Journal of microbiology, epidemiology and immunobiologyJournal of microbiology, epidemiology and immunobiologyЖурнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии0372-93112686-7613Central Research Institute for Epidemiology13792ArticlesСтатьиResearch ArticleSTUDY OF PROTECTIVE ACTIVITY OF STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE PROTEIN-CONTAINING ANTIGEN COMPLEX IN HOMOLOGOUS SYSTEMИЗУЧЕНИЕ ПРОТЕКТИВНОЙ АКТИВНОСТИ БЕЛОКСОДЕРЖАЩЕГО КОМПЛЕКСА АНТИГЕНОВ STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE В ГОМОЛОГИЧНОЙ СИСТЕМЕVorobyevD. SВоробьевД. СSemenovaI. BСеменоваИ. БVolokhYu. VВолохЮ. ВKudryashovA. VКудряшовА. ВMarkovaM. EМарковаМ. ЕRomanenkoE. EРоманенкоЭ. ЕBaturoA. PБатуроА. ПMikhaylovaN. AМихайловаН. АMechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, RussiaНИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва15022013901NO1 (2013)№1 (2013)212609062023Copyright ©; 2013, Vorobyev D.S., Semenova I.B., Volokh Y.V., Kudryashov A.V., Markova M.E., Romanenko E.E., Baturo A.P., Mikhaylova N.A.Copyright ©; 2013, Воробьев Д.С., Семенова И.Б., Волох Ю.В., Кудряшов А.В., Маркова М.Е., Романенко Э.Е., Батуро А.П., Михайлова Н.А.2013Vorobyev D.S., Semenova I.B., Volokh Y.V., Kudryashov A.V., Markova M.E., Romanenko E.E., Baturo A.P., Mikhaylova N.A.Воробьев Д.С., Семенова И.Б., Волох Ю.В., Кудряшов А.В., Маркова М.Е., Романенко Э.Е., Батуро А.П., Михайлова Н.А.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/13792

Aim. Study protective activity of S. pneumoniae protein-containing antigen complex obtained from T3No.3 strain against infection by homologous pneumococcus strain. Materials and methods. S. pneumoniae T3No.3 (serotype 3) strain obtained from collection of pneumococcus strains of Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera was used in the study. S. pneumoniae protein-containing antigen complex was isolated by precipitation by 2 volumes of acetone of supernatant fraction of cultural medium used for pneumococcus cultivation. Molecular mass of proteins contained in S. pneumoniae antigen complex was determined by SDS electrophoresis in polyacrylamide gel. Protective activity of S. pneumoniae protein-containing antigen complex was studied in BALB/c line mice active protection experiments. Activity of mice immune sera obtained against whole-cell pneumococcus culture (T3No.3 strain) was determined in vitro by solid phase indirect EIA. Results. The data obtained give evidence that the isolated protein-containing antigen complex from S. pneumoniae T3No.3 strain effectively protects mice from consequent infection by a homologous S. pneumoniae strain. S. pneumoniae protein-containing antigen complex sorbed on solid phase at 5 μg dose was established by using EIA to interact with homologous mice immune sera. Conclusion. The results of the carried out studies allow to move to studies of cross-activity of S. pneumoniae protein-containing antigen complex isolated from T3No.3 strain.

Цель. Исследование протективной активности белоксодержащего комплекса антигенов S. pneumoniae, полученного из штамма Т3№3 против заражения гомологичным штаммом пневмококка. Материалы и методы . В работе использован штамм S. pneumoniae Т3№3 (серотип 3), полученный из коллекции штаммов пневмококка НИИВС им. И.И. Мечникова. Белоксодержащий комплекс антигенов S. pneumoniae выделяли путем осаждения двукратным объемом ацетона надосадочной фракции культуральной среды, в которой выращивали пневмококк. Молекулярную массу белков, входящих в состав комплекса антигенов S. pneumoniae , определяли с помощью SDS-электрофореза в полиакриламидном геле. Протективную активность белоксодержащего комплекса антигенов S. pneumoniae изучали в опытах активной защиты мышей линии BALB/c. Активность иммунных мышиных сывороток, полученных к цельноклеточной культуре пневмококка (штамм Т3№3), определяли in vitro с помощью твердофазного непрямого ИФА. Результаты . Полученные результаты свидетельствуют, что выделенный белоксодержащий комплекс антигенов S. pneumoniae из штамма Т3№3 эффективно защищает мышей от последующего заражения гомологичным штаммом S . pneumoniae. С помощью ИФА установлено, что белоксодержащий комплекс антигенов S. pneumoniae, сорбированный на твердой фазе в дозе 5 мкг/мл, взаимодействует с гомологичной иммунной сывороткой мышей. Заключение . Результаты проведенных экспериментов позволяют перейти к изучению перекрестной активности белоксодержащего комплекса антигенов S. pneumoniae, выделенного из штамма Т3№3.

S. pneumoniae protein-containing antigen complexprotective activityбелоксодержащий комплекс антигенов S. pneumoniaeпротективная активностьБрико Н.И. Распространенность и возможности профилактики пневмококковых инфекций в мире и в России. Вакцинация. 2009, 2 (58): 5-7.Вишнякова Л.А., Резцова Ю.В., Сологуб Т.С. и др. Этиология острой пневмонии на фоне гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций. Журн. микробиол. 1986, 8: 5-10.Воробьев Д.С., Семенова И.Б. Пневмококковый поверхностный белок А и новые подходы к разработке пневмококковых вакцин. Журн. микробиол. 2011, 6: 107-113.Воробьев Д.С., Семенова И.Б., Курбатова Е.А. Белки Streptococcus pneumoniae: перспективы создания вакцины против пневмококковой инфекции. Журн. микробиол. 2010, 6: 98-104.Гланц С.А. Медико-биологическая статистика. М., Практика. 1999.Гречуха Т.А. Обоснование, эффективность и безопасность вакцинации против пневмококковой инфекции детей с заболеваниями почек. Автореф. дисс. канд. мед. наук. М., 2011.Миронов К.О., Платонов А.Е., Козлов Р.С. Идентификация и серотипирование российских штаммов Streptococcus pneumoniae с применением методик, основанных на ПЦР. Клин. микробиол. антимикроб. химиотер. 2011, 4 (13): 304-312.Харит С.М. Пневмококковые вакцины. В: В.В.Зверев, Б.Ф.Семенов, Р.М.Хаитов (ред.). Вакцины и вакцинация. М., ГЭОТАР-Медиа, 2011.Ястребова Н.Е., Ванеева Н.П., Демин А.А. и др. Иммуноферментный анализ антител к нативной и денатурированной ДНК. Иммунология. 1987, 5: 73-75.Jedrzejas M.J. Pneumococcal virulence factors: structure and function. Microbiol. Molec. Boil. 2001, 65 (2): 187-207.Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of head of bacteriophage T4. Nature. 1970, 227: 680-685.Lu Y.J., Forte S., Thompson C.M. et al. Protection against Pneumococcal colonization and fatal pneumonia by a trivalent conjugate of a fusion protein with the cell wall polysaccharide. Infect. Immun. 2009, 77 (5): 2076-2083.Meng C., Lin H., Huang J. et al. Development of 5-valent conjugate pneumococcal protein A — Capsular polysaccharide pneumococcal vaccine against invasive pneumococcal disease. Microb. Pathog. 2009, 47 (3): 151-156.Ogunniyi A.D., Grabowicz M., Briles D.E. et al. Development of a vaccine against in- vasive pneumococcal disease based on combinations of virulence proteins of Streptococcus pneumoniae. Infect. Immun. 2007, 75 (1): 350-357.Reinert R.R., Paradiso P., Fritzell B. Advances in pneumococcal vaccines: the 13-valent pneumococcal conjugate vaccine received market authorization in Europe. Expert Rev. Vac. 2010, 9 (3): 229-236.Schenkein J.G., Nahm M.H., Dransfield M.T. Pneumococcal vaccination for patients with COPD: current practice and future directions. Chest. 2008, 133 (3): 767-774.Targonski P.V., Poland G.A. Pneumococcal vaccination in adults: recommendations, trends, and prospects. Cleve. Clin. J. Med. 2007, 74 (6): 401-414.Worldwide progress in introducing pneumococcal conjugate vaccine, 2000-2008. WHO Weekly Epidemiol. Rec. 2008, 83 (43): 388-392.