ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ДНК В ОТДЕЛЬНЫХ КЛЕТКАХ VIBRIO CHOLERAE МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИИ: СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ НЕОДНОРОДНОСТИ В КЛЕТКАХ ШТАММОВ С РАЗЛИЧНЫМИ БИОЛОГИЧЕСКИМИ СВОЙСТВАМИ

Цель . Сравнительный анализ содержания ДНК отдельных клеток штаммов Vibrio cholerae с различными биологическими свойствами. Материалы и методы . Изучали суточные агаровые культуры 2 авирулентных, не имеющих гена холерного токсина, и 2 вирулентных штаммов, а также их субкультуры, полученные путем подращивания на 1% пептонной воде в течение 1, 3 и 5 ч. ДНК убитых бактерий окрашивали смесью бромида этидия и митрамицина. Методом проточной цитофлуориметрии определяли долевое соотношение клеток с низким, промежуточным и высоким относительным содержанием ДНК в условных единицах интенсивности специфической ДНК-флуоресценции. Степень неоднородности клеток исследуемых микробных популяций оценивали по значению коэффициента вариации ДНК гистограмм. Результаты . На уровне больших статистических выборок отдельных клеток V.cholerae зарегистрирован принципиально различный характер реакции исследуемых токсигенных и нетоксигенных штаммов на изменение условий культивирования. Заключение . Популяции клеток токсигенных штаммов V.cholerae, в отличие от нетоксигенных, вероятно, переходят при голодании в «полиплоидное» состояние. Этот феномен может оказаться дифференциальным признаком при определении принадлежности штамма к группе риска (опасности).

проточная цитометрия, содержание ДНК на клетку, биология отдельных клеток