Aim. Determine subpopulation composition of blood lymphocytes and the level of expression of TLR2 and TLR9 by epithelial cells of cervical canal mucous membrane in women of reproductive age with inflammatory disease of small pelvis organs (IDSPO) at exacerbation stage and remission period. Materials and methods. Clinical-laboratory and gynecological examination of 105 women was carried out and 3 groups were formed based on the results: patients at IDSPO exacerbation stage; patients at remission stage; clinically healthy women. By using real time PCR, TLR2, TLR9 gene expression levels were determined in epithelial cells of cervical canal mucous membrane in women of all the 3 groups. Subpopulation composition of blood lymphocytes was determined by flow cytofluorimetry by using monoclonal antibodies with CD45+ CD3+ -T-cell, CD45+ CD3+ CD4+ -Т-helper, CD45+, CD3 + , CD8+ -Т-suppressors-cytotoxic killers, CD45 + , CD3-, CD16+, CD56+ natural killers, CD45+, CD3-, CD19+ -В-lymphocytes. Immune fluorescence reaction evaluation was carried out in flow cytofluorimeter Cytomics FC 500 (Becton Coulter, USA). Results. The level of expression of TLR2 gene in the studied groups of patients was established not to differ significantly from parameters in the comparison groups, however it should be noted that this parameter in women with IDSPO at exacerbation stage (causative agents of the infectious process - ureaplasma, staphylococcus, candida) was somewhat higher than in the comparison group. Significantly high level of TLR9 gene expression in cervical canal epithelial cells was detected to correlate with the presence of infectious causative agents. In the group of women with exacerbation of the infectious process the expression of TLR9 was 14.5 times higher compared with the group of women without IDSPO. Among groups of women with IDSPO significant differences in relation to control group in relative and absolute levels of CD3 + T-lymphocytes; CD4+ T-helpers; CD8+ cytotoxic killer T-suppressors, B-lymphocytes compared with the same parameters in clinically healthy women were not detected. Conclusion. The increase of TLR9 gene expression level in cervical canal cells of women with IDSPO may serve as an additional diagnostic feature of the presence and degree of severity of the disease.
Цель. Определить субпопуляционный состав лимфоцитов крови и уровень экспрессии генов TLR2 и TLR9 эпителиальными клетками слизистой оболочки цервикального канала у женщин репродуктивного возраста с воспалительными заболеваниями органов малого таза (ВЗОМТ) в стадии обострения и в период ремиссии. Материалы и методы. Проведено клинико-лабораторное и гинекологическое обследование 105 женщин, и по полученным результатам сформированы 3 группы: пациентки в стадии обострения ВЗОМТ; пациентки в стадии ремиссии; клинически здоровые женщины. С помощью ПЦР в режиме реального времени определяли уровень экспрессии генов TLR2, TLR9 в эпителиальных клетках слизистой оболочки цервикального канала у женщин всех 3 групп. Субпопуляционный состав лимфоцитов крови определяли методом проточной цитофлюориметрии с использованием моноклональных антител с маркерами CD45+ CD 3+ - T-клеток, CD45+ CD3+ CD4+ - Т-хелперов, CD45+, CD3+, CD8+ - Т-супрессоров-цитотоксических киллеров, CD45+, CD3-, CD16+, CD56+ - натуральных киллеров, CD45+, CD3-, CD19+ - В-лимфоцитов. Учет реакции иммунофлуоресценции проводили на проточном цитоф-луориметре «CYTOMICS FC 500» (Becton Coulter,USA). Результаты. Установлено, что уровень экспрессии гена TLR2 в исследуемых группах больных статистически значимо не отличался от показателей в группе сравнения, хотя следует отметить, что данный показатель у женщин с ВЗОМТ в стадии обострения (возбудители инфекционного процесса - уреаплазма, стафилококк, кандида) был несколько выше, чем в группе сравнения. Выявлено, что достоверно высокий уровень экспрессия гена TLR9 в эпителиальных клетках слизистой цервикального канала коррелировал с наличием инфекционных возбудителей. В группе женщин с обострением инфекционного процесса экспрессия гена TLR9 была увеличена в 14,5 раза по сравнению с группой женщин без ВЗОМТ. В группах женщин с ВЗОМТ не было выявлено достоверных различий по отношению к группе контроля в относительном и абсолютном уровне Т-лимфоцитов CD3+; Т-хелперов CD4+, Т-супрессо-ров CD8 + цитотоксических киллеров. Содержание В-лимфоцитов достоверно не различалось во всех группах. Заключение. Повышение уровня экспрессии гена TLR9 в клетках цервикального канала женщин с ВЗОМТ может служить дополнительным диагностическим признаком наличия и степени выраженности заболевания.