ОЦЕНКА ПРОТЕКТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ КОНСТРУКЦИИ БЕЛКА ТЕПЛОВОГО ШОКА С ЛИПОПОЛИСАХАРИДОМ ПРОТИВ ИНФЕКЦИИ SALMONELLA TYPHIMURIUM У МЫШЕЙ

Цель. Исследование протективной активности рекомбинантной конструкции белка теплового шока с липополисахаридом (ркБТШ-ЛПС) против S.typhimurium: ркБТШ-ЛПС как таковой и ее вариантов, в которых был разрушен белок или связан ЛПС. Планировалось также изучение способности ркБТШ-ЛПС взаимодействовать с TLRs, экспрессированных на перевиваемых клеточных линиях. Материалы и методы. Белым беспородным мышам вводили ркБТШ-ЛПС; конструкцию, обработанную РМВ для связывания ЛПС рк(БТШ-ЛПС)РМВ; конструкцию, в которой белок был подвергнут кипячению в течение 30 минут рк(БТШ-ЛПС)К; ЛПС (E.coli K-235); полимиксин В (РМВ) . Через 24 ч после однократного или последнего введения ркБТШЛПС мышей заражали S.typhimurium 415 внутрибрюшинно в 0,5 мл физиологического раствора в дозе 63 LD 50/мышь. Титр антител к ЛПС S.typhimurium определяли в ИФА. Результаты. Продемонстрировано, что ркБТШ-ЛПС при введении мышам за 24 часа до заражения индуцирует резистентность к S.typhimurium инфекции. Защита формировалась после трехкратного введения 10 мкг/мышь или одной инокуляции 100 мкг/мышь ркБТШ-ЛПС. Иммунизированные мыши выживали в 40 — 80% при 90% гибели в контроле. Разрушение БТШ при кипячении конструкции отменяло протективный эффект. После связывания ЛПС РМВ защитные свойства ркБТШ-ЛПС сохранялись, но выявлялись только при многократном введении 10 мкг/мышь этого препарата. ЛПС Е.coli в дозе 0,0266 мкг/мышь и РМВ не влияли на течение S.typhimurium инфекции у мышей. Заключение. Показано, что ркБТШ-ЛПС эффективно защищает мышей от бактериальной инфекции S.typhimurium с помощью активации врожденного иммунитета; рассмотрен один из возможных механизмов такой защиты через взаимодействие с TLRs 2 и 4. Требует дальнейшего изучения, какие еще механизмы врожденного иммунитета могут активировать ркБТШЛПС.

ркБТШ-ЛПС, БТШ, защита, TLR2 и TLR4