ПОЛУЧЕНИЕ СЛИТЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ OprF-ΔOprI, ΔOprF-ΔOprl И OprF-aTox-ΔOprl PSEUDOMONAS AERUGINOSA

Цель. Получение слитых рекомбинантных белков Pseudomonas aeruginosa, обладающих защитными свойствами от экспериментальной синегнойной инфекции. Материалы и методы. В плазмидах, предназначенных для экспрессии в клетках Escherichia coli, клонированы слитые последовательности генов oprF, oprl и делеционной формы toxA Р aeruginosa. Синтезированные рекомбинантные белки очищали в колонках с никель-сефарозой. При оценке защитных свойств препараты рекомбинантных белков вводили мышам внутрибрюшинно двукратно с двухнедельным интервалом. При экспериментальном заражении живую вирулентную культуру Р. aeruginosa штамма РА103 инъецировали животным внутрибрюшинно через две недели после курса иммунизаций. Результаты. Получены три слитых рекомбинантных белка: 1. OprF-AOprI включал полноразмерную последовательность белка OprF и делеционный вариант белка Oprl (с отсутствием первых 20 аминокислотных остатков); 2. AOprF-AOprI состоял из С-концевой области (192 - 342 аминокислотные остатки) ОprF и делеционного варианта белка Oprl; 3. OprF-aTox-ΔOprl включал полноразмерную последовательность белка OprF, последовательность нетоксичного варианта экзотоксина А (без 106 С-концевых аминокислотных остатков) и делеционный вариант белка Oprl. Показано, что наилучшими защитными свойствами обладали слитые рекомбинантные белки OprF-ΔOprI и OprF-aTox-ΔOprl в иммунизирующих дозах 25 мкг и 50 мкг на животное соответственно для первого и второго белков. Заключение. Полученные результаты открывают перспективы для дальнейших исследований по созданию специфических иммунобиологических препаратов на основе слитых рекомбинантных белков синегнойной палочки.

белок F наружной мембраны (OprF), белок I наружной мембраны (Oprl), экзотоксин А, анатоксин, слитые рекомбинационные белки OprF-AOprI