ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ЭКЗОПОЛИСАХАРИДАУ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ ЭЛЬТОР И ЕГОИММУНОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Выделение экзополисахарида Vibrio
eltor и изучение его иммунохимических
свойств. Материалы и методы. В работе
использовали ругозные варианты штаммов
V. eltor 18895 и V. eltor 18843, полученные
нами путем селекции в среде М9. Экзополисахариды (ЭПС) выделяли методами
Kierek K. (2003), Задновой С.П. (2004),
Елинова Н.П. (1984) и анализировали на
содержание углеводов, белков, нуклеиновых кислот и примесей липополисахарида.
Сравнивали структуру ЭПС, ЛПС, R-ЛПС
с помощью хроматографии высокого давления. Нейтральные сахара и аминосахара
идентифицировали методом тонкослойной
хроматографии. Поликлональные антитела
получали к препарату ЭПС, выделенному
методом Елинова Н.П. (1984). Специфическую активность полученных мышиных сывороток проверяли методом ДИА.
Результаты. Показано, что ЭПС, выделенный по методу Елинова Н.П. (1984), не
содержал посторонних примесей. Структура
ЭПС V. eltor отличается от ЛПС и R-ЛПС.
Моносахаридный состав ЭПС из ctx+ штамма V. eltor 18895 представлен более широким
спектром углеводов, включающих глюкозу,
маннозу, рамнозу, галактоуроновую кислоту.
Использование в ДИА специфической сыворотки, полученной к ЭПС из токсигенного штамма, не выявило общих эпитопов
с капсульными полисахаридами V.cholerae
O139, V. parahaemolyticus и V. vul nificus.
Заключение. Применение в качестве иммуногена ЭПС способствовало получению
сывороток, специфичных в отношении
ЭПС и ругозных вариантов вибрионов эльтор, которые можно использовать для их
выявления и характеристики.

Об авторах

О А Татаренко

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Л П Алексеева

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Н Р Телесманич

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

О В Маркина

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

О С Чемисова

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Р В Писанов

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

В Д Кругликов

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

И С Шестиалтынова

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Н Н Ускова

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону

O A Tatarenko

L P Alekseeva

N R Telesmanich

O V Markina

O S Chemisova

R V Pisanov

V D Kruglikov

I S Shestialtynova

N N Uskova

Список литературы

  1. Елинов Н.П. Микробные экзополисахариды. Киев, Наукова думка, 1984.
  2. Заднова С. П., Исаев Н. Д., Коннов Н. П. и др. Биохимический анализ двух фенотипически различных клонов штамма Vibrio cholerae Дакка 35 О1. Пробл. особо опасных инф. Саратов, 2004, 1 (87): 42-45.
  3. Захарова И.Я., Косенко Л.В. Методы изучения микробных полисахаридов. Киев, Наукова Думка, 1982.
  4. Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). М. Наука, 1981.
  5. Спирин А.С. Определение нуклеиновых кислот. Биохимия. 1958, 23 (5): 656-662.
  6. Телесманич Н.Р. Анализ гемолизинов холерных вибрионов с помощью монослойных перевиваемых клеточных культур и моноклональных антител. Афтореф. дис. канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 1996.
  7. Galanos C., Luderitz O., Westphal O. A new method for the extraction of R lipopolysaccharides. Eur. J. Biochem. 1969, 9: 245-249.
  8. Kierek K., Watnick P.I. Environmental determinants of Vibrio cholerae biofilm development. Appl. Environ. Microbiol. 2003, 69 (9): 5079-5088.
  9. Lauriano C.M., Klose K.E., Kapfhammer D. Characterization of Vibrio cholerae O1 El Tor galU and gale mutants: influence on lipopolysaccharide structure, colonization and biofilm formation. Infect. Immun. 2001. 69 (1): 435-445.
  10. Nesper J., Kapfhammer D., Klose K. E. Characterization of Vibrio cholerae O1 antigen as bacteriophage K 139 receptor and identification of IS1004 insertions aborting O1 antigen biosynthesis. J. Bacteriol. 2000, 182: 5097-5104.
  11. Wai S.N., Mizunoe Y., Takade A. et al. V. cholerae O1 strain TSI-4 produces the exopolysaccharide materials determine colony morphology, stress resistance, and biofilm formation. Appl. Environ. Microbiol. 1998, 64 (10): 3648-3655.
  12. Westphal O., Jann K. Bacterial lipopolysaccharides. Extraction with phenol-water and further applications of the procedure. Carbohydr. Chem. 1965, 5: 83-91.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Татаренко О.А., Алексеева Л.П., Телесманич Н.Р., Маркина О.В., Чемисова О.С., Писанов Р.В., Кругликов В.Д., Шестиалтынова И.С., Ускова Н.Н., Tatarenko O.A., Alekseeva L.P., Telesmanich N.R., Markina O.V., Chemisova O.S., Pisanov R.V., Kruglikov V.D., Shestialtynova I.S., Uskova N.N., 2012

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах