АНАЛИЗ ВНЕКЛЕТОЧНОГО ПРОТЕОМА STAPHYLOCOCCUS AUREUS 6 В КОНЦЕ ФАЗЫ ЭКСПОНЕНЦИАЛЬНОГО РОСТА


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Определение спектра белков, которые синтезирует и выделяет S.aureus на ранней стадии роста - в экспоненциальной фазе. Материалы и методы. Изучены белки, выделяемые S. aureus штамм 6, в среду культивирования в конце фазы экспоненциального роста (4,5 ч). Методом жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии были идентифицированы 11 белков. Результаты. Только у трех из данных белков было предсказано наличие сигнальных пептидов, указывающих на их внеклеточную локализацию; остальные белки локализованы преимущественно в бактериальной цитоплазме. Пять из 11 белков функционируют в качестве ферментов углеводного обмена. В фильтрате культуральной жидкости S.aureus не были обнаружены другие внутриклеточные белки, которые указывали бы на её загрязнение белками из разрушенных бактериальных клеток. Было высказано предположение, что ферменты углеводного метаболизма могут обеспечивать бактериальные клетки энергией, необходимой для выхода из лаг-фазы в фазу экспоненциального роста. Фермент супероксид дисмутаза, вероятно, обеспечивает течение окислительновосстановительных процессов. Синтез других протеолитических ферментов и токсинов осуществляется в более поздние сроки развития бактериальной популяции. Иммунизация мышей смесью 11 идентифицированных белков показала их протективные свойства после заражения штаммом S.aureus 6. Заключение. В связи с изложенным, комплекс выделенных белков может быть перспективным в развитии новой стратегии профилактики и терапии стафилококковых инфекций.

Об авторах

И. М Грубер

НИИ вакцин и сывороток им. Мечникова, Москва

Ф. В Доненко

Российский онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина, Москва

О. М Игнатова

НИИ вакцин и сывороток им. Мечникова, Москва

Е. А Асташкина

НИИ вакцин и сывороток им. Мечникова, Москва

Р. К Зиганшин

Институт биоорганической химии им. Шемякина и Овчинникова, Москва

Е. А Зарядьева

Институт биоорганической химии им. Шемякина и Овчинникова, Москва

И. Б Семенова

НИИ вакцин и сывороток им. Мечникова, Москва

Е. А Курбатова

НИИ вакцин и сывороток им. Мечникова, Москва

Л. С Черкасова

НИИ вакцин и сывороток им. Мечникова, Москва

О. Е Тарасова

НИИ вакцин и сывороток им. Мечникова, Москва

М. В Киселевский

Российский онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина, Москва

Список литературы

  1. Егорова Н.Б., Vymola F., Ефремова В.Н., Vrbova E. Экспериментальное изучение препаратов для иммунотерапии стафилококковой инфекции. Журн. гигиены, эпидемиол., микробиол., иммунологии. 1987, 31 (7): 489-496.
  2. Гланц С.А. Медико-биологическая статистика. М., Практика, 1999.
  3. Кузьменко О.М., Злыгостев С.А., Михайлова Н.А. и др. Характеристика комплексов антигенов вакцинных штаммов Staphylococcus aureus, полученных в различных условиях культивирования. Журн. микробиол. 2010, 2: 51-54.
  4. Тришин А.В., Доненко Ф.В., Курбатова Е.А. и др. Протективная активность секретируемых белков Streptococcus pneumoniae и Klebsiella pneumoniae. Журн. микробиол. 2008, 4: 46-50.
  5. Abdullah Z.S., Khan M.U., Kodali S.K., Javaid A. Pyomiositis mimicking osteomyelitis detected by SPET/CT. Hell. J. Nucl. Med. 2010, 13: 277-279.
  6. Alexeyev M.F., Winkler H.H. Complete replacement ofbasic amino acid residues with cysteines in Rickettsia prowazekii ATP/ADF translocase. Biocim. Biophys. Acta. 2002, 1535: 1536.
  7. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding. Anal. Biochem. 1976, 72: 248-254.
  8. Burlak C., Hammer C.H., Robinson M.A. et al. Global analysis of community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus exoproteins reveals molecules produced in vitro and during infection. Cell. Microbiol. 2007, 9: 1172-1190.
  9. Clements M. O., Watson S. P., Foster S. J. Characterisation of the major superoxide dismutase of Staphylococcus aureus and its role in starvation survival, stress resistance, and pathogenicity. J. Bacteriol. 1999, 181: 3898-3903.
  10. Daum R.S. Staphylococcus aureus vaccines. In: Plotkin S.A., Orenstein W.A., Offit P.A. (ed.). Vaccines. Elsevier, 2008, p. 1307-1315.
  11. Donenko F.V., Sitdikova S.M., Syrtsev A.V. et al. Hemoglobin-associated proteins isolated from blood serum of Ehrlich carcinoma-bearing mice. Int. J. Oncol. 2008, 32: 885-893.
  12. Du Plessis E.M., Theron J., Joubert L. et al. Characterization of a phosphatase secreted by Staphylococcus aureus strain 154, a new member of the bacterial class C family of nonspecific acid phosphatases. Syst. Appl. Microbiol. 2002, 25: 21-30.
  13. Gardy J. L., Laird M. R., Chen F. et al. PSORTb v. 2.0: expanded prediction ofbacterial protein subcellular localization and insights gained from comparative proteome analysis. Bioinformatics. 2005, 21: 617-623.
  14. Hattori M., Miyakawa S., Ohama Y et al. Reduced immunogenicity of beta-lactoglobulin by conjugation with acidic oligosaccharides. J. Agric. Food Chem. 2004, 14 (52; 14): 4546-4553.
  15. Heiden M.G. V., Plas D.R., Rathmell J.C. et al. Growth factors can influence cell growth and survival trough effects on glucose metabolism. Mol. Cell. Biol. 2001, 21 (17): 5899-5912.
  16. Jones R.C., Deck J., Edmondson R.D., Hart M.E. Relative Quantitative comparisons of the extracellular protein profiles of staphylococcus aureus UAMS-1 and its sarA, agr, and sarA agr regulatory mutants Using 1D-PAGE and nanocapillary LC coupled with tandem MS. J. Bacteriol. 2008, 190 (15): 5265-5278.
  17. King J.T., Goulet J.L., Perkal M.F., Rosenthal R.A. Glicemic control and infections in patients with diabetes undergoing noncardiac surgery. Ann. Surg. 2011, 253: 158-165.
  18. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of head of bacteriophage. Nature. 1970, 4 (227): 680-685.
  19. Mohan V., Unnikrishnan R., Thomas N. et al. Pneumococcal infection and immunization in diabetic patients. J. Postgrad. Med. 2011, 57: 78-81.
  20. Nakano M., Kawano Y., Kawagish M. et al. Two-dimensional analysis of exoproteins of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) for possible epidemiological applications. Microbiol Immunol. 2002, 46: 11-22.
  21. Sibbald M.J., Ziebandt A.K., Engelmann S. et al. Mapping the pathways to staphylococcal pathogenesis by comparative secretomics. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2006,70: 755-788.
  22. The UniProt Consortium. The universal protein resource (UniProt). Nucleic Acids Res. 2007, 35: D193-D197.
  23. Ziebandt A.K., Becher D., Ohlsen K. et al. The influence of agr and sigmaB in growth phase dependent regulation of virulence factors in Staphylococcus aureus. Proteomics. 2004, 4: 3034-3047.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Грубер И.М., Доненко Ф.В., Игнатова О.М., Асташкина Е.А., Зиганшин Р.К., Зарядьева Е.А., Семенова И.Б., Курбатова Е.А., Черкасова Л.С., Тарасова О.Е., Киселевский М.В., 2013

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах