ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ФОСФОРЕСЦЕНТНЫХ ИММУНОЧИПОВ ПРИ СЕРОДИАГНОСТИКЕ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель . Оценить чувствительность и специфичность фосфоресцентных иммуночипов, разработанных на основе микропланшетного фосфоресцентного анализа (ФОСФАН) для определения IgM и IgG к вирусу клещевого энцефалита (КЭ) в сыворотках крови пациентов, и сравнить показатели ФОСФАН и методов лантанидной иммунофлуоресценции (ЛИФА) и твердофазного иммуноферментного анализа (ТИФА). Материалы и методы . Исследована 261 сыворотка крови, в том числе 155 проб от 74 пациентов с клиническим диагнозом КЭ, подтвержденным серологически выявлением IgM к вирусу КЭ. Сыворотки собраны в 2003 г. в Пермской области от людей, заболевших КЭ, а также от клинически здоровых доноров крови. Фосфоресцентный иммуночип представлял собой 96-луночный микропланшет, на дне лунок которого были сформированы 4 активные микрозоны, позволяющие улавливать специфические IgM или IgG к вирусу КЭ. Иммунореакцию проявляли конъюгатом стрептавидина c Pt копропорфирином. Интенсивность фосфоресценции измеряли при сканировании дна предварительно высушенной микролунки приборомсканером ИФИ-02. Результаты . При выявлении в пробах IgM и IgG к вирусу КЭ продемонстрирована сопоставимая чувствительность и специфичность методов ФОСФАН, ЛИФА и ТИФА. При анализе сывороток с низким титром специфических IgM методы ФОСФАН и ЛИФА были более чувствительными. Заключение . ФОСФАН можно использовать для ранней серологической диагностики острого КЭ, а также для оценки уровня антител при контроле эффективности лечения длительно болеющих пациентов и уровня протективного иммунитета у вакцинированных.

Об авторах

В. Г Помелова

ГосНИИ биологического приборостроения, ЗАО «Иммуноскрин», НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва; Пермская государственная медицинская академия

Т. А Быченкова

ГосНИИ биологического приборостроения, ЗАО «Иммуноскрин», НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва; Пермская государственная медицинская академия

Н. И Бекман

ГосНИИ биологического приборостроения, ЗАО «Иммуноскрин», НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва; Пермская государственная медицинская академия

Н. С Осин

ГосНИИ биологического приборостроения, ЗАО «Иммуноскрин», НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва; Пермская государственная медицинская академия

Э. И Коренберг

ГосНИИ биологического приборостроения, ЗАО «Иммуноскрин», НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва; Пермская государственная медицинская академия

Н. Н Воробьева

ГосНИИ биологического приборостроения, ЗАО «Иммуноскрин», НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва; Пермская государственная медицинская академия

В. И Фризен

ГосНИИ биологического приборостроения, ЗАО «Иммуноскрин», НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва; Пермская государственная медицинская академия

Список литературы

  1. Коренберг Э.И. Изучение и профилактика микстинфекций, передающихся иксодовыми клещами. Вестн. РАМН. 2001, 11: 41 — 45.
  2. Осин Н.С., Помелова В.Г., Соколов А.С. и др. Фосфоресцентный микроанализ как новая технологическая платформа для молекулярной диагностики. Там же. 2007, 12: 3 — 8.
  3. Помелова В.Г., Быченкова Т.А., Бекман Н.И. и др. Метод лантанидной иммунофлуоресценции для серодиагностики клещевого энцефалита. Мед.паразитол. 2006, 2: 13 — 18.
  4. Помелова В.Г., Бекман Н.И., Быченкова Т.А. и др. Оценка уровня специфических антител у больных клещевым энцефалитом методом лантанидной иммунофлуоресценции. Там же. 2006, 3: 9 — 14.
  5. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. М., Медиа Сфера, 2003.
  6. Флэтчер Р., Флэтчер С., Вагнер Э. Клиническая эпидемиология. Основы доказательной медицины. М., Медиа Сфера, 1998.
  7. Holbrook M.R., Shope R.E., Barret A.D.T. Use of recombinant E protein domain III-based enzyme-linked immunosorbent assays for differentiation of Tick-borne encephalitis serocomplex flaviviruses from mosquito-borne flaviviruses. J. Clin. Microbiol. 2004, 42 (9): 4101 — 4110.
  8. MacBeath G., Schreiber S.L. Printing proteins as microarrays for high-throughput function determination. Science. 2000, 289 (5485): 1760 — 1763.
  9. Mendoza L.G., McQuary P., Mongan A. et al. High-throughput microarray-based enzymelinked immunosorbent assay (ELISA). Biotechniques. 1999, 27: 778 — 780.
  10. Mezzasoma L., Bacarese-Hamilton T., Crisanti A. et al. Antigen microarrays for serodiagnosis of infectious diseases. Clin. Chem. 2002, 48: 121 — 130.
  11. de Vegvar Neuman H.E., Robinson W.H. Microarray profiling of antiviral antibodies for the development of diagnostics, vaccines, and therapeutics. Clin. Immunol. 2004, 111: 196 — 201.
  12. Wong S.J., Demarest V.L., Boyle R.H. et al. Detection of human anti-flavivirus antibodies with a West Nile virus recombinant antigen microsphere immunoassay. J.Clin.Microbiol. 2004, 42 (1): 65 — 72.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Помелова В.Г., Быченкова Т.А., Бекман Н.И., Осин Н.С., Коренберг Э.И., Воробьева Н.Н., Фризен В.И., 2009

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах