УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ИДЕНТИФИКАЦИИ АТИПИЧНЫХ ШТАММОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ И ИХ ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ ОТ БЛИЗКОРОДСТВЕННЫХ БАЦИЛЛ


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Исследование биологических свойств атипичных штаммов возбудителя сибирской язвы для усовершенствования методов идентификации и дифференциации от близкородственных бацилл. Материалы и методы. Объектом исследования был 1101 штамм микроорганизмов, из которых экспериментально изучено: атипичных — 40, типичных — 2, сапрофитных бацилл рода Bacillus — 50. Для идентификации кроме общепринятых методов проведены дополнительные тесты для внутривидовой дифференциации, а также метод мультиплексной ПЦР. Результаты. Оценена частота выделения атипичных штаммов возбудителя сибирской язвы в природных условиях, а также частота ошибок в идентификации штаммов бацилл как Bacillus anthracis. Усовершенствован фенотипический тест для определения чувствительности к пенициллину. Разработан вариант мультиплексной ПЦР для дифференциации штаммов B. anthracis с любым набором плазмид от штаммов близкородственных бацилл. Показана возможность использования многолокусного анализа 6 хромосомных и 2 плазмидных областей генома B.anthracis с вариабельным числом тандемных повторов (MLVA) для дифференциации штаммов возбудителя сибирской язвы от бацилл рода Bacillus. Заключение. Для оптимизации процессов идентификации типичных и атипичных штаммов B. anthracis и дифференциации близкородственных бацилл целесообразно использовать дискодиффузионный метод с коммерческими дисками пенициллина, мультипраймерную ПЦР и метод MLVA по 6 хромосомным и 2 плазмидным локусам.

Об авторах

А. Г Рязанова

Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт

Е. И Еременко

Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт

О. И Цыганкова

Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт

Е. А Цыганкова

Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт

Список литературы

  1. Еременко Е.И. Потребности сибиреязвенного микроба в факторах роста и новые питательные среды для его культивирования. Автореф. дис. канд. мед. наук. Саратов, 1986.
  2. Еременко Е.И. Биологические и популяционные аспекты патогенности Bacillus anthracis. Автореф. дис. д-ра мед. наук. Саратов, 1997.
  3. Методические указания «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам». МУК 4.2.1890-04.
  4. Методические указания «Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами I-II групп патогенности». МУ 1.3.1794-03. М., 2003.
  5. Руководство «Лабораторная диагностика возбудителей опасных инфекционных болезней». Саратов, 1998.
  6. Цыганкова О.И. Гемолитическая и протеолитическая активность сибиреязвенного микроба. Автореф. дис. канд. мед. наук. Саратов, 1993.
  7. Цыганкова О.И., Еременко Е.И., Брюханов А.Ф. и др. Генотипирование штаммов сибиреязвенного микроба на территории стран СНГ. Журн. микробиол. 2003, 6 (прил.): 51—56.
  8. Цыганкова О.И., Еременко Е.И., Рязанова А.Г., Цыганкова Е.А. Мультиплексная амплификационная тест-система для идентификации и дифференциации Bacillus anthracis. Там же. 2005, 3: 69—74.
  9. Dwyer K.G., Lamonica J.M., Schumacher J.A. et al. Identification of Bacillus anthracis specific chromosomal sequences by suppressive subtractive hybridization. BMC Genomics. 2004, 5: 15. http://www.biomedcentral.com/1471-2164/5/15.
  10. Hoffmaster A.R., Hill K.K., Gee J.E. et al. Characterization of Bacillus cereus isolates associated with fatal pneumonias: strains are closely related to Bacillus anthracis and harbor B.anthracis virulence genes. J. Clin. Microbiol. 2006, 44 (9): 3352—3360.
  11. Keim P., Price L.B., Klevytska A.M. et al. Multiple locus variable namber tandem repeat analysis reveals genetic relationships within Bacillus anthracis. J. Bacteriol. 2000, 182 (10): 2928—2936.
  12. Ramisse V., Patra G., Garringue H. et al. Identification and characterization of Bacillus anthracis by multiplex PCR analysis of sequences on plasmids pXO1 and pXO2 and chromosomal DNA. FEMS Microbiol. Lett. 1996, 145: 9—16.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Рязанова А.Г., Еременко Е.И., Цыганкова О.И., Цыганкова Е.А., 2009

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах