Отправить статью по E-mail ИММУНОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РЕКОМБИНАНТНОГО ХИМЕРНОГО ПОЛИПЕПТИДА OspCgar+afz ИЗОЛЯТОВ BORRELIA GARINII И B.AFZELII
- Авторы: Караваев В.С.1, Олейникова Е.С.1,2, Азаев М.Ш.2, Беклемишев А.Б.1
-
Учреждения:
- НИИ биохимии
- ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор»
- Выпуск: Том 93, № 3 (2016)
- Страницы: 37-44
- Раздел: ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Дата подачи: 10.04.2019
- Дата публикации: 28.06.2016
- URL: https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/47
- DOI: https://doi.org/10.36233/0372-9311-2016-3-37-44
- ID: 47
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Цель. Сравнительное исследование антигенных свойств рекомбинантных белков OspCgar и OspCafz и рекомбинантного химерного полипептида OspCgar+afz содержащего аминокислотные последовательности зрелых иммунодоминантных белков OspC западносибирских изолятов Borrelia garinii (OspCgar) и B.afzelii (OspCafZ), и оценка возможности их использования в качестве антигенов при создании тест-систем для серодиагностики Лайм-боррелиоза (ЛБ) на территории Западной Сибири. Материалы и методы. Рекомбинантный химерный полипептид OspCgar+afz и рекомбинантные зрелые белки OspCgar и OspCafz, полученные экспрессией соответствующих генов в клетках Escherichia coli, очищали аффинной хроматографией на колонке с Ni-NTA сефарозой CL-6B и исследовали методом ИФА на способность связывать антитела сывороток больных ЛБ. Результаты. Показано различие в чувствительности определения методом ИФА специфических к боррелиям IgM и IgG в сыворотке крови больных ЛБ с локализованной стадией заболевания при использовании в качестве антигенов OspСgar, OspCafZ и химера OspCgar+afZ. Установлено, что химерный антиген OspCgar+afz проявлял более высокую антигенную активность, чем в отдельности каждый из антигенов OspCgar или OspCafz. Заключение. Результаты исследования позволяют рассматривать рекомбинантный химерный полипептид OspCgar+afZ как возможный компонент при создании тест-систем для серодиагностики ЛБ на территории Западной Сибири.
Ключевые слова
Об авторах
В. С. Караваев
НИИ биохимии
Автор, ответственный за переписку.
Email: noemail@neicon.ru
Россия
Е. С. Олейникова
НИИ биохимии; ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор»
Email: noemail@neicon.ru
Россия
М. Ш. Азаев
ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор»
Email: noemail@neicon.ru
Россия
А. Б. Беклемишев
НИИ биохимии
Email: noemail@neicon.ru
Россия
Список литературы
- Беклемишев А.Б., Рябченко А.В., Караваев В.С. Патент 2514230 РФ. Рекомбинантные химерные полипептиды, несущие эпитопы различных иммунодоминантных белков спирохет комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato, и способ диагностики иксодового клещевого боррелиоза, опубликован 03.03.2014.
- Караваев В.С., Рябченко А.В., Беклемишев А.Б. Иммунохимический анализ рекомбинантных белков OspC западносибирских изолятов Borrelia garinii и Borrelia afzelii. Журн. микробиол. 2010, 1: 20-23.
- Караваев В.С., Генина Е.С, Рябченко А.В., Беклемишев А.Б. Значимость рекомбинантных белков западносибирских изолятов Borrelia burgdorferi s.l. для серодиагностики иксодового клещевого боррелиоза. Клинич. лаб. диагн. 2014, 6: 44-48.
- Коренберг Э.И., Горелова Н.Б., Ковалевский Ю.В. Основные черты природной очаговости иксодовых клещевых боррелиозов в России. Паразитология. 2002, 36 (3): 177-187.
- Рябченко А.В., Ивлева И.Н., Беклемишев А.Б. Комплексная оценка зараженности клещей Ixodes persulcatus, распространённых в рекреационной зоне новосибирского научного центра, спирохетами Borrelia burgdorferi s.l. Журн. инфекц. патол. 2004. 1 (3-4): 107-110.
- Рябченко А.В., Караваев В.С., Беклемишев А.Б. Сравнительный структурный и имм> нохимический анализ рекомбинантных антигенов OspC новосибирских изолятов спирохет Borrelia garinii и В. afzelii. Бюлл. Сибирского отделения РАМН. 2010. 2: 6-' 2
- Фоменко Н.В., Мельникова О.В., Черноусова Н.Я., Епихина Т.И. Выявление акт:.'-! к боррелиям комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato. Бюлл. сибирской ve:. 2008, Прил. 1: 78-84.
- Aguero-Rosenfeld М.Е., Wang G., Schwartz I., Wormser G.P. Diagnosis of lyme bo~:Ьоаь. Clin. Microbiol. Rev. 2005, 18 (3): 484-509.
- Baranova E., Solov Ev P., Panfertsev E., Baranova A., Feduykina G., Kolombet L., Morshed M.G., Biketov S. Rational design of antigens to improve the serodiagnosis of tick-borne bor-reliosis in central regions of Russia. Adv. Exp. Med. Biol. 2014, 807: 9-21.
- Ivanova L., Christova I., Neves V. et al. Comprehensive seroprofiling of sixteen B. burgdorferi OspC: implications for Lyme disease diagnostics design. Clin. Immunol. 2009, 132 (3): 393-400.
- Magnarelli L.A., Ijdo J.W., Padula S.J. et al. Serologic diagnosis of Lyme borreliosis by using enzyme-linked immunosorbent assays with recombinant antigens. J. Clin. Microbiol. 2000, 38 (5): 1735-1739.
- Makhani N., Morris.S.K., PageA.V.etal. Atwiston Lyme: the challenge о diagnosing European Lyme neuroborreliosis. J. Clin. Microbiol. 2011, 49: 455-457.
- Mathiesen M.J., Hansen K., Axelsen N. et al. Analysis of the human antibody response to outer surface protein C (OspC) of Borrelia burgdorferi sensu stricto, B. garinii, and B. afzelii. Med. Microbiol. Immunol. 1996, 85 (3): 121-129.
- Mavin S., Evans R., Milner R.M. et al. Local Borrelia burgdorferi sensu stricto and Borrelia afzelii strains in a single mixed antigen improves western blot sensitivity. J. Clin. Pathol. 2009, 62: 552-554.
- Stanek G., Reiter M. The expanding Lyme Borrelia complex-clinical significance of genomic species. Clin. Microbiol. Infect. 2011, 17 (4): 487-493.
- Wang I.N., Dykhuezen D.E., Qiu W. et al. Genetic diversity of OspC in local population of Borrelia burgdorferi sensu stricto. Genetics. 1999, 151 (1): 15-30.
- Wilske B., Jauris-Heipke S., Lobentanzer R. et al. Phenotypic analysis of outer surface protein C (OspC) of Borrelia burgdorferi sensu lato by monoclonal antibodies: relationship to genospe-ciesand OspA serotype. J. Clin. Microbiol. 1995, 33 (1): 103-109.
- Wilske B.V., Fingerle U., Schulte-Spechtel U. Microbiological and serological diagnosis of Lyme borreliosis. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2007, 49 (1): 13-21.
Дополнительные файлы
