<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE root>
<article xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/" article-type="research-article" dtd-version="1.2" xml:lang="en"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="en">Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology</journal-title><trans-title-group xml:lang="ru"><trans-title>Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn publication-format="print">0372-9311</issn><issn publication-format="electronic">2686-7613</issn><publisher><publisher-name xml:lang="en">Central Research Institute for Epidemiology</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="publisher-id">4639</article-id><article-id pub-id-type="doi">10.36233/0372-9311-316</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="en"><subject>ORIGINAL RESEARCHES</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="ru"><subject>ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="article-type"><subject>Research Article</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title xml:lang="en">Research on the antiviral activity of water-soluble melanin from the pharmaceutical chaga mushroom (Inonotus obliquus) against influenza А virus subtypes H5N1, H3N2 and H1N1pdm09 in experiments in vitro</article-title><trans-title-group xml:lang="ru"><trans-title>Исследование противовирусной активности водорастворимого меланина из аптечной чаги (Inonotus obliquus) в отношении вируса гриппа A субтипов H5N1, H3N2 и H1N1pdm09 в экспериментах in vitro</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0001-9554-4462</contrib-id><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Filippova</surname><given-names>Ekaterina I.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Филиппова</surname><given-names>Екатерина Игоревна</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>researcher, Department of prevention and treatment of especially dangerous infections</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>н.с. отдела профилактики и лечения особо опасных инфекций</p></bio><email>protsenko_ma@vector.nsc.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0002-5146-8979</contrib-id><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Makarevich</surname><given-names>Elena V.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Макаревич</surname><given-names>Елена Викторовна</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>researcher, Department of prevention and treatment of especially dangerous infections</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>н.с. отдела профилактики и лечения особо опасных инфекций</p></bio><email>protsenko_ma@vector.nsc.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0002-1995-7588</contrib-id><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Protsenko</surname><given-names>Maria A.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Проценко</surname><given-names>Мария Анатольевна</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>Cand. Sci. (Biol.), senior researcher, Department of prevention and treatment of especially dangerous infections</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>к.б.н., с.н.с. отдела профилактики и лечения особо опасных инфекций</p></bio><email>protsenko_ma@vector.nsc.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0001-8164-4091</contrib-id><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Mazurkov</surname><given-names>Oleg Y.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Мазурков</surname><given-names>Олег Юрьевич</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>Cand. Sci. (Biol.), senior researcher, Department of prevention and treatment of especially dangerous infections</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>к.б.н., с.н.с. отдела профилактики и лечения особо опасных инфекций</p></bio><email>protsenko_ma@vector.nsc.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0003-4754-5051</contrib-id><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Teplyakova</surname><given-names>Tamara V.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Теплякова</surname><given-names>Тамара Владимировна</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>D. Sci. (Biol.), Professor, leading researcher, Department of Biophysics and Ecological Research</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>д.б.н., профессор, в.н.с. отдела биофизики и экологических исследований</p></bio><email>protsenko_ma@vector.nsc.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0002-1896-2684</contrib-id><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Mazurkova</surname><given-names>Natalya A.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Мазуркова</surname><given-names>Наталья Алексеевна</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>D. Sci. (Biol.), leading researcher, Department of prevention and treatment of especially dangerous infections</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>д.б.н., в.н.с. отдела профилактики и лечения особо опасных инфекций</p></bio><email>protsenko_ma@vector.nsc.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff1"><aff><institution xml:lang="en">State Research Center of Virology and Biotechnology “Vector”</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»</institution></aff></aff-alternatives><pub-date date-type="preprint" iso-8601-date="2023-02-13" publication-format="electronic"><day>13</day><month>02</month><year>2023</year></pub-date><pub-date date-type="pub" iso-8601-date="2023-04-03" publication-format="electronic"><day>03</day><month>04</month><year>2023</year></pub-date><volume>100</volume><issue>1</issue><issue-title xml:lang="en"/><issue-title xml:lang="ru"/><fpage>103</fpage><lpage>109</lpage><history><date date-type="received" iso-8601-date="2023-02-13"><day>13</day><month>02</month><year>2023</year></date><date date-type="accepted" iso-8601-date="2023-02-13"><day>13</day><month>02</month><year>2023</year></date></history><permissions><copyright-statement xml:lang="en">Copyright ©; 2023, Filippova E.I., Makarevich E.V., Protsenko M.A., Mazurkov O.Y., Teplyakova T.V., Mazurkova N.A.</copyright-statement><copyright-statement xml:lang="ru">Copyright ©; 2023, Филиппова Е.И., Макаревич Е.В., Проценко М.А., Мазурков О.Ю., Теплякова Т.В., Мазуркова Н.А.</copyright-statement><copyright-year>2023</copyright-year><copyright-holder xml:lang="en">Filippova E.I., Makarevich E.V., Protsenko M.A., Mazurkov O.Y., Teplyakova T.V., Mazurkova N.A.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="ru">Филиппова Е.И., Макаревич Е.В., Проценко М.А., Мазурков О.Ю., Теплякова Т.В., Мазуркова Н.А.</copyright-holder><ali:free_to_read xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/"/><license><ali:license_ref xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/">https://creativecommons.org/licenses/by/4.0</ali:license_ref></license></permissions><self-uri xlink:href="https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/4639">https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/4639</self-uri><abstract xml:lang="en"><p><bold>Introduction. </bold>Influenza A virus is the cause of epidemics and pandemics that severely affect the health and socioeconomic status of the world's population. The need to develop new methods of etiotropic therapy, and the increasing ability of viruses to counteract the antiviral drugs makes extremely relevant the search for new pharmacologically active substances and the subsequent study of their medicinal properties.</p> <p>The <bold>aim</bold> of the study is to conduct research into the antiviral properties of melanin obtained from the pharmaceutical chaga mushroom in relation to different subtypes of the influenza A virus.</p> <p><bold>Materials and methods.</bold> A sample of water-soluble melanin from Inonotus obliquus obtained by alkaline hydrolysis and dried at 40°C was tested for toxicity and antiviral activity. The commercial anti-influenza drug Tamiflu<sup>®</sup> was used as a reference drug. Statistical processing of the obtained data was carried out according to the Spearman-Kerber method.</p> <p><bold>Results.</bold> Inonotus obliquus melanin (sample 20-24) toxicity markers, such as a maximum tolerable concentration (MTC) of 237.0 µg/mL, and a 50% cytotoxic concentration (CC<sub>50</sub>) of 153,45 µg/mL were established for MDCK cell culture. The assessment of antiviral activity of test sample against three subtypes of the influenza A virus (H5N1, H3N2 and H1N1pdm09) demonstrated a decrease in the infectivity of the influenza virus by 2.5–3.5 lg with 50% virus-inhibiting concentrations (IC<sub>50</sub>) of 1.55–9.52 µg/mL. Based on the obtained values of CC<sub>50</sub> and IC<sub>50</sub>, the selectivity indices (SI) of the sample were calculated, characterizing its prospects for further research.</p> <p><bold>Conclusions.</bold> Melanin obtained from the pharmaceutical chaga mushroom showed the highest activity against the strain of the human pandemic influenza virus A/California/04/2009 (H1N1)pdm09, caused a decrease in its infectivity by 3.5 lg and had an IC<sub>50</sub> of 1.6 µg/ml. The obtained results indicate the prospects for creating an antiviral drug based on Inonotus obliquus melanins against the influenza virus.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="ru"><p><bold>Актуальность.</bold> Вирус гриппа А является причиной возникновения эпидемий и пандемий, наносящих колоссальный вред здоровью и социально-экономическому положению населения. В связи с необходимостью разработки новых методов этиотропной терапии, а также с возрастающей способностью вирусов противодействовать применяемым препаратам поиск новых фармакологически активных веществ и последующее изучение их лекарственных свойств обладает неоспоримой актуальностью.</p> <p><bold>Цель</bold> — изучение противовирусных свойств меланина, полученного из аптечной чаги (<italic>Inonotus obliquus</italic>), в отношении разных субтипов вируса гриппа.</p> <p><bold>Материалы и методы.</bold> Образец водорастворимого меланина <italic>Inonotus obliquus</italic>, полученный методом щелочного гидролиза и высушенный при 40°С, был исследован на токсичность и противовирусную активность. В качестве референс-препарата использован коммерческий противогриппозный препарат Тамифлю<sup>®</sup>. Статистическая обработка полученных данных проведена по методу Спирмена–Кербера.</p> <p><bold>Результаты. </bold>Для культуры клеток MDCK были установлены маркеры токсичности меланина из чаги (образец 20-24), такие как максимально переносимая концентрация, составляющая 237 мкг/мл, а также 50% цитотоксическая концентрация (ЦТД<sub>50</sub>), равная 153,45 мкг/мл. Под действием исследуемого образца в отношении субтипов вируса гриппа А H5N1, H3N2 и H1N1pdm09 обнаружено снижение инфекционности вируса гриппа на 2,5–3,5 lg, а также установлены 50% эффективные дозы (ЭД<sub>50</sub>), составляющие 1,55–9,52 мкг/мл. На основании полученных значений ЦТД<sub>50</sub> и ЭД<sub>50</sub> были рассчитаны химиотерапевтические индексы образца, характеризующие его перспективность для дальнейших исследований.</p> <p><bold>Заключение.</bold> Меланин, полученный из аптечной чаги, проявил наибольшую активность против штамма пандемического вируса гриппа человека A/California/04/2009 (H1N1)pdm09, вызывал снижение его инфекционности на 3,5 lg и обладал ЭД<sub>50</sub>, равной 1,6 мкг/мл. Полученные результаты указывают на перспективность создания противовирусного препарата на основе меланинов из чаги в отношении вируса гриппа.</p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="en"><kwd>melanins</kwd><kwd>agaricales</kwd><kwd>antiviral agents</kwd><kwd>influenza A virus</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>меланин</kwd><kwd>агарикомицеты</kwd><kwd>противовирусное средство</kwd><kwd>вирус гриппа А</kwd></kwd-group><funding-group><award-group><funding-source><institution-wrap><institution xml:lang="ru">ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора</institution></institution-wrap><institution-wrap><institution xml:lang="en">State Research Center for Virology and Biotechnology "Vector"</institution></institution-wrap></funding-source></award-group></funding-group></article-meta></front><body></body><back><ref-list><ref id="B1"><label>1.</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="en">Kiseleva I.V., Larionova N.V., Grigor'eva E.P., Ksenafontov A.D., Farrukh M.A., Rudenko L.G. Salient features of circulating respiratory viruses in the pre- and pandemic influenza and Covid-19 seasons. Infektsiya i immunitet. 2021; 11(6): 1009–19. https://doi.org/10.15789/2220-7619-SFO-1662 (in Russian)</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="ru">Киселева И.В., Ларионова Н.В., Григорьева Е.П., Ксенафонтов А.Д., Фаррух М.А., Руденко Л.Г. Особенности циркуляции респираторных вирусов в пред- и пандемические по гриппу и COVID-19 периоды. Инфекция и иммунитет. 2021; 11(6): 1009–19. https://doi.org/10.15789/2220-7619-SFO-1662</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="B2"><label>2.</label><mixed-citation>Lampejo T. Influenza and antiviral resistance: an overview. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2020; 39(7): 1201–08. https://doi.org/10.1007/s10096-020-03840-9</mixed-citation></ref><ref id="B3"><label>3.</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="en">Zyryanov S.K., Butranova O.I., Gayday D.S., Kryshen' K.L. Pharmacotherapy for acute respiratory infections caused by influenza viruses: current possibilities. Terapevticheskiy arkhiv. 2021; 93(1): 114–24. https://doi.org/10.26442/00403660.2021.01.200551 (in Russian)</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="ru">Зырянов С.К., Бутранова О.И., Гайдай Д.С., Крышень К.Л. Фармакотерапия острых респираторных инфекций, вызванных вирусами гриппа. Терапевтический архив. 2021; 93(1): 114–24. https://doi.org/10.26442/00403660.2021.01.200551</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="B4"><label>4.</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="en">Kosogova T.A. Strains of basidial fungi of the south of Western Siberia – promising producers of biologically active drugs: Diss. Kol'tsovo; 2013. (in Russian)</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="ru">Косогова Т.А. Штаммы базидиальных грибов юга Западной Сибири — перспективные продуценты биологически активных препаратов: дисс. … канд. биол. наук. Кольцово; 2013.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="B5"><label>5.</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="en">Teplyakova T.V., Kosogova T.A. Higher fungi of Western Siberia — Promising Objects for Biotechnology of Medicines [Vysshie griby Zapadnoy Sibiri — perspektivnye ob"ekty dlya biotekhnologii lekarstvennykh preparatov]. Novosibirsk; 2014. (in Russian)</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="ru">Теплякова Т.В., Косогова Т.А. Высшие грибы Западной Сибири — перспективные объекты для биотехнологии лекарственных препаратов. Новосибирск; 2014.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="B6"><label>6.</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="en">Teplyakova T.V., Il'icheva T.N., Markovich N.A. Future developing medicines against influenza on the basis of medicinal mushrooms (review). Prikladnaya biokhimiya i mikrobiologiya. 2020; (5): 409–18. https://doi.org/10.31857/S0555109920050141 (in Russian)</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="ru">Теплякова Т.В., Ильичева Т.Н., Маркович Н.А. Перспективы создания препаратов против гриппа на основе лекарственных грибов (обзор). Прикладная биохимия и микробиология. 2020; 56(5): 409–18. https://doi.org/10.31857/S0555109920050141</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="B7"><label>7.</label><mixed-citation>Teplyakova T.V., Pyankov O.V., Safatov A.S., Ovchinnikova A.S., Kosogova T.A., Skarnovich M.O., et al. Water extract of the chaga medicinal mushroom, Inonotus obliquus (Agaricomycetes), inhibits SARS-CoV-2 replication in Vero E6 and Vero cell culture experiments. Int. J. Med. Mushrooms. 2022; 24(2): 23–30. https://doi.org/10.1615/IntJMedMushrooms.2021042012</mixed-citation></ref><ref id="B8"><label>8.</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="en">Sachs L. Statistische Auswertungsmethoden. Berlin: Springer-Verlag; 1972.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="ru">Закс Л. Статистическое оценивание. Пер. с нем. М.: Статистика; 1976.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="B9"><label>9.</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="en">Khalafyan A.A. Statistica 6. Statistical Data Analysis [Statistica 6. Statisticheskiy analiz dannykh]. Moscow: Binom-Press; 2010. (in Russian)</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="ru">Халафян А.А. Statistica 6. Статистический анализ данных. М.: Бином-Пресс; 2010.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="B10"><label>10.</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="en">Khabriev R.U., ed. Guidelines for Experimental (Preclinical) Study of New Pharmacological Substances [Rukovodstvo po eksperimental'nomu (doklinicheskomu) izucheniyu novykh farmakologicheskikh veshchestv]. Moscow: Meditsina; 2005. (in Russian)</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="ru">Хабриев Р.У., ред. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: Медицина; 2005.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="B11"><label>11.</label><mixed-citation>Paragas J., Whitehouse C.A., Endy T.P., Bray M. A simple assay for determining antiviral activity against Crimean-Congo hemorrhagic fever virus. Antiviral. Res. 2004; 62(1): 21–5. https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2003.11.006</mixed-citation></ref><ref id="B12"><label>12.</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="en">Teplyakova T.V., Kosogova T.A., Il'icheva T.N., Grazhdantseva A.A., Danilenko E.D., Lebedev L.D., et al. The strain of the basidial fungus Inonotus obliquus is a producer of melanin pigment with antiviral and antitumor activity. Patent RF No. 2716590C1; 2020. (in Russian)</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="ru">Теплякова Т.В., Косогова Т.А., Ильичева Т.Н., Гражданцева А.А., Даниленко Е.Д., Лебедев Л.Д. и др. Штамм базидиального гриба Inonotus obliquus — продуцент пигмента меланина, обладающего противовирусной и противоопухолевой активностью. Патент РФ № 2716590С1; 2020.</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list></back></article>
