ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЛИПОПОЛИСАХАРИДА BORDETELLA PERTUSSIS В СОСТАВЕ БЕСКЛЕТОЧНОЙ КОКЛЮШНОЙ ВАКЦИНЫ


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Исследование иммунобиологических свойств липополисахарида (ЛПС) Bordetella pertussis в составе бесклеточной коклюшной вакцины. Материалы и методы. Использовали экспериментальные серии бесклеточной коклюшной вакцины (БКВ), лиофилизированный липополисахарид (ЛПС). Титр антител к ЛПС в сыворотках мышей оценивали с помощью ИФА с использованием пероксидазных коньюгатов антивидовых антител к IgG мышей. Активность ЛПС в препаратах комплекса антигенов B. pertussis определяли в количественном хромогенном ЛАЛ-тесте по конечной точке. Защитную активность БКВ определяли в тесте на мышах при интрацеребральном заражении вирулентной культурой В. рertussis штамм № 18323. Безопасность БКВ определяли в тесте изменения массы тела мышей. Результаты. Наличие ЛПС в составе БКВ было показано в иммуноэлектрофорезе с очищенным препаратом ЛПС В. рertussis в качестве контроля. Обработка формалином изменила иммунохимические свойства ЛПС БКВ, что привело к смещению полосы преципитации с коклюшной агглютинирующей сывороткой из стартовой зоны в катодную. В супернатантах коклюшных культур количество ЛПС составляло в среднем 49050+6774 ед. эндотоксина/мл (ЕЭ/мл). В препаратах БКВ количество ЛПС составляло в среднем 906+90 ЕЭ/ мл, т.е. снижалось более чем в 50 раз. В ИФА показано нарастание титров антител к ЛПС В. рertussis в сыворотках мышей после иммунизации БКВ, что свидетельствовало о наличии его в иммуногенной форме в составе комплексного препарата. Проведенные доклинические испытания показали протективную активность и специфическую безопасность экспериментальных серий БКВ. Заключение. Обезвреженный формалином препарат БКВ представляет собой комплекс белковых антигенов в ассоциации с ЛПС. Обработка формалином приводит к модификации молекулы ЛПС, сохраняющей антигенные свойства, но значительно менее токсичной.

Об авторах

Е. М Зайцев

НИИ вакци и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

А. В Поддубиков

НИИ вакци и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

М. В Брицина

НИИ вакци и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Н. У Мерцалова

НИИ вакци и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

М. Н Озерецковская

НИИ вакци и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

И. Г Бажанова

НИИ вакци и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

Н. Г Плеханова

Волгоградский научноисследовательский противочумный институт

Список литературы

  1. Захарова Н.С., Брицина М.В., Мерцалова Н.У. и др. Отечественная бесклеточная коклюшная вакцина. Журн. микробиол. 2008, 1: 35-41.
  2. Комитет экспертов ВОЗ по стандартизации биологических препаратов (Сороковой доклад). Серия технических докладов 800. ВОЗ, Женева, 1992.
  3. Allen A.G., Thomas R.M., Cadisch J.T., Maskell D. J. Molecular and functional analysis of the lipopolysaccharide biosintes locus wlb from Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis and Bordetella bronchiseptica. Mol. Microbiol. 1998, 29 (1): 27-38.
  4. Chodorowska M. Humoral reaction to Bordetella pertussis antigens: pertussis toxin, filamentous hemagglutinin and lipopolysaccyaride in children with clinical symptoms of whooping cough. II. Occurrence and level of B. pertussis antigens in children with suspected whooping cough. Med. Dosw. Microbiol. 1999, 51 (3-4): 269-280.
  5. Geurtsen J., Banus H.A., Gremmer E.R. et al. Lipooligosaccharide analogs improve efficacy of acellular pertussis vaccine and reduce type I hypersensitivity in mice. Clin. Vac. Immunol. 2007, 14 (7): 821-829.
  6. Ibsen P., M0ller S., Heron I. Lipopolysacharides in a traditional pertussis vaccines. J. Biol. Stand. 1988, 16 (4): 299-309.
  7. Ibsen P., Schou C., Au-Jensen M., Heron I. The effect of cyclodextrin on lipopolysaccharide production in cultures of Bordetella pertussis. J. Biol. Stand.1989, 17(4):321-330.
  8. Marr N., Hajjar A.M., Shah N.R. et al. Substitution of the Bordetella pertussis lipid A phosphate groups with glucosamine is required for robust NF-kappa B activation and release of proinflam-matory cytokines in cells expressing human but not murine toll-like receptor 4-MD-2-CD14. Infect. Immun. 2010, 78 (5): 159-171.
  9. Westphal O., Jann K. Bacterial lipopolysaccharides extraction with phenol - water and father application of the procedure. In: Methods in Carbohydrate Chemistry. Whistler R.L., Wolfrom M.L. (ed.). New Ybrk, Academic Press, 1965.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Зайцев Е.М., Поддубиков А.В., Брицина М.В., Мерцалова Н.У., Озерецковская М.Н., Бажанова И.Г., Плеханова Н.Г., 2014

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах