Journal of microbiology, epidemiology and immunobiologyJournal of microbiology, epidemiology and immunobiologyЖурнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии0372-93112686-7613Central Research Institute for Epidemiology13821ArticlesСтатьиResearch ArticleCIRCULATING IMMUNE COMPLEXES AS A DEPOT OF CONSERVATION OF MYCOPLASMA CELL COMPONENTSЦИРКУЛИРУЮЩИЕ ИММУННЫЕ КОМПЛЕКСЫ КАК ДЕПО СОХРАНЕНИЯ КЛЕТОЧНЫХ КОМПОНЕНТОВ МИКОПЛАЗМGorinaL. GГоринаЛ. ГRakovskayaI. VРаковскаяИ. ВBarkhatovaO. IБархатоваО. ИGoncharovaS. AГончароваС. АLevinaG. AЛевинаГ. АKrylovaN. AКрыловаН. АGamaleya Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Moscow, RussiaНИИ эпидемиологии и микроиологии им. Н.Ф.Гамалеи, МоскваSechenov First Moscow State Medical University, RussiaПервый Московский государственный медицинский университет им. И.М.Сеченова15042013902NO2 (2013)№2 (2013)748209062023Copyright ©; 2013, Gorina L.G., Rakovskaya I.V., Barkhatova O.I., Goncharova S.A., Levina G.A., Krylova N.A.Copyright ©; 2013, Горина Л.Г., Раковская И.В., Бархатова О.И., Гончарова С.А., Левина Г.А., Крылова Н.А.2013Gorina L.G., Rakovskaya I.V., Barkhatova O.I., Goncharova S.A., Levina G.A., Krylova N.A.Горина Л.Г., Раковская И.В., Бархатова О.И., Гончарова С.А., Левина Г.А., Крылова Н.А.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/13821

Aim. Study the possibility of prolonged conservation in macroorganism of antigens, mycoplasma cell DNA and live pathogen cells as part of CIC against the background of persisting antigen biostructures. Materials and methods. Aggregate-hemagglutination, direct immunofluorescence reactions and PCR method were used to determine antigens and DNA. Circulating immune complexes from blood sera samples were isolated by M. Digeon et al., mycoplasma isolation from CIC was carried out in SP-4 medium, species identity of the isolated mini-colonies was confirmed by real-time PCR method. Results. In patients with urogenital and respiratory pathology the frequency of detection of Мycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma pneumoniae in free state was 63.3, 53.1 and 80.82% of cases, respectively. Specific CIC in patients with verified respiratory mycoplasmosis 1 month after the onset of the disease were registered in patients with severe course of the disease, bronchitis and diseases of upper respiratory tract - in 92.5, 74.7 and 25.7% of cases, respectively. In children, bronchial asthma patients the frequency of detection of antigens and DNA of M. pneumoniae cells in free state was 72.6 and 12.33%, as part of CIC - in 60.27 and 43.8% of cases, respectively. Antigens and DNA of М. hominis in blood of this group of patients were detected in 32.9 and 26.02%, as part of CIC - in 53.42 and 52.05% of cases, respectively. During repeated examination of 12 children after etiotropic therapy execution (generally in 1.5 - 6 months) in 75% of cases antigens of both M. pneumoniae and М. hominis were detected in free state and as part of CIC. DNA of cells of these mycoplasma species were detected in 20 and 33%, as part of CIC - in 41.6 and 50% of cases, respectively. In 5 patients after 6 months (after 1 year in 1 case) mycoplasma antigens and DNA were identified in CIC or in blood sera. During cultivation of CIC components precipitated from 5 blood samples of patients of this group containing М. hominis DNA, culture of М. hominis mini-colonies were isolated in 4 cases. Conclusion. The possibility of prolonged persistence of antigens, DNA and whole mycoplasma cells in both free state and as part of CIC in patients with respiratory and urogenital pathology was shown. CIC are thus a peculiar depot, a place of conservation of not only various mycoplasma cell components, but also live cells.

Цель. Изучение возможности длительного сохранения в макроорганизме антигенов, ДНК клеток микоплазм и живых клеток патогена в составе ЦИК на фоне персистирующих антигенных биоструктур. Материалы и методы. Для определения антигенов и ДНК использовали реакции агрегат-гемагглютинации, прямой иммунофлюоресценции и метод ПЦР. Циркулирующие иммунные комплексы из проб сыворотки крови выделяли по M.Digeon et al., выделение микоплазм из ЦИК осуществляли на среде SP-4, видовую идентичность выделенных мини-колоний подтверждали методом ПЦР в реальном времени. Результаты. У больных с урогенитальной и респираторной патологией частота обнаружения антигенов Мycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma pneumoniae в свободном состоянии составила 63,3; 53,1 и 80,82% случаев соответственно. Специфические ЦИК у больных с верифицированным респираторным микоплазмозом через месяц от начала заболевания регистрировали у больных с тяжелым течением заболевания, при бронхитах и при заболеваниях верхних дыхательных путей - в 92,5; 74,7 и 25,7 % случаев соответственно. У детей, больных бронхиальной астмой, частота обнаружения антигенов и ДНК клеток M.pneumoniae в свободном состоянии составила 72,6 и 12,33%, в составе ЦИК - в 60,27 и в 43,8 случаев соответственно. Антигены и ДНК М.hominis в крови в этой группе больных были выявлены в 32,9 и 26,02% , в составе ЦИК - в 53,42 и 52,05% случаев соответственно. При повторном обследовании 12 детей после проведения этиотропного лечения (в основном, через 1,5-6 месяцев) в 75% случаев были обнаружены как антигены M. pneumoniae , так и антигены М. hominis в свободном состоянии и в составе ЦИК. ДНК клеток этих видов микоплазм выявили в 20 и 33% , в составе ЦИК-в 41,6 и 50% случаев соответственно. У 5 больных через 6 месяцев (в одном случае через 1 год) ДНК и антигены микоплазм были идентифицированы в ЦИК или в сыворотке крови. При культивировании компонентов ЦИК, преципитированных из 5 образцов крови этой группы больных, содержащих ДНК М. hominis, в 4 случаях выделили культуру мини-колоний М. hominis. Заключение. Показана возможность длительной персистенции антигенов, ДНК и целых клеток микоплазм как в свободном состоянии, так и в составе ЦИК у больных с респираторной и урогенитальной патологией. Таким образом, ЦИК являются своеобразным депо, местом сохранения не только различных клеточных компонентов микоплазм, но и живых клеток.

mycoplasmaureaplasmaantigensCICDNAurogenital and respiratory infectionsмикоплазмыуреаплазмаантигеныЦИКДНКурогенитальная и респираторная инфекцииБахарева И.В., Кузнецов П.А., Романовская В.В. Современные теории патогенеза бактериального вагиноза. Лечение и профилактика. 2012, 1 (2): 61-64.Горина Л.Г., Гончарова С.А., Игумнов А.В. Лабораторная диагностика микоплазмозов человека. Вестник акад. мед. наук СССР. 1991, 6: 44-47.Горина Л.Г., Гончарова С.А. Раковская И.В. и др. Частота обнаружения антигенов микоплазм в свободном состоянии и в составе циркулирующих иммунных комплексов у детей с бронхиальной астмой. Журн. микробиол. 2006, 4: 85-88.Горина Л.Г., Раковская И.В., Бархатова О.И. и др. Сохранение антигенов и ДНК урогенитальных микоплазм в составе циркулирующих иммунных комплексов. Журн. микробиол. 2009, 4: 85-88.Горина Л.Г., Шершнева Н.Н., Балабанов Д.Н. и др. Персистенция микоплазм при респираторных и урогенитальных инфекциях. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2008, 6: 41-44.Дорощенко Н.Э., Кирюхина Н.В. Роль внутриклеточных микроорганизмов вЖМЭИ 2 № 5183 этиологии инфекционно-воспалительных заболеваний лор-органов. Вестник МЕДСИ, 2009, 4: 54-62.Раковская И.В., Бархатова О.И., Балабанов Д.Н. и др. Длительность сохранения жизнеспособных клеток ДНК и антигенов Mycoplasma hominis в сыворотке крови человека при 37°С. Клинич. лаб. диагностика. 2008, 11: 40-42.Раковская И. В., Бархатова О. И., Гамова Н. А. и др. Нетипичные формы микоплазм в организме зараженных ими людей. Клинич. лаб. диагностика. 2011, 12: 35-38.Раковская И.И., Горина Л.Г., Бархатова О.И. Персистенция микоплазм, сохранение их антигенов и ДНК в органах инфицированных животных. Журн. микробиол.2009,5:20-25.Селиверстова Н.А., Раковская И.В., Горина Л.Г. и др. Особенности течения и лечения бронхиальной астмы, ассоциированной с микоплазменной инфекцией. Вопросы практ. педиатрии. 2008, 3 (1): 26-29.Хулуп Г.Я., Василевский И.В., Качан Г.Л. и др. Роль микоплазменой инфекции в возникновении и течении заболеваний органов дыхания у детей и подростков. М., Медицина, 2007.Чернов В. М., Чернова О. А., Горшков О. В. и др. Адаптация Mycoplasma gallisepticum к неблагоприятным условиям роста, изменение морфологических и физиологических свойств. Микробиология. 2008, 77 (6): 777-781.Чучалин А.Г., ОспельниковаТ.П., Осипова Г.Л. и др. Роль респираторных инфекций в обострениях бронхиальной астмы. Пульмонология. 2007, 5: 14-19.Шершнева Н.Н, Горина Л.Г. Разработка иммуноферментной тест-системы для выявления антигенов Mycoplasma hominis и Mycoplasma pneumoniae. Российский иммунол. журн. 2008, 2 (11): 420-426.Garcia C., Ugalde E., Monteagudo I. et al. Isolation of Mycoplasma hominis in critically ill patients with pulmonary infections: clinical and microbiological analysis in an intensive care unit. Intensive Care Med. 2007, 33: 143-147.Martin R. J., Kraft M., Chu H.W. et al. A link between chronic asthma and chronic infection. J. Allergy. Clin. Immunol. 2001, 107: 595-601.Mizutani Hiroko, Mizutani Hiromishi. Circulating immune complexes in patients with Mycoplasma pneumoniae. Ann. Rev. Respir. Dis. 1984, 130: 627-629.Mufson M.A. Mycoplasma hominis: a review of its role as a respiratory tract pathogen of humans. Sexually Transmitted Dis. 1983, 10: 335-340.Withcomb R. Culture media for spiroplasmas. In: Methods of Mycoplasmology. NY, Academic Press, 1983.