ВЛИЯНИЕ МЕТОДОВ ИММОБИЛИЗАЦИИ ЭРИТРОПОЭТИНА НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ВЫЯВЛЕНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКИХ IgG К EПB В СЫВОРОТКАХ КРОВИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ ЖИВОТНЫХ

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Исследование влияния методов иммобилизации эритропоэтина на чувствительность выявления специфических IgG к человеческому эритропоэтину (чЭПО) в сыворотках крови экспериментальный животных. Материалы и методы. В работе использовали сыворотки крови кроликов и морских свинок, полученных после введения препаратов эритропоэтина. Схемы иммуноферментного метода включали варианты пассивной иммобилизации человеческого рекомбинантного эритропоэтина (чрЭПО) на планшете и два варианта иммунохимической иммобилизации: связывание биотинилированного чрЭПО в лунках планшета с пассивно иммобилизованным стрептавидином и связывание чрЭПО с пассивно иммобилизованными на планшетах антителами к эритропоэтину. Результаты. Показано, что иммунохимическая иммобилизация приводит к повышению чувствительности в диапазоне от 2 до 10 раз при выявлении антител к чЭПО по сравнению с пассивной иммобилизацией. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о значительном влиянии метода иммобилизации чрЭПО на чувствительность выявления антител к чЭПО. При выявлении антител к нативным конформационным эпитопам иммунохимическая иммобилизация является предпочтительной.

Об авторах

А. М. Кудряшова

НИИ вакцин и сыворотоким. И.И.Мечникова

Автор, ответственный за переписку.
Email: noemail@neicon.ru
Россия

О. В. Борисова

НИИ вакцин и сыворотоким. И.И.Мечникова

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Н. А. Михайлова

НИИ вакцин и сыворотоким. И.И.Мечникова

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Д. В. Лоншаков

Биофармацевтическая компания ООО «Форт»

Email: noemail@neicon.ru
Россия

А. В. Катлинский

Биофармацевтическая компания ООО «Форт»

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Список литературы

  1. Barger Т.Е., KuckA.J., Chirmule N. etal. Detection ofanti-ESA antibodies in human samples from PRCA and non-PRCA patients: an immunoassay platform comparison. Nephrol Dial. Transplant. 2012, 27: 688-693.
  2. Barger T.E., Wrona D., Goletz T.J. et al. A detailed examination of the antibody prevalence and characteristics of anti-ESA antibodies.Nephrol. Dial Transplant. 2012, 27 (10): 3892- 3899.
  3. Butler J.E. Solid supports in enzyme-linked immunosorbent assays and other solid phase immunoassays. Methods Mol. Med. 2004, 94: 333-372.
  4. Casadevall N., Nataf J., Viron B. et al. Pure red-cell aplasia and antierythropoietin antibodies in patients treated with recombinant erythropoietin. New Engl. J. Med. 2002, 346: 469-475.
  5. Gross J., Moller R., Henke W. et al. Detection of anti-EPO antibodies in human sera by a bridging ELISA is much more sensitive when coating biotinylated rhEPO to streptavidin rather than using direct coating of rhEPO. J. Immunol. Methods. 2006, 313 (1-2): 176-182.
  6. Herrington W., Wieser C., Rosenkranz A.R. Pure red cell aplasia after treatment of renal anaemia with epoetin theta. Clin. Kidney J. 2013, 6 (5): 539-542.
  7. Lonshakov D. V., Sheremet'ev S. V., Belosludtseva E. M. et al. Synthesis of 4-aminobenzoic acid esters of polyethylene glycol and their use for pegylation of therapeutic proteins. RSC Adv. 2015, 5 (53): 42903-42909.
  8. Macdougall I.C., Casadevall N., Locatelli F. et al. Incidence of erythropoietin antibody-me-diated pure red cell aplasia: the prospective immunogenicity surveillance registry (PRIMS). Nephrol Dial Transplant. 2015, 30 (3): 451-460.
  9. Macdougall I.C., Roger S.D., de Francisco A. et al. Antibody-mediated pure red cell aplasia in chronic kidney disease patients receiving erythropoiesis stimulating agents: new insights. Kidney Int. 2012, 81:727-732.
  10. Rabe М., Verdes D., Seeger S. Understanding protein adsorption phenomena at solid surfaces. Advances Colloid Interface Sci. 2011, 162 (1-2): 87-106.
  11. Shin S.K., Ha S.K., Lee K.W. et al. Application of a bridging ELISA for detection of antierythropoietin binding antibodies and a cell-based bioassay for neutralizing antibodies in human sera. J. Pharm. Biomed Anal. 2010, 52: 289-293.
  12. Van Der Zee J.S., Van Swieten P., Aalberse R.C. Serologic aspects of IgG4 antibodies. II. IgG4 antibodies form small, nonprecipitating immune complexes due to functional monovalency. J. Immunol. 1986, 137: 3566-3571.
  13. Weeraratne D.K., Kuck A.J., Chirmule N. et al. Measurement of anti-erythropoiesis stimulating agent IgG4 antibody as an indicator of antibody-mediated pure red cell Aplasia. Clin. Vac. Immunol.2013, 20 (1): 46-51.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Кудряшова А.М., Борисова О.В., Михайлова Н.А., Лоншаков Д.В., Катлинский А.В., 2017

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах