Aim. Study the influence of staphylococcus vaccine on functional activity of antigen-presenting cells. Materials and methods. Mice intraperitoneally received 500 ^g of «Staphylovac» vaccine. Phagocytic activity of peritoneal macrophages against Staphylococcus aureus 1991 was determined in animals at various time intervals. Phagocytic index (PI) and phagocytic number (PN) in smears made at 30 and 60 minutes of incubation were calculated. Dendritic cells (DC) were obtained from bone marrow precursors during cultivation with 20 ng/ml GM-CSF and 20 ng/ml IL-4 (BioSource International Inc., Belgium). At day 6 of incubation staphylococcus vaccine (50 ^g/ml) was added to immature cells for induction of DC maturation. DC phenotype evaluation was carried out by flow cytometry using monoclonal antibodies against cell antigens (Beckman Culter, USA). Results. PI at 30 and 60 minutes of incubation increased by 0.12 - 1.4 times and 1.11 - 1.52 times, respectively, compared with control. PN at 30 minutes of incubation of cells with microbial suspension increased from 8.6 to 11.4% against 5.9% in control, at 60 minutes of incubation - from 7.7 to 8.1% against 5.1% in control. In DC culture during their incubation with the vaccine, content of cells with expression of intercellular adhesion marker CD38, antigen presenting marker MHCII and DC terminal differentiation marker CD83 increased. Expression of CD34 and CD14 was also noted, that may give evidence on partial direction of cell differentiation to macrophages. Conclusion. «Staphylovac» vaccine during intraperitoneal administration to mice had activating influence on functional activity of antigen-presenting cells and peritoneal macrophages.
Цель. Изучение влияния стафилококковой вакцины на функциональную активность антигенпрезентирующих клеток. Материалы и методы. Мышам вводили по 500 мкг вну-трибрюшинно вакцину «Стафиловак». Через различные интервалы времени у животных определяли фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов по отношению к Staphylococcus aureus 1991. Рассчитывали фагоцитарный индекс (ФИ) и фагоцитарное число (ФЧ) в мазках, сделанных после 30 и 60 мин инкубации. Дендритные клетки (ДК) получали из костномозговых предшественников при культивировании с 20 нг/мл GM-CSF и 20 нг/мл IL-4 (BioSource International Inc., Бельгия). На 6 сутки инкубации к незрелым клеткам добавляли стафилококковую вакцину (50 мкг/мл) для индукции созревания ДК. Оценку фенотипа ДК осуществляли методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител против клеточных антигенов (Beckman Culter, США). Результаты. ФИ при 30 и 60 мин инкубации повышался в 0,12 - 1,4 раза и 1,11 - 1,52 раза соответственно по сравнению с контролем. ФЧ при 30 мин инкубации клеток с микробной суспензией возрастало с 8,6 до 11,4% против 5,9% в контроле, при 60 мин инкубации - с 7.7 до 8,1% против 5,1% в контроле. В культуре ДК при инкубации их с вакциной увеличивалось содержание клеток с экспрессией маркеров межклеточной адгезии CD38, маркера антигенного представления MHCII и маркера терминальной дифференцировки ДК CD83. Также отмечена экспрессия СD34 и CD14, что может свидетельствовать о частичной направленности дифференцировки клеток в сторону макрофагов. Заключение. Вакцина «Стафиловак» при внутрибрюшинном введении мышам оказывала активирующее влияние на функциональную активность антигенпрезентирующих клеток и перитонеальных макрофагов.