ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ЭКЗОПОЛИСАХАРИДАУ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ ЭЛЬТОР И ЕГОИММУНОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
- Авторы: Татаренко ОА1, Алексеева ЛП1, Телесманич НР1, Маркина ОВ1, Чемисова ОС1, Писанов РВ1, Кругликов ВД1, Шестиалтынова ИС1, Ускова НН1, Tatarenko OA2, Alekseeva LP2, Telesmanich NR2, Markina OV2, Chemisova OS2, Pisanov RV2, Kruglikov VD2, Shestialtynova IS2, Uskova NN2
-
Учреждения:
- Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
- Выпуск: Том 89, № 2 (2012)
- Страницы: 17-23
- Раздел: Статьи
- Дата подачи: 09.06.2023
- Дата публикации: 15.06.2012
- URL: https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/13657
- ID: 13657
Цитировать
Полный текст
Аннотация
eltor и изучение его иммунохимических
свойств. Материалы и методы. В работе
использовали ругозные варианты штаммов
V. eltor 18895 и V. eltor 18843, полученные
нами путем селекции в среде М9. Экзополисахариды (ЭПС) выделяли методами
Kierek K. (2003), Задновой С.П. (2004),
Елинова Н.П. (1984) и анализировали на
содержание углеводов, белков, нуклеиновых кислот и примесей липополисахарида.
Сравнивали структуру ЭПС, ЛПС, R-ЛПС
с помощью хроматографии высокого давления. Нейтральные сахара и аминосахара
идентифицировали методом тонкослойной
хроматографии. Поликлональные антитела
получали к препарату ЭПС, выделенному
методом Елинова Н.П. (1984). Специфическую активность полученных мышиных сывороток проверяли методом ДИА.
Результаты. Показано, что ЭПС, выделенный по методу Елинова Н.П. (1984), не
содержал посторонних примесей. Структура
ЭПС V. eltor отличается от ЛПС и R-ЛПС.
Моносахаридный состав ЭПС из ctx+ штамма V. eltor 18895 представлен более широким
спектром углеводов, включающих глюкозу,
маннозу, рамнозу, галактоуроновую кислоту.
Использование в ДИА специфической сыворотки, полученной к ЭПС из токсигенного штамма, не выявило общих эпитопов
с капсульными полисахаридами V.cholerae
O139, V. parahaemolyticus и V. vul nificus.
Заключение. Применение в качестве иммуногена ЭПС способствовало получению
сывороток, специфичных в отношении
ЭПС и ругозных вариантов вибрионов эльтор, которые можно использовать для их
выявления и характеристики.
Ключевые слова
Об авторах
О А Татаренко
Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-ДонуНаучно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
Л П Алексеева
Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-ДонуНаучно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
Н Р Телесманич
Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-ДонуНаучно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
О В Маркина
Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-ДонуНаучно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
О С Чемисова
Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-ДонуНаучно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
Р В Писанов
Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-ДонуНаучно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
В Д Кругликов
Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-ДонуНаучно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
И С Шестиалтынова
Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-ДонуНаучно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
Н Н Ускова
Научно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-ДонуНаучно-исследовательский противочумныйинститут, Ростов-на-Дону
O A Tatarenko
L P Alekseeva
N R Telesmanich
O V Markina
O S Chemisova
R V Pisanov
V D Kruglikov
I S Shestialtynova
N N Uskova
Список литературы
- Елинов Н.П. Микробные экзополисахариды. Киев, Наукова думка, 1984.
- Заднова С. П., Исаев Н. Д., Коннов Н. П. и др. Биохимический анализ двух фенотипически различных клонов штамма Vibrio cholerae Дакка 35 О1. Пробл. особо опасных инф. Саратов, 2004, 1 (87): 42-45.
- Захарова И.Я., Косенко Л.В. Методы изучения микробных полисахаридов. Киев, Наукова Думка, 1982.
- Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). М. Наука, 1981.
- Спирин А.С. Определение нуклеиновых кислот. Биохимия. 1958, 23 (5): 656-662.
- Телесманич Н.Р. Анализ гемолизинов холерных вибрионов с помощью монослойных перевиваемых клеточных культур и моноклональных антител. Афтореф. дис. канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 1996.
- Galanos C., Luderitz O., Westphal O. A new method for the extraction of R lipopolysaccharides. Eur. J. Biochem. 1969, 9: 245-249.
- Kierek K., Watnick P.I. Environmental determinants of Vibrio cholerae biofilm development. Appl. Environ. Microbiol. 2003, 69 (9): 5079-5088.
- Lauriano C.M., Klose K.E., Kapfhammer D. Characterization of Vibrio cholerae O1 El Tor galU and gale mutants: influence on lipopolysaccharide structure, colonization and biofilm formation. Infect. Immun. 2001. 69 (1): 435-445.
- Nesper J., Kapfhammer D., Klose K. E. Characterization of Vibrio cholerae O1 antigen as bacteriophage K 139 receptor and identification of IS1004 insertions aborting O1 antigen biosynthesis. J. Bacteriol. 2000, 182: 5097-5104.
- Wai S.N., Mizunoe Y., Takade A. et al. V. cholerae O1 strain TSI-4 produces the exopolysaccharide materials determine colony morphology, stress resistance, and biofilm formation. Appl. Environ. Microbiol. 1998, 64 (10): 3648-3655.
- Westphal O., Jann K. Bacterial lipopolysaccharides. Extraction with phenol-water and further applications of the procedure. Carbohydr. Chem. 1965, 5: 83-91.