурге максимальна при раке желудка (90,8%), тогда как при язвенной болезни и гастритах она равна 64,7 и 72,2%, соответственно. У пациентов, имеющих патологию желудка и двенадцатиперстной кишки, показатели серопозитивности по H. pylori достоверно выше, чем у лиц без клинических проявлений инфекции H. pylori (86,72% против 65,09%) (p<0,05). Заключение. Полученные данные о возрастании доли CagA-позитивных штаммов среди циркулирующих в С.-Петербурге H. pylori определяют важность проведения эради-кации H. pylori.

Проблема взаимосвязи кишечных инфекций, воспалительных заболеваний кишечника и аутоиммунных болезней в данной статье рассматривается с позиций их пусковых и эффекторных механизмов. Среди пусковых механизмов особое внимание уделяется механизмам, с помощью которых наличие патогенного микробного возбудителя в организме трансформируется в аутоиммунный процесс. Основной акцент делается на явлении антигенной мимикрии, носительстве патогенными агентами суперантигенов, роли клеточного апоптоза. Аутоиммунные заболевания рассматриваются также как генетически обусловленный феномен с указанием основных генов, полиморфизм которых причастен к развитию данной патологии. Среди эффекторных реакций, сопутствующих развитию аутоиммунного процесса на фоне кишечных инфекций, более детально анализируется роль В1лимфоцитов, Th17 и Th1. Особое внимание уделяется патогенетической и про-тективной роли естественных киллеров, которая признается относительно малоизученной.

Кратко обобщены новые открытия и концепции в области вирусологии, в частности, относительно виросферы и гирусов - группы крупных ядерноцитоплазматических дезоксирибовирусов. В контексте новых представлений интерпретируются важнейшие таксономические признаки и патогенность вирусов, в том числе африканской чумы свиней