Том 91, № 1 (2014)

Цель. Определение особенностей формирования пенициллинорезистентности у возбудителя туляремии среднеазиатского подвида, оценка стабильности различий у штаммов разных таксонов и разработка быстрого метода внутривидовой дифференциации F. tularensis. Материалы и методы. β-Лактамазную активность определяли у 30 штаммов бактерий рода Francisella количественным йодометрическим методом. Результаты. Все штаммы вне зависимости от подвидовой принадлежности характеризовались высокой резистентностью к β-лактамным антибиотикам, причем бактерии среднеазиатского подвида, в отличие от других франциселл, не синтезировали β-лактамазу. Наши попытки индукции β-лактамазной активности in vitro и in vivo у штаммов этого подвида не увенчались успехом. На основании отличительного признака предложен метод внутривидовой дифференциации F. tularensis с помощью дисков с нитроцефином. Заключение. Высокий уровень резистентности F. tularensis subsp. mediasiatica к β-лактамам in vitro и их неэффективность при лечении экспериментальной туляремии, обусловленной β-лактамазонегативным штаммом, предполагает, что β-лактамаза F. tularensis не является ведущим фактором в формировании природной пенициллиноустойчивости возбудителя туляремии.

Цель. Исследование иммунобиологических свойств липополисахарида (ЛПС) Bordetella pertussis в составе бесклеточной коклюшной вакцины. Материалы и методы. Использовали экспериментальные серии бесклеточной коклюшной вакцины (БКВ), лиофилизированный липополисахарид (ЛПС). Титр антител к ЛПС в сыворотках мышей оценивали с помощью ИФА с использованием пероксидазных коньюгатов антивидовых антител к IgG мышей. Активность ЛПС в препаратах комплекса антигенов B. pertussis определяли в количественном хромогенном ЛАЛ-тесте по конечной точке. Защитную активность БКВ определяли в тесте на мышах при интрацеребральном заражении вирулентной культурой В. рertussis штамм № 18323. Безопасность БКВ определяли в тесте изменения массы тела мышей. Результаты. Наличие ЛПС в составе БКВ было показано в иммуноэлектрофорезе с очищенным препаратом ЛПС В. рertussis в качестве контроля. Обработка формалином изменила иммунохимические свойства ЛПС БКВ, что привело к смещению полосы преципитации с коклюшной агглютинирующей сывороткой из стартовой зоны в катодную. В супернатантах коклюшных культур количество ЛПС составляло в среднем 49050+6774 ед. эндотоксина/мл (ЕЭ/мл). В препаратах БКВ количество ЛПС составляло в среднем 906+90 ЕЭ/ мл, т.е. снижалось более чем в 50 раз. В ИФА показано нарастание титров антител к ЛПС В. рertussis в сыворотках мышей после иммунизации БКВ, что свидетельствовало о наличии его в иммуногенной форме в составе комплексного препарата. Проведенные доклинические испытания показали протективную активность и специфическую безопасность экспериментальных серий БКВ. Заключение. Обезвреженный формалином препарат БКВ представляет собой комплекс белковых антигенов в ассоциации с ЛПС. Обработка формалином приводит к модификации молекулы ЛПС, сохраняющей антигенные свойства, но значительно менее токсичной.

Цель. Получение, изучение свойств и оценка возможности использования моноклональных антител к экзотоксину А Pseudomonas aeruginosa (ЭТА) для выявления молекул рекомбинантных экзотоксина А и анатоксина. Материалы и методы. Получены гибридомы - продуценты моноклональных антител к ЭТА. Для иммунизации мышей использован рекомбинантный экзотоксин А, его атоксичные формы, анатоксин синегнойной палочки и живая культура P. aeruginosa PA-103. Результаты. Наиболее продуктивным оказался опыт по слиянию злокачественной клеточной линии и иммунных лимфоцитов, полученных от одной мыши, иммунизированной рекомбинантным ЭТА. Оценена интенсивность взаимодействия моноклональных антител с рекомбинантными атоксичными формами ЭТА в иммуноферментном анализе. Изучена протективная (токсиннейтрализующая) активность антител на культуре клеток и способность выявлять экзотоксин А в реакции латекс-агглютинации. Антитела гибридной культуры № 21 способны выявлять молекулы рекомбинантного ЭТА и анатоксина в реакции латекс-агглютинации. Заключение. Предполагается использование полученных антител для тестирования токсигенности штаммов P. aeruginosa, а также выявления анатоксина в технологическом процессе получения профилактических препаратов на основе экзотоксина А.

Цель. Оценка противовирусного эффекта ФДТ in vitro непосредственно на вирус простого герпеса (ВПГ), а также на вирусинфицированные клетки. Материалы и методы. Использована культура клеток Vero, инфицированная вирусами простого герпеса; штаммы ВПГ-1 (штамм VR-3) и ВПГ-2 (штамм MS). В качестве фотосенсибилизатора применяли Препарат «Фотодитазин» (производное хлорина Е6). Для лазерного облучения использовали аппарат физиотерапевтический «АФС». Варианты экспериментов: изучение прямого и опосредованного фотодинамического воздействия на вируссодержащую жидкость (ВПГ-1 и ВПГ-2) и на неинфицированную культуру клеток; на разработанной схеме эксперимента проводилась оценка противогерпетического эффекта фотодинами-ческой терапии (ФДТ) и изучение действия на «потомство» вновь продуцируемого вируса ВПГ-1. Результаты. Была разработана схема проведения эксперимента для изучения опосредованного фотодинамического воздействия на ВПГ. Выявлено достоверное снижение титра вируса более чем на два порядка (в 100 - 1000 раз). Были определены оптимальные концентрация фотосенсибилизатора и доза лазерного облучения, которые приводили к снижению титра ВПГ-1 в 1000 и более раз (1,5-2,5 порядка) и снижению титра ВПГ-2 в 10 и более раз (1,5 порядка). Заключение. Полученные данные помогут подобрать адекватную схему проведения ФДТ для пациентов с рецидивирующей герпесвирусной инфекцией, в том числе и у пациенток с привычным невынашиванием беременности.

Цель. Изучение влияния антибиотикотерапии на формирование микрофлоры основных биотопов (носоглотка, толстая кишка, мочевыделительная система) организма недоношенного ребенка весом менее 1500 г при рождении в стационаре. Материалы и методы. Проведено бактериологическое исследование отделяемого верхних дыхательных путей, мочи, содержимого толстой кишки у 58 недоношенных детей при поступлении и при выписке из отделения патологии новорожденных и недоношенных детей. Для построения факторных моделей влияния антибиотиков на формирование микробиоценоза основных биотопов применяли метод факторного анализа. Результаты. У всех детей при поступлении в отделение отмечен дефицит облигатных представителей нормофлоры во всех трех биотопах. К выписке отмечено заселение всех биотопов облигатными представителями, но показатели не достигают возрастной нормы. Основным фактором является антибактериальная терапия, во всех биотопах превалируют условно патогенные и патогенные микроорганизмы. Заключение. У недоношенных детей, получающих массивную антибактериальную терапию, не происходит формирования микробиоценозов основных биотопов и отмечается носительство патогенных и условно патогенных микроорганизмов.

Рассматривается опыт стран-организаторов Олимпийских игр по обеспечению защиты от биологической угрозы. На основании анализа мер, направленных на совершенствования систем эпидемиологического надзора и противодействия биотерроризму на Олимпиаде в Лондоне (2012 г.), даются рекомендации по основным направлениям организационной, профилактической и противоэпидемической работы при проведении массовых мероприятий.

В работе обобщен современный опыт организации мониторинга атмосферного воздуха на наличие патогенных биологических агентов (ПБА). Представлены предложения по использованию постов контроля атмосферного воздуха во время проведения массовых мероприятий. Рассмотрены вопросы оснащения их приборной базой для отбора проб воздуха и детекции ПБА.

Обзор посвящен иммунологическим адъювантам - различным природным и синтетическим веществам, которые добавляют в вакцины для стимуляции cпецифического иммунного ответа, но сами по себе они специфического ответа не вызывают. Критически важным является выбор правильного адъюванта, механизмы воздействия которого на иммунную систему наиболее изучены. В обзоре проанализированы большинство из этих механизмов, а также физико-химические и биологические особенности современных адъювантов. Также рассматривается проблема безопасности адъювантов, типы иммунного ответа, индуцированного адъювантами различного происхождения, вспомогательные вещества, которые проверяются либо уже используются в современной медицине и ветеринарии.