Journal of microbiology, epidemiology and immunobiologyJournal of microbiology, epidemiology and immunobiologyЖурнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии0372-93112686-7613Central Research Institute for Epidemiology13807ArticlesСтатьиResearch ArticleOPTIMIZATION OF CONDITIONS OF QUANTITATIVE EVALUATION OF ARGENTINE HEMORRHAGIC FEVER CAUSATIVE AGENTОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ОЦЕНКИ ВОЗБУДИТЕЛЯ АРГЕНТИНСКОЙ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИSyromyatnikovaS. IСыромятниковаИ. IPantyukhovV. BПантюховВ. БShatokhinaI. VШатохинаИ. ВMarkinV. AМаркинВ. АPirozhkovA. PПирожковА. ПTimofeevM. AТимофеевМ. АSizikovaT. EСизиковаТ. ЕRymyantsevaI. GРумянцеваИ. ГBorisevichS. VБорисевичС. ВResearch Scientific Centre of the 33rd Central Research Testing Institute of the Ministry of Defense of the Russian Federation, Sergiev Posad, Moscow Region, RussiaНИЦ 33 Центрального научно-исследовательского испытательного института МО РФ, Сергиев Посад, Московская обл15042013902NO2 (2013)№2 (2013)515509062023Copyright ©; 2013, Syromyatnikova S.I., Pantyukhov V.B., Shatokhina I.V., Markin V.A., Pirozhkov A.P., Timofeev M.A., Sizikova T.E., Rymyantseva I.G., Borisevich S.V.Copyright ©; 2013, Сыромятникова И.I., Пантюхов В.Б., Шатохина И.В., Маркин В.А., Пирожков А.П., Тимофеев М.А., Сизикова Т.Е., Румянцева И.Г., Борисевич С.В.2013Syromyatnikova S.I., Pantyukhov V.B., Shatokhina I.V., Markin V.A., Pirozhkov A.P., Timofeev M.A., Sizikova T.E., Rymyantseva I.G., Borisevich S.V.Сыромятникова И.I., Пантюхов В.Б., Шатохина И.В., Маркин В.А., Пирожков А.П., Тимофеев М.А., Сизикова Т.Е., Румянцева И.Г., Борисевич С.В.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/13807

Aim. Optimization of conditions of quantitative evaluation of Argentine hemorrhagic fever causative agent. Materials and methods. Junin virus (XJ P37 strain) was obtained from National collection of viral hemorrhagic fever causative agents of the 1st pathogenicity group of the 33 rd Central Research Testing Institute. Junin virus (XJ P37 strain) culture with biological activity of 5.2 lg PFUxml -1 was used in the experiments. Vero B, 6619-1(D) and GMK-AH-1(D) were obtained from collection of cell culture of the Research Scientific Centre of the 33rd Central Research Testing Institute. Calculation of biological activity of Junin virus during titration in cell cultures was carried out by Kerber method with modification by I.P. Ashmarin. Results. During incubation for 4 - 7 days after the infection of cell monolayer the determined biological activity was 4.4 - 6.4 lg PFUxml -1; the size of the formed negative colonies - (1.5+0.5) mm. Conclusion. The conditions of quantitative evaluation of Argentine hemorrhagic fever were optimized by negative colonies method (using 5 - 7 day Vero B cell culture monolayer with staining of monolayer on day 5 of secondary incubation, recording of results at day 7 after the infection).

Цель. Оптимизация условий количественной оценки возбудителя Аргентинской геморрагической лихорадки. Материалы и методы. Вирус Хунин (штамм XJ P37) получен из Национальной коллекции возбудителей вирусных геморрагических лихорадок I группы патогенности 33 ЦНИИИ. В опытах была использована культура вируса Хунин (штамм XJ P37) с биологической активностью 5,2 lg БОЕхмл -1. Культуры клеток Vero B, 6619-1(Д) и GMK-AH-1^) получены из коллекции культур клеток НИЦ 33 ЦНИИИ. Расчет биологической активности вируса Хунин при титровании на культурах клеток проводили методом Кербера в модификации И.П. Ашмарина. Результаты. При инкубировании в течение 4 - 7 суток после инфицирования клеточного монослоя определяемая биологическая активность вируса Хунин составляла от 4,4 до 6,4 lg БОЕхмл -1; размер образуемых негативных колоний - (1,5±0,5) мм. Заключение. Оптимизированы условия количественной оценки возбудителя Аргентинской геморрагической лихорадки методом негативных колоний (использование пяти-семисуточного монослоя культуры клеток Vero В, покраска монослоя на пятые сутки вторичного инкубирования, учет результатов на седьмые сутки от момента инфицирования).

Junin virusArgentine hemorrhagic fevercell culturetitrationagar coatingвирус ХунинАргентинская геморрагическая лихорадкакультура клетоктитрованиеагаровое покрытиеАшмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л., Гос. изд. мед. лит., 1962.Маркин В.А., Пантюхов В.Б., Марков В.И., Бондарев В.П. Аргентинская геморрагическая лихорадка. Журн. микробиол. 2012, 2: 78-87.Маркин В.А., Марков В.И. Вирусные геморрагические лихорадки - эволюция эпидемического потенциала. Журн. микробиол. 2002, 2: 91-98.Мельникова О.В., Титенко А.М., Андаев Е.И. Санитарная охрана территории от завоза и распространения особо опасных вирусных инфекций. Аргентинская и Боливийская геморрагические лихорадки. Пробл. особо опасных инф. 2010, 104 (2): 29-34.Ambrossio A.M., Enria D.A. Junin virus isolation from lymphomononuclear cells of patients wich Argentine hemorrhagic fever. Intervirology. 1986, 25 (20): 97-102.Bushar G., Sagripanti J.L. Method for improving accuracy of virus titration: Standardization of plague assay for Junin virus. J. Virol. Meth. 1990, 30: 99-108.Lascano E.F., Birria M.L. Diagnosis of Junin virus in cell cultures by immunoperoxi-dase staining. Arch. Virol. 1981, 70 (1): 79-82.Viral hemorrhagic fevers: Current, comprehensive information on pathogenesis, microbiology, epidemiology, diagnosis, treatment and prophylaxis. CDC: 2004 CTDRAP / JDSA. URL: http://www.idsociety.org. (дата обращения: 20.05.12).