ВЛИЯНИЕ ШТАММА-ПРОДУЦЕНТА И СРЕДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ НА ПЕРЕКРЕСТНУЮ АНТИГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ ВОДОРАСТВОРИМЫХ АНТИГЕНОВ STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель . Получение водорастворимых белоксодержащих антигенов из разных штаммов S.pneumoniae при культивировании на полноценной и полусинтетической питательных средах, а также выбор штаммов с перекрестной антигенной активностью. Материалы и методы . Для получения водорастворимых антигенов штаммы S.pneunoniae серотипов 3, 6А, 6В, 14, 10А, 18А, 19А, 19F, 23F культивировали на сердечно-мозговом бульоне и полусинтетической среде с добавлением аминопетида в течение 24 ч при 37°C. Антигены получали методом 3-кратной водной экстракции из высушенных ацетоном микробных клеток. Исследовали химический состав препаратов, электрофоретическую подвижность белоксодержащих компонентов препаратов и перекрестную антигенную активность в реакции иммунодиффузии в геле при использовании гипериммунных кроличьих сывороток. Результаты . При исследовании 10 штаммов пневмококка различных серотипов выбран метод инактивации микробных клеток ацетоном, позволяющий получить препараты с высоким содержанием белка (25,5—53,1)%. Электрофоретическое разделение препаратов выявило различия в препаратах, полученных из разных штаммов пневмококка, в расположении мажорных белковых полос в диапазоне от 8 до 95 кДа. Выбран наиболее вирулентый и иммуногенный штамм S.pneumoniae, который при культивировании на полусинтетической среде характеризовался внутривидовой перекрестной антигенной активностью и реагировал в реакции иммунодиффузии в геле со всеми исследованными сыворотками к штаммам серотипов 3, 14, 18С, 23F. Заключение . В результате исследования выбран технологически простой метод получения антигенов пневмококка с высоким содержанием белка и показано, что только один из исследованных препаратов, полученный из вирулентного штамма со слабо выраженной капсулой S.pneumoniae при культивировании на полусинтетической среде, обладает наибольшей перекрестной антигенной активностью.

Полный текст

ВЛИЯНИЕ ШТАММА-ПРОДУЦЕНТА И СРЕДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ НА ПЕРЕКРЕСТНУЮ АНТИГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ ВОДОРАСТВОРИМЫХ АНТИГЕНОВ STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE
×

Об авторах

Е. А Курбатова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Д. С Воробьев

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Н. Б Егорова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

С. И Елкина

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Н. Г Калина

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

М. М Токарская

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

А. П Батуро

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Э. Е Романенко

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

М. Е Маркова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Н. В Грищенко

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Н. Н Овечко

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Ю. В Волох

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

С. А Злыгостев

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Н. А Михайлова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Список литературы

  1. Ванеева Н.П., Воробьев Д.С., Грищенко Н.В. и др. Изучение перекрестной активности антигенных препаратов Streptococcus pneumoniae. Журн. микробиол. 2012, 5: 36-42.
  2. Егорова Н.Б., Курбатова Е.А., Мирошниченко И.В. и др. Получение антигенных комплексов K.pneumoniae щадящими методами и изучение их протективной активности Журн. мкробиол. 1983, 2: 96-100.
  3. Козлов Р.С., Чагарян А.Н., Козлова Л.В., Муравьев А.А. Серологическая характеристика и чувствительность к антибиотикам пневмококков, выделенных у детей в возрасте до 5 лет в отдельных регионах Российской Федерации. Клин. микробиол. антимикроб. химиотер. 2011, 13(2): 177-187.
  4. Миронов. К.О., Платонов А.Е., Козлов Р.С. Идентификация и серотипирование российских штаммов Streptococcus pneumoniae с применением методик, основанных на ПЦР. Клин. микробиол. антимикроб. химиотер. 2011, 13 (4): 304-313.
  5. Русанов В.М., Левин И. Лечебные препараты крови. М., Медпрактика, 2004.
  6. Briles D.E., King J.D., Gray M.A. et al. PspA, a protection-eliciting pneumococcal protein: immunogenicity of isolated native PspA in mice. Vaccine. 1996, 14 (9): 858-867.
  7. Darrieux M., Miyaji E.N., Ferreira D.M. et al. Fusion proteins containing family 1 and family 2 PspA fragments elicit protection against Streptococcus pneumoniae that correlates with antibody-mediated enhancement of complement deposition. Infect. Immun. 2007, 75 (12): 5930-5938.
  8. Devineni D., Paulos S., Ubale R. et al. Approaches and issues towards development of efficient mucosal vaccines against pneumonia. Clin. Res. Regul. Affairs. 2009, 26 (3): 39-49.
  9. Dubois K., Gillers K.A., Hamilton J.K. et al. Colometric method for the determination of sugars. Annal. Chem. 1956, 28: 350-354.
  10. Ferreira D.M., Darrieux M., Silva D.A. et al. Characterization of protective mucosal and systemic immune responses elicited by pneumococcal surface protein A PspA and PspC nasal vaccines against a respiratory pneumococcal challenge in mice. Clin. Vac. Immunol. 2009, 16 (5): 636-645.
  11. Jansen A.G., Rodenburg G.D., van der Ende A. et al. Invasive pneumococcal disease among adults: associations among serotypes, disease characteristics, and outcome. Clin. Infect. Dis. 2009, 49 (2): 23-29.
  12. Jedrzejas M.J. Pneumococcal virulence factors: structure and function. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2001, 65 (2): 187-207.
  13. Lu Y-J., Forte S., Thompson C.M. et al. Protection against pneumococcal colonization and fatal pneumonia by a trivalent conjugate of a fusion protein with the cell wall polysaccharide. Infect. Immun. 2009, 77 (5): 2076-2083.
  14. Lynch J.P., Zhanel G.G. Streptococcus pneumoniae: epidemiology and risk factors, evolution of antimicrobial resistance, and impact of vaccines. Curr. Opin. Pulm. Med. 2010, 16 (3): 217-225.
  15. McDaniel L.S., Sheffield J.S., Delucchi P., Briles D.E. PspA, a surface protein of Streptococcus pneumoniae, is capable of eliciting protection against pneumococci of more than capsular type. Infect. Immun. 1991, 59: 222-228.
  16. Ogunniyi A.D., Grabowicz M., Briles D.E. et al. Development of a vaccine against invasive pneumococcal disease based on combinations of virulence proteins of Streptococcus pneumoniae. Infect. Immun. 2007, 75 (1): 350-357.
  17. Paton J.C. Novel pneumococcal surface proteins: role in virulence and vaccine potential. Trends Microbiol.1998, 6 (3): 85-88.
  18. Reinert R.R., Paradiso P., Fritzell B. Advances in pneumococcal vaccines: the 13-valent pneumococcal conjugate vaccine received market authorization in Europe. Expert Rev. Vac. 2010, 9 (3): 229-236.
  19. Roche H., Hakansson A., Hollingshead S.K., Briles D.E. Regions of PspA/EF3296 best able to elicit protection against Strepto- coccus pneumoniae in a murine infection model. Infect. Immun. 2003, 71 (3): 1033-1041.
  20. Shoma S., Verkaik N.J., de Vogel C.P. et al. Development of a multiplexed bead-based immunoassay for the simultaneous detection of antibodies to 17 pneumococcal proteins. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2011, 30: 521-526.
  21. Wong K.J., Barrera O., Sutton A. et al. Standartization and control of meningococcal vaccines group A and group C polysaccharides. J. Biol. Stand. 1977, 5: 195-215.
  22. Yother J., Briles D.E. Structural properties and evolutionary of PspA, a surface protein of Streptococcus pneumoniae, as revealed by sequence analysis. J. Bacteriology. 1992, 174 (2): 601-609.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Курбатова Е.А., Воробьев Д.С., Егорова Н.Б., Елкина С.И., Калина Н.Г., Токарская М.М., Батуро А.П., Романенко Э.Е., Маркова М.Е., Грищенко Н.В., Овечко Н.Н., Волох Ю.В., Злыгостев С.А., Михайлова Н.А., 2013

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах