МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА К ГЛИКОПРОТЕИНУ Е1 ВИРУСА КРАСНУХИ


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Получение моноклональных антител (МКА) к гликопротеину Е1 вируса краснухи, оценка иммунохимических свойств и возможности использования флуоресцирующих МКА для быстрой идентификации вируса краснухи. Материалы и методы. Использованы штаммы вируса краснухи С-74 (Москва), вакцинные штаммы «Орлов» (С.-Петербург), Wistar RA 27/3 (США), а также штамм Judith (Германия). Вирусные антигены получали, применяя диплоидные клетки Л-68 и клеточные линии ВНК-21-F и Vero E6. МКА получали общепринятым методом и определяли их изотип. Проводили иммуноблоттинг, ИФА, РТГА и реакцию иммунофлуоресценции. Результаты. Получено 5 МКА: Кх-252.1, Кх-347.2, Кх-183.3, Кх-214.4, Кх-187.5 к антигенам штамма С-74 вируса краснухи. Определён изотип полученных МКА и охарактеризована их иммунореактивность с нативными и денатурированными антигенами других штаммов: «Орлов», Wistar Ra 27/3, Judith. По данным ИФА все МКА имели высокие титры взаимодействия с гликопротеином Е 1 вируса краснухи от 1/1600 до 1/200 000. По данным иммуноблоттинга — только 4 МКА (Кх-252.1, Кх-347.2, Кх-183.3, Кх-214.4). В РТГА МКА ингибировали гемагглютинирующую активность штамма Judith в титре от 1/16 до 1/1024. ФИТЦ коньюгат МКА Кх-347.2 (наиболее чувствительный вариант) позволяет выявлять антиген вируса краснухи в инфицированных клетках Vero E6 через 24 часа с момента инфицирования, а ФИТЦ коньюгаты трёх МКА (Кх-183.3, Кх-214.4, Кх-187.5) — через 72 часа. Заключение. Перспективно использовать ФИТЦ коньюгаты МКА для индикации гликопротеина Е1 вируса краснухи в инфицированных клеточных культурах и назофарингеальных мазках.

Полный текст

МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА К ГЛИКОПРОТЕИНУ Е1 ВИРУСА КРАСНУХИ
×

Об авторах

Ф. Г Нагиева

НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

В. Г Никулина

НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

Е. П Баркова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

А. В Зубков

НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

Н. С Кузьмина

НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

Р. Г Десятскова

НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

А. В Ткаченко

НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова

Т. Н Юнасова

Государственный институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича, Москва

Список литературы

  1. Говорухина М.В. Тихонова Н.Т. Роль лабораторного подтверждения кори и краснухи в период элиминации кори. Эпидемиол. вакцинопроф. 2006, 1 (26): 17-20.
  2. Заргарьянц А.И., Селезнева Т.С., Титова Н.С. Краснуха: современная ситуация. Там же. 2001, 1: 28-31.
  3. Зверев В.В., Десятскова Р.Г., Юминова Н.В. и др. Лабораторная характеристика ослабленных вариантов отечественных штаммов вируса краснухи, адаптированных к куль- туре клеток Vero. Там же. 2008, 4 (41): 46-53.
  4. Лимфоциты. Методы. Дж. Клаус (ред.). М., Мир, 1990.
  5. Bowden D.S., Westaway E.G. Rubella virus: Structural and non-structural proteins. J. Gen. Virol. 1984, 65: 983-943.
  6. Cleveland D.W., Fischer S.G., Kirschner M.W., Laemmli U.K. Peptide mapping by limited proteolysis in sodium dodecyl sulfate and analysis by gel electrophoresis. J.Biol. Chem. 1977, 252: 1102-1106.
  7. Chaye H., Chong P., Tripet B. et.al. Localizationof the virus neutralization and hemagglutinin epitopes of E1 glicoprotein of rubella virus. Virology. 1992, 189(2): 483-492.
  8. Cordoba P., Grutadauria S., Cuffini C., Zaspata M. Neutraliizing monoclonal antibody to the E 1 glicoprotein epitopes of rubella virus mediates virus arrest in Vero cells. Viral. Immunol. 2000, 13 (1): 83-92.
  9. Kennet R.H., McKearn T.J., Bechtol K.B. Monoclonal antibodies. New Jork-London, 1980.
  10. Prince A.M., Horowitz B., Brotman B. et al. Inactivation of hepatitis B and Hulchinson strain non-A, non-B hepatitis viruses by exposure to Tween 80. Vox Sang. 1984, 46:36-43.
  11. Stewat G.L., Parkman P.D., Hopps H.E. et al. Rubella-virus hemagglutination-ingibition tet. New. Engl. J. Med. 1967, 10 (276): 554-557.
  12. Saglio S.D., Henley C.E. Rapid assay kits for Контактная информация: Нагиева Ф.Г., common microbiologic agents. Am. Fam. Physician. USA. 1987, 36: 169-178.
  13. Towbin H., Stachelin T., Gardon J. Electroforetic transfer of protein from polyacrilamide gels to nitrocellulose sheets. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1979, 76: 4350-4354.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Нагиева Ф.Г., Никулина В.Г., Баркова Е.П., Зубков А.В., Кузьмина Н.С., Десятскова Р.Г., Ткаченко А.В., Юнасова Т.Н., 2011

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС77-75442 от 01.04.2019 г.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах