ИССЛЕДОВАНИЕ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ АНТИГЕНОВ ИММУНОДИФФУЗИОННЫМИМЕТОДАМИ В ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ПАТОГЕННЫХ БУРКХОЛЬДЕРИЙ
- Авторы: Будченко АА1, Мазурова ИЮ1, Илюхин ВИ1, Budchenko AA2, Mazurova IY.2, Ilyukhin VI2
-
Учреждения:
- Волгоградский научно-исследовательскийпротивочумный институт
- Выпуск: Том 89, № 1 (2012)
- Страницы: 54-60
- Раздел: Статьи
- Дата подачи: 09.06.2023
- Дата публикации: 15.03.2012
- URL: https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/13665
- ID: 13665
Цитировать
Полный текст
Аннотация
экстрацеллюлярных антигенов (ЭЦА) патогенных буркхольдерий в электрофорезе в
ПААГ с SDS и использование их для дифференциации этих микроорганизмов иммунодиффузионными методами. Материалы
и методы. Изучено 60 штаммов Burkholderia
pseudomallei, 14 штаммов B. mallei, 5 штаммов B. thailandensis, 4 штамма B. cepacia.
ЭЦА получали по методике Liu на F-агаре,
покрытом целлофаном. Электрофорез в
ПААГ с SDS проводили в 10% геле по
Laemmli, реакцию иммунодиффузии (РИД)
в 1% агарозном геле, РИД с живыми культурами, иммуноэлектрофорез (ИЭФ) ставили по общепринятым методикам. Для
получения сывороток кроликов иммунизировали смесью ЭЦА с неполным адъювантом Фрейнда. Результаты. Спектры ЭЦА
типичных штаммов изучаемых видов буркхольдерий после электрофореза в ПААГ с
SDS, окрашенные серебром, имеют 8 - 9
мажорных фракций. Высоким сходством
обладают электрофореграммы ЭЦА B.
pseudomallei и B. thailandensis. Анализ состава ЭЦА в РИД с иммунными сыворотками к ЭЦА выявил максимальное количество перекрестнореагирующих ЭЦА (3)
между B. pseudomallei и B. thailandensis. Эти
штаммы имели только по одному перекрестному ЭЦА со штаммом B. mallei. РИД
с живыми культурами с иммунной сывороткой к ЭЦА B. thailandensis выявлял ЭЦА у
всех штаммов B. pseudomallei, B. thailandensis
и не выявлял их у всех штаммов B.
mallei. Анализ электрофореграмм, полученных с помощью метода ИЭФ ЭЦА патогенных буркхольдерий с иммунными сыворотками к ЭЦА выявил различия в их составах,
достаточные для их дифференцирования.
Заключение. Выявленные иммунодиффузионными методами различия составов ЭЦА
позволили разработать дополнительные
способы дифференциации возбудителей
сапа и мелиоидоза.
Ключевые слова
Об авторах
А А Будченко
Волгоградский научно-исследовательскийпротивочумный институтВолгоградский научно-исследовательскийпротивочумный институт
И Ю Мазурова
Волгоградский научно-исследовательскийпротивочумный институтВолгоградский научно-исследовательскийпротивочумный институт
В И Илюхин
Волгоградский научно-исследовательскийпротивочумный институтВолгоградский научно-исследовательскийпротивочумный институт
A A Budchenko
I Yu Mazurova
V I Ilyukhin
Список литературы
- Илюхин В.И., Меринова Л.К., Агеева Н.П. и др. Бактериоцины и бактериофаги патогенных буркхольдерий. Журн. микробиол. 2011, 1: 12-19.
- Г. Фримель. Иммунологические методы. М., 1987.
- Будченко А.А., Мазурова И.Ю., Илюхин В.И. Способ дифференциации возбудителей сапа и мелиоидоза преципитирующей антисывороткой. Патент ¹ 2305557 РФ, 10.09.2007.
- Пивень Н.Н. Перспективы исследований общих, перекрестнореагирующих и видовых антигенов у некоторых видов бактерий рода Pseudomonas. Микробиол. журн. 1987, 49 (3): 6-10.
- Пивень Н.Н., Илюхин В.И., Тимошин В.Б. и др. Перекрестно-реагирующие антигены патогенных буркхольдерий и некоторых опасных возбудителей инфекционных болезней. Журн. микробиол. 2005, 2: 14-19.
- Пивень Н.Н., Смирнова В.И., Викторов Д.В. Иммуногенность и гетерогенность поверхностного антигена 8 Burkholderia pseudomallei. Журн. микробиол. 1996, 4: 75-78.
- Brett P.J., Burtnick M.N., Heis С. et al. Burkholderia thailandensis oacA mutants facilitate the expression of Burkholderia mallei-like O-polysaccharides. Infect. Immun. 2010, 10: 1023-1033.
- Euteneuer B., Loos M. Comparison of the exoproducts of gram-negative bacteria by SDS-Page. Zbl. Bakt. Hyng. 1985, A259: 11-19.
- Gilmore G., Barnes J., Ketheesan N. Use of antigens derived from B. pseudomallei, B. thailandensis, and B. cepacia in the indirect hemagglutination assay for melioidosis. Clin. Vac. Immun. 2007, 14: 1529-1531.
- Hardy L.N., Knox K.W., Brown R.A. Comparison of extracellular protein profiles of seven serotypes of mutans streptococci grown under controlled conditions. J. Gen. Microbiol. 1986, 132: 1389-1400.
- Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970, 227: 680-685.
- Liu P.V. Survey of hemolysin production among species of pseudomonads. J. Bacteriol. 1957, 74: 718-727.
- Liu P.V. Identification of pathogenic pseudomonads by extracellular antigens. J. Bacteriol. 1961, 81: 28-35.
- Oakley B.R., Kirsch D.R., Morris B.R. A simplified ultrasensitive silver stain for detecting proteins in polyacrylamide gels. Anal. Biochem. 1980, 105: 361-363.