Journal of microbiology, epidemiology and immunobiologyJournal of microbiology, epidemiology and immunobiologyЖурнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии0372-93112686-7613Central Research Institute for Epidemiology13875ArticlesСтатьиShort CommunicationFEATURES OF DYNAMICS OF GROWTH AND FORMATION OF UNCULTIVABLE FORMS IN LACTOCOCCUS LACTISОСОБЕННОСТИ ДИНАМИКИ РОСТА И ОБРАЗОВАНИЯ НЕКУЛЬТИВИРУЕМЫХ ФОРМ У LACTOCOCCUS LACTISPakhomovYu. DПахомовЮ. ДBlinkovaL. PБлинковаЛ. ПDmitrievaO. VДмитриеваО. ВStoyanovaL. GСтояноваЛ. ГMechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, RussiaНИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, МоскваLomonosov Moscow State University, RussiaМосковский государственный университет им. М.В.Ломоносова15062013903NO3 (2013)№3 (2013)929609062023Copyright ©; 2013, Pakhomov Y.D., Blinkova L.P., Dmitrieva O.V., Stoyanova L.G.Copyright ©; 2013, Пахомов Ю.Д., Блинкова Л.П., Дмитриева О.В., Стоянова Л.Г.2013Pakhomov Y.D., Blinkova L.P., Dmitrieva O.V., Stoyanova L.G.Пахомов Ю.Д., Блинкова Л.П., Дмитриева О.В., Стоянова Л.Г.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/13875

Aim. Study strain differences in dynamics of viability and formation of uncultivable forms of Lactococcus lactis. Materials and methods. 3 strains of L. lactis - MSU, 729 and F116 were used in the study. Uncultivable forms were obtained by prolonged incubation of cultures of lactococcus in synthetic medium under conditions of carbohydrate deprivation. Medium was inoculated by cultures grown in Elliker broth, washed by saline and without washing. The populations obtained were incubated at 30°C without mixing for 4 months. Samples of cultures were studied periodically for viability and cultivability. Results. In cultures obtained by using unwashed inoculate active growth of quantity of bacteria in the first days after seeding was noted. Speed of formation of uncultivable forms is the faster the higher the level of metabolic activity of cells in the population. A fact of phenotypic dissociation in lactococcus culture under stress was detected. Conclusion. The speed of formation of uncultivable forms of L. lactis, as well as stability of their existence may probably depend on the strain, cultivation conditions and metabolic activity of cells in the population.

Цель. Изучение штаммовых различий динамики жизнеспособности и образования некультивируемых форм Lactococcus lactis. Материалы и методы. В работе использованы 3 штамма L. lactis МГУ, 729 и F116. Некультивируемые формы получали при длительной инкубации культур лактококков в синтетической среде в условиях углеводного голодания. Среду инокулировали культурами, выращенными на бульоне Элликера, отмытыми физраствором и без отмывки. Полученные популяции инкубировали при 30°С без перемешивания в течение 4 месяцев. Пробы культур периодически исследовали на жизнеспособность и высеваемость. Результаты. В культурах, полученных с использованием неотмытого инокулята, наблюдался активный рост численности бактерий в первые дни после посева. Показано, что скорость образования некультивируемых форм тем быстрее, чем выше уровень метаболической активности клеток в популяции. Выявлен факт фенотипической диссоциации в культуре лактококков в стрессовых условиях. Заключение. Скорость образования некультивируемых форм L. lactis, а также стабильность их существования, вероятно, зависит от штамма, условий культивирования и метаболической активности клеток в популяции.

Lactococcus lactisuncultivable formsviabilitystrainscarbohydrate deprivationнекультивируемые формыжизнеспособностьштаммыуглеводное голоданиеБлинкова Л.П., Пахомов Ю.Д., Стоянова Л.Г. Свойства некультивируемых и покоящихся форм микроорганизмов. Иммунопатол. аллергол. инфектол. 2010, 3: 67-76.Вахитов Т.Я. Регуляторные функции бактериальных экзометаболитов на внутрипопуляционном и межвидовом уровнях. Автореф. дис. д-ра. биол. наук. Санкт-Петербург, 2007.Asakura H., Kawamoto K., Haishima Y Differential expression of the outer membrane protein W (OmpW) stress response in enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7 corresponds to the viable but non-culturable state. Res. Microbiol. 2008, 159: 709-717.Chen S.Y., Jane WN., Chen YS. et al. Morphological changes of Vibrio parahaemolyticus under cold and starvation stresses. Int. J. Food Microbiol. 2009, 129: 157-165.Day A.P., Oliver J.D. Changes in membrane fatty acid composition during entry of Vibrio vulnificus into the viable but nonculturable state. J. Microbiol. 2004, 42: 69-73.Ganesan B., Mark R., Stuart M.R., et al. Carbohydrate starvation causes a metabolically active but nonculturable state in Lactococcus lactis. Appl. Environ. Microbiol. 2007, 73 (8): 2498512.Lahtinen S.J., Ahokoski H., Reinikainen J.P. Degradation of16S rRNA and attributes ofviability of viable but nonculturable probiotic bacteria. Lett. Appl. Microbiol. 2008, 46: 693-698.Lai C.J., Chen SY, Lin I.H. et al. Change of protein profiles in the induction of the viable but nonculturable state of Vibrio parahaemolyticus. Int. J. Food Microbiol. 2009, 135: 118-124.Lleo' M.M., Pierobon S., Tafi M.C. mRNA detection by reverse transcription-PCR for monitoring viability over time in an Enterococcus faecalis viable but nonculturable population maintained in a laboratory microcosm. Appl. Environ. Microbiol. 2000, 66: 4564-4567.Oliver J.D. Recent findings on the viable but nonculturable state in pathogenic bacteria. FEMS Microbiol. Rev. 2010, 34: 415-425.Tholozan J.L., Cappelier J.M., Tissier J.P. Physiological characterization of viable-but-nonculturable Campylobacter jejuni cells. Appl. Environ. Microbiol. 1999, 65: 1110-1116.