Отправить статью по E-mail ИДЕНТИФИКАЦИЯ ИММУНОГЕННЫХ БЕЛКОВ ШТАММОВ BACILLUS ANTHRACIS В MALDITOF MS
- Авторы: Червакова М.П.1, Шаров Т.Н.1, Баркова И.А.1, Барков А.М.1, Викторов Д.В.1, Топорков А.В.1
-
Учреждения:
- Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
- Выпуск: Том 95, № 1 (2018)
- Страницы: 52-57
- Раздел: ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Дата подачи: 10.04.2019
- Дата публикации: 28.02.2018
- URL: https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/247
- DOI: https://doi.org/10.36233/0372-9311-2018-1-52-57
- ID: 247
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Цель. Идентификация иммуногенных белков штаммов Bacillus anthracis, продуцируемых в условиях, имитирующих организм хозяина. Материалы и методы. В работе использованы культуральные фильтраты изогенных вариантов штамма B.anthracis 575/122: R02 (рХОГ рХО2+); R01 (рХО1+ рХО2‘); R00 (рХОГ рХО2), полученные в условиях, имитирующих организм хозяина. В одномерном электрофорезе и иммуноблоттинге с гипериммунными сыворотками определены иммунодоминантные белки, которые идентифицированы в MALDI TOF MS. Результаты. В иммуноблотинге выявлены белки м.м. 97 - 14,1 кДа. Белок 90 кДа штамма B.anthracis 575/122 R01 в MALDI TOF MS идентифицирован как протективный антиген м.м. 85,810 кДа, белок м.м. 60 - как GMP синтаза м.м. 57,239 кДа. В культуральных фильтратах трех штаммов определено два общих антигена: белок с м.м. 97 кДа, идентифицированный как ЕА 1 В. anthracis м.м. 91,361 кДа и белок м.м. 45 кДа - как энолаза В. anthracis м.м. 46,418 кДа. Заключение. Таким образом, условия, имитирующие организм хозяина, способствуют продукции иммунодоминантных белков В. anthracis. В MALDI TOF MS подтверждены данные по молекулярно-весовой характеристике протективного антигена и белка ЕА1, а также ряда протеаз В. anthracis. Результаты могут быть использованы при выделении этих белков с целью усовершенствования диагностических и вакцинных препаратов.
Ключевые слова
Об авторах
М. П. Червакова
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
Автор, ответственный за переписку.
Email: noemail@neicon.ru
Россия
Т. Н. Шаров
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
Email: noemail@neicon.ru
Россия
И. А. Баркова
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
Email: noemail@neicon.ru
Россия
А. М. Барков
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
Email: noemail@neicon.ru
Россия
Д. В. Викторов
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
Email: noemail@neicon.ru
Россия
А. В. Топорков
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
Email: noemail@neicon.ru
Россия
Список литературы
- Барков А.М., Новоженина А.В., Порохня С.В., Ткаченко Г.А., Липницкий А.В. Характеристика изогенных вариантов Bacillus anthracis с различным содержанием плазмид вирулентности. Журн. микробиол. 2015, 1:17-22.
- Баркова И.А., Червакова М.П., Барков А.М., Новоженина А.В., Викторов Д.В. Диагностическое значение некоторых иммунодоминантных белков изогенных вариантов Bacillus anthracis. Клиническая лабораторная диагностика. 2016, 61 (12): 833838.
- Краснов Н.В., Лютвинский Я.И., Подольская Е.П. Масс-спектрометрия с мягкими методами ионизации в протеомном анализе. Научное приборостроение. 2010, 20 (4): 5-20.
- Семенов Б.Ф., Зверев В.В., Хаитов Р.М. Прогноз развития вакцинопрофилактики в первые десятилетия XXI века. Иммунология. 2009,6: 324-335.
- Agarwal S., Kulshreshtha R, Bambah Mukku D. et al. Alpha-Enolase binds to human plasminogen on the surface of Bacillus anthracis. Biochim. Biophys. Acta. 2008,1784 (7-8): 986994.
- Boyer A. E., Gallegos-Candela M., Lins R.C. et al. Quantitative mass spectrometry for bacterial protein toxins - a sensitive, specific, high-throughput tool for detection and diagnosis. Molecules. 2011, 16: 2391-2413.
- Chitlaru T., Gat O., Grosfeld H. et al. Identification ofin vivo-expressed immunogenic proteins by serological proteome analysis of the bacillus anthracis secretome. Infect. Immun. 2007,75: 2841-2852.
- Chitlaru X, Zaide G., Ehrlich S. et al. HtrA is a major virulence determinant of Bacillus anthracis. Molecular Microbiology. 2011, 81 (6): 1542-1559.
- Fouet A. AtxA, a Bacillus anthracis global virulence regulator. Res. Microbiol. 2010, 161: 735-742.
- LamonicaJ.M., Wagner M., EschenbrennerM. etal. Comparative secretome analyses ofthree Bacillus anthracis strains with variant plasmid contents. Infect. Immun. 2005, 73: 36463658.
- Liu X., Wang D., Ren J. et al. Identification of the immunogenic spore and vegetative proteins of Bacillus anthracis vaccine strain A16R. PLoS ONE. 2013, 8 (3): e57959.
- Pflughoeft K.J., Swick M.C., Engler D. A. et al. Modulation of the Bacillus anthracis secretome by the immune inhibitor Al protease. J. Bacteriol. 2014,196 (2): 424-435.
- Ristroph J.D., Ivins B.E. Elaboration of Bacillus anthracis antigens in a new, defined culture medium. Infect. Immun. 1983, 39:483-486.
- Shevchenko A., Tomas H., Havlis J. et al. In-gel digestion for mass spectrometric characterization of proteins and proteomes. Nature protocols. 2006, 1 (6): 2856-2860.
- Walz A., Mujer C., Connolly J. et al. Bacillus anthracis secretome time course under host-simulated conditions and identification of immunogenic proteins. Proteome Science. 2007,5:
Дополнительные файлы
