ПРОЯВЛЕНИЯ ЭПИДЕМИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА И ПУТИ ПЕРЕДАЧИ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЭНТЕРОВИРУСНОГО СЕРОЗНОГО МЕНИНГИТА

Полный текст

Актуальность проблемы энтеровирусной (неполио) инфекции определяется широким распространением возбудителей, возникновением вспышечной заболеваемости, полиморфизмом клинических проявлений и отсутствием средств специфической профилактики [7]. В структуре клинических форм энтеровирусной инфекции доминирует серозный менингит (СМ). Между тем, в нашей стране диагностика СМ, как и энтеровирусной инфекции в целом, затруднена ввиду ограниченного применения специфических лабораторных методов диагностики. Поэтому истинная заболеваемость энтеровирусного СМ на многих территориях остается неизвестной. Соответственно недостаточно изучены и эпидемиологические особенности этой инфекции. Цель работы - изучить проявления эпидемического процесса и ведущие пути передачи возбудителей энтеровирусного СМ по результатам лабораторных исследований и эпидемиологического обследования эпидемических очагов. В течение 2010 - 2014 гг. проведено лабораторное обследование на энтеровирусы 743 пациентов (380 детей и 363 взрослых), госпитализированных в медицинские организации Перми с первичным диагнозом «серозный менингит», и 426 чел., общавшихся с больным СМ энтеровирусной этиологии в дошкольных общеобразовательных учреждениях - ДОУ (378 детей и 48 сотрудников). У больных исследовали спинномозговую жидкость (СМЖ), у общавшихся - фекалии. Все пробы были исследованы в ПЦР. Материал от 87 больных и 63 общавшихся, кроме того, был исследован вирусологическим методом. Исследовано 827 проб воды распределительной сети, 293 пробы воды открытых водоемов и 57 смывов с поверхности овощей и фруктов. Все пробы исследовали в ПЦР. Кроме того, 20 проб воды открытых водоемов и 4 пробы воды распределительной сети - дополнительно культуральным методом. Отбор и доставку проб внешней среды осуществляли в соответствии с методическими указаниями [1, 4]. Перед исследованием воды применяли методы концентрирования вирусов [4]. Для концентрирования вирусов в воде распределительной сети и открытых водоемов использовали метод фильтрующих мембран. Лабораторные исследования проводили на базе лаборатории особо опасных, природноочаговых и вирусных инфекций Центра гигиены и эпидемиологии в Пермском крае и лаборатории клинической иммунологии Пермской краевой клинической инфекционной больницы. Детекцию РНК энтеровирусов в ПЦР осуществляли с использованием тестсистемы «АмплиСенс Enterovirus-FL» (ЦНИИЭ Роспотребнадзора) в соответствии с инструкцией. Для вирусологических исследований использовали культуры тканей RD, HEP-2, L20B. Вирусологические исследования осуществляли в соответствии с рекомендациями ВОЗ [3]. Энтеровирусы идентифицировали в реакции нейтрализации с помощью диагностических типоспецифических иммунных сывороток (Предприятие по производству бактерийных и вирусных препаратов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова, Москва). Поскольку не все пробы от пациентов и из внешней среды одновременно были исследованы двумя методами, процент положительных реакций на культуре клеток рассчитывали от числа обследованных вирусологическим методом, процент положительных проб в ПЦР - от числа всех обследованных методом ПЦР, процент положительных проб по результатам двух методов - от числа обследованных одновременно двумя методами. При этом в последнем случае за положительный результат принимали пробы, в которых была обнаружены либо РНК энтеровирусов с помощью ПЦР, либо вирус на культуре клеток, либо и то, и другое. В период с 2010 по 2014 гг. проведено эпидемиологическое обследование 350 эпидемических очагов СМ по месту жительства заболевших, зарегистрированных на территории Перми. В очагах опрашивали заболевших о купании в открытых водоемах в течение недели до появления клинических симптомов, об употреблении некипяченой воды из различных источников, а также о наиболее значимых эпидемиологических продуктах (овощи, фрукты, ягоды и приготовленные из них блюда, молоко и молочные продукты). Параллельно о характере водопользования и питания опрашивали контрольных лиц того же возраста и социального состава из числа пациентов с диагнозом СМ, имеющих отрицательный результат лабораторного обследования на энтеровирусы. Общее количество контрольных лиц составило 175 человек. Статистическую обработку материалов проводили с помощью критерия соответствия (Х2). Различия показателей считали статистически значимыми при значении критерия >3,8. В ходе оценки факторов риска рассчитывали отношения шансов (Odds Ratio, OR) и соответствующие 95% доверительные интервалы (95% ДИ). Значение величины р<0,05 было принято за условие статистической значимости. Результаты лабораторного обследования больных СМ и общавшихся с ними лиц показали, что количество больных, у которых в СМЖ методом ПЦР была обнаружена РНК неполиомиелитных энтеровирусов, составило 362 (48,7+1,8%). Процент находок энтеровирусов на культуре клеток у больных составил 34,4+5,0. По итогам исследования СМЖ двумя методами диагноз энтеровирусного СМ был подтвержден у 54 (62,0+5,2%) пациентов. По результатам ПЦР-исследования лиц, общавшихся с больным, РНК энтеровирусов в фекалиях была выявлена у 92 (21,5+1,9%), энтеровирус по данным вирусологического исследования - у 35 (55,5+6,2%) человек, по итогам исследования двумя методами результат оказался положительным в 61,9+6,1% случаев. Результаты серологического типирования энтеровирусов, выделенных от 29 больных СМ и 35 общавшихся с больным лиц, показали, что от больных выделяются серотипы ЕСНО 4, 6, 7, 17, 25, 30, 31, Коксаки А9. При этом доминирующим оказался серотип ЕСНО 6, доля которого составила 44,8+5,9%. По результатам исследования лиц, общавшихся с больным СМ, были обнаружены серотипы ЕСНО 5, 6, 7, 11, 30, 70, Коксаки А8, А9, Коксаки В3, В4, В5. Ведущим также был серотип ЕСНО 6, доля которого оказалась равной 42,8+8,3%. По результатам обследования больных СМ вирусологическим методом инфицирован-ность детей в возрасте 1 - 7 лет (32,4+7,6%), 8 - 14 лет (39,1+7,1%) и взрослых (обследовано лишь 4 чел., инфицированных не выявлено) не различалась. В то же время, по данным ПЦР -исследования показатели инфицированности энтеровирусами детей 1 - 7 лет (64,9+3,2%) и 8 - 14 лет (65,6+3,7%) статистически не различались, но были достоверно выше, чем среди взрослых (31,4+2,4%) (%2=60,8 и 52,7, р=0,0005 в обоих случаях). Частота выделения энтеровирусов от детей, посещающих ДОУ (38,0+5,4%), школьников (40,3+6,8%) и неорганизованных дошкольников (10,0+3,1%) не имела достоверных различий. В то же время, по результатам ПЦР-исследования показатели инфицирован-ности энтеровирусами детей ДОУ (70,9+3,5%) и школьников (65,1+3,5%) статистически не различались, но были достоверно выше, чем среди неорганизованных дошкольников (40,0+8,0%) (х2 = 11,0 и 6,8, р = 0,002 и 0,009). По данным ПЦР инфицированность больных СМ в летний (50,7+2,5%) и осенний (60,5+3,0%) периоды оказалась выше, чем в зимние (16,6+6,2%) и весенние (4,9+2,7%) месяцы (в первом случае х2= 43,1 и 58,8; р=0,0005; во втором х2= 14,0 и 22,8; р=0,0008 и 0,0005). Эпидемиологическое обследование эпидемических очагов СМ выявило достоверную связь заболевших с купанием в открытых водоемах (х2=5,6, р = 0,018, OR=1,7, ДИ=1,0 - 2,6), употреблением некипяченой воды из децентрализованных источников (скважины, колодцы, ключи) (х2=4,3, р=0,03, OR=1,7, ДИ=1,0 - 2,8), употреблением свежих овощей, фруктов, ягод и приготовленных из них блюд (х2=10,1, р=0,002, OR=2,0, ДИ=1,3 - 3,3). Отсутствовала статистически значимая связь заболевших с употреблением воды распределительной сети (х2=1,6, р= ,1), бутилированной воды (х2=1,5, р=0,2), а также молока и молочных продуктов (х2=0,4, р=0,4). Эпидемиологическая роль воды и пищевых продуктов как факторов передачи возбудителей СМ была подтверждена результатами лабораторного контроля. В воде открытых водоемов РНК энтеровирусов была обнаружена в 2,3+0,8% случаев, а при вирусологическом исследовании воды открытых водоемов в зоне сброса очищенных хозфекальных сточных вод энтеровирусы были выявлены в 20,0+4,4% проб. В воде децентрализованных источников изучаемой территории, по данным проведенного нами ранее вирусологического исследования 331 пробы, в 0,9±0,5% случаев были выявлены неполиомиелитные энтеровирусы [5]. Нельзя исключить участия в качестве факторов передачи энтеровирусов и воды распределительной сети, в которой в 0,8±0,3% проб был обнаружен РНК-позитивный материал, а ранее при вирусологическом исследовании 721 пробы распределительной сети энтеровирусы были выделены в 3,3±0,6% случаев [5, 6]. По результатам исследования смывов с поверхности овощей, фруктов и ягода РНК энтеровирусов была обнаружена в 10,5±3,9% проб, в том числе с зелени - в 33,3±21,0%, с помидоров - в 15,4±3,2%, с яблок - в 14,3±9,6%. Таким образом, по результатам вирусологического и молекулярно-генетического методов исследования СМЖ больных с первичным диагнозом «серозный менингит» и фекалий лиц, общавшихся с больным энтеровирусным СМ, энтеровирус и (или) его РНК были выявлены у 62,0% больных и у 61,9% общавшихся. При этом доминировал энтеровирус серотипа ЕСHO 6. По результатам лабораторного обследования больных максимальная интенсивность эпидемического процесса энтеровирусного СМ выявлена в группе организованных детей дошкольного и школьного возраста в летне-осенний период года.

Об авторах

В. И Сергевнин

Пермский государственный медицинский университет

М. А Трясолобова

Центр гигиены и эпидемиологии в Пермском крае

Е. В Кудреватых

Центр гигиены и эпидемиологии в Пермском крае

Е. Ж Кузовникова

Центр гигиены и эпидемиологии в Пермском крае

Список литературы

Дополнительные файлы