ПОЛУЧЕНИЕ И ОЦЕНКА СВОЙСТВ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К ЭКЗОТОКСИНУ А PSEUDOMONAS AERUGINOSA


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Получение, изучение свойств и оценка возможности использования моноклональных антител к экзотоксину А Pseudomonas aeruginosa (ЭТА) для выявления молекул рекомбинантных экзотоксина А и анатоксина. Материалы и методы. Получены гибридомы - продуценты моноклональных антител к ЭТА. Для иммунизации мышей использован рекомбинантный экзотоксин А, его атоксичные формы, анатоксин синегнойной палочки и живая культура P. aeruginosa PA-103. Результаты. Наиболее продуктивным оказался опыт по слиянию злокачественной клеточной линии и иммунных лимфоцитов, полученных от одной мыши, иммунизированной рекомбинантным ЭТА. Оценена интенсивность взаимодействия моноклональных антител с рекомбинантными атоксичными формами ЭТА в иммуноферментном анализе. Изучена протективная (токсиннейтрализующая) активность антител на культуре клеток и способность выявлять экзотоксин А в реакции латекс-агглютинации. Антитела гибридной культуры № 21 способны выявлять молекулы рекомбинантного ЭТА и анатоксина в реакции латекс-агглютинации. Заключение. Предполагается использование полученных антител для тестирования токсигенности штаммов P. aeruginosa, а также выявления анатоксина в технологическом процессе получения профилактических препаратов на основе экзотоксина А.

Ключевые слова

Об авторах

А. В Солдатенкова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

И. В Яковлева

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Н. В Гаврилова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Н. А Михайлова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

В. В Свиридов

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Список литературы

  1. Исаков М.А., Солдатенкова А.В., Калошин А.А., Михайлова Н.А. Иммунобиологические свойства рекомбинантных атоксичных форм экзотоксина А Pseudomonas aeruginosa. Журн. микробиол. 2011, 2: 37-42.
  2. Ломтатидзе М.Н., Храпова Н.П., Крючкова Т.П. и др. Экспресс-выявление Pseudomonas aeruginosa при помощи меченных ФИТЦ моноклональных антител. Эпидемиология и вакциопрофилактика. 2004, 2 (15): 42-45.
  3. Chia J., Pollak M., Avigan D., Steinbch S. Functionally distinct monoclonal antibodies reactive with enzymatically active and binding domains of Pseudomonas aeruginosa toxin A. Infect. Immun. 1986, 52 (3): 756-762.
  4. Danielsen L., Westh H., Balselv E. et al. Pseudomonas aeruginosa exotoxin A antibodies in rapidly deteriorating chronic leg ulcers. Lancet. 1996, 347: 265.
  5. Elzaim H. S., Chopra A. K., Peterson J. W. et al. Protection against exotoxin A (ETA) and Pseudomonas aeruginosa infection in mice with ETA-specific antipeptide antibodies. Infect. Immun. 1998, 66 (11): 5551-5554.
  6. Galloway D. R., Hedstrom R.C., Pavlovskis O.R. Production and characterization of monoclonal antibodies to exotoxin A from Pseudomonas aeruginosa. Infect. Immun. 1984, 44 (2): 262267.
  7. Goding J.W. Monoclonal antibodies: principles and practice. London, Acad. Press. Inc. Ltd, 1986.
  8. Ogata M., Pastan I., Fitzgerald D. Analysis of Pseudomonas exotoxin activation and conformational changes by using monoclonal antibodies as probes. Infect. Immun. 1991, 59 (1): 407-414.
  9. Ohtsuka H., Horigome K., Higuchi A. Binding of monoclonal antibody specific for domain Ia/II of Pseudomonas aeruginosa exotoxin A at pH 4 strongly neutralize exotoxin A-induced cytotoxicity in cell culture and in vivo. Infect. Immun. 1992, 60 (3): 1061-1068.
  10. Shang H., Yfeh M., Lin C., Hwang J. Characterization of monoclonal antibody B7, which neutralizes the cytotoxicity of Pseudomonas aeruginosa exotoxin A. Clin. Diagn. Lab. Immun. 1996, 3 (6): 727-732.
  11. Schmitt C.K., Meysick K.C., O'Brien A.D. Bacterial toxins: friends or foes? Emerg. Infect. Dis. 1999, 5(2): 224-234.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Солдатенкова А.В., Яковлева И.В., Гаврилова Н.В., Михайлова Н.А., Свиридов В.В., 2014

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах