РАЗРАБОТКА ПЦР-ТЕСТ СИСТЕМЫ НА ОСНОВЕ ГЕНА colA ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ЛЕПТОСПИР В КЛИНИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Разработка праймеров для выявления лептоспир в клиническом материале, в том числе в моче. Материалы и методы . Проведено исследование чувствительности и специфичности праймеров, комплементарных гену colA, в стандартной ПЦР с использованием препаратов ДНК культур патогенных и сапрофитных лептоспир, биологического материала от здоровых людей и собак, в том числе контаминированного культурой патогенных лептоспир. Результаты . Было установлено специфическое взаимодействие данных праймеров с ДНК патогенных лептоспир 14 серогрупп. Чувствительность методики составила 50 клеток на 1 мл образца. Заключение. Описанные праймеры удовлетворяют требованиям чувствительности и специфичности и могут быть рекомендованы для применения с целью детекции лептоспир как в сыворотке, так и в моче.

Об авторах

А. Н Ваганова

НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, Санкт-Петербург

Н. А Стоянова

НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, Санкт-Петербург

Н. К Токаревич

НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Самсонова А.П., Петров Е.М., Аляпкина Ю.С. Ген, кодирующий липопротеин внешней мембраны LipL32, как генетическая мишень для разработки схем генотипирования лептоспир. Мол. генет. микробиол. вирусол. 2008, 1: 3-8.
  2. Стоянова Н.А., Токаревич Н.К., Ваганова А.Н. Лептоспирозы: пособие для врачей. СПб., НИИЭМ им. Пастера, 2010.
  3. Altschul S.F., Madden T.L., Schäffer A.A. Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generation of protein database search programs. Nucl. Acids Res. 1997, 17: 3389-3402.
  4. Bal A.E., Gravekamp C., Hartskeerl R.A. Detection of leptospires in urine by PCR for early diagnosis of leptospirosis. J. Clin. Microbiol. 1994, 8: 1894-1898.
  5. Brown P.D., Carrington D.G., Gravekamp C. Direct detection of leptospiral material in human postmortem samples. Res. Microbiol. 2003, 8: 581-586.
  6. Bulach D.M., Zuerner R.L., Wilson P. Genome reduction in Leptospira borgpetersenii reflects limited transmission potential. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2006, 39: 14560-14565.
  7. Cai H.Y., Hornby G., Key D.W. Preliminary study on differentiation of Leptospira grippotyphosa and Leptospira sejroe from other common pathogenic leptospiral serovars in canine urine by polymerase chain reaction assay. J. Vet. Diagn. Invest. 2002, 2: 164-168.
  8. Levett P.N., Morey R.E., Galloway R.L. Detection of pathogenic leptospires by real-time quantitative PCR. J. Med. Microbiol. 2005, 1 : 45-49.
  9. Mérien F., Amouriaux P., Perolat P.J. Polymerase chain reaction for detection of Leptospira spp. in clinical samples. J. Clin. Microbiol. 1992, 9 : 2219-2224.
  10. Millán J., Candela M.G., López-Bao J.V. Leptospirosis in wild and domestic carnivores in natural areas in Andalusia, Spain. Vector Borne Zoonotic Dis. 2009, 9 : 549-554.
  11. Smythe L.D., Smith I.L., Smith G.A. A quantitative PCR (TaqMan) assay for pathogenic Leptospira spp. BMC Infect. Dis. 2002, 8: 2-13.
  12. Turner L.H. Leptospirosis. 3. Maintenance, isolation and demonstration of leptospires. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 1970, 4 : 623-646.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Ваганова А.Н., Стоянова Н.А., Токаревич Н.К., 2011

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах