Journal of microbiology, epidemiology and immunobiologyJournal of microbiology, epidemiology and immunobiologyЖурнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии0372-93112686-7613Central Research Institute for Epidemiology13727ArticlesСтатьиANALYSIS OF BIOLOGICAL PROPERTIES OF STRAINS-PRODUCERS OF A NUMBER OFPSEUDOMONAS AERUGINOSA RECOMBINANT PROTEINSАНАЛИЗ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ШТАММОВ-ПРОДУЦЕНТОВ РЯДА РЕКОМБИНАНТ-НЫХ БЕЛКОВ PSEUDOMONAS AERUGINOSASoldatenkovaA VСолдатенковаА В

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

LeonovaE IЛеоноваЕ И

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

ZlygostevS AЗлыгостевС А

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

MikhaylovaN AМихайловаН А

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва

SoldatenkovaA V

Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia

LeonovaE I

Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia

ZlygostevS A

Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia

MikhaylovaN A

Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, МоскваMechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia15122012896NO6 (2012)№6 (2012)606409062023Copyright ©; 2012, Soldatenkova A.V., Leonova E.I., Zlygostev S.A., Mikhaylova N.A., Soldatenkova A.V., Leonova E.I., Zlygostev S.A., Mikhaylova N.A.Copyright ©; 2012, Солдатенкова А.В., Леонова Е.И., Злыгостев С.А., Михайлова Н.А., Soldatenkova A.V., Leonova E.I., Zlygostev S.A., Mikhaylova N.A.2012Soldatenkova A.V., Leonova E.I., Zlygostev S.A., Mikhaylova N.A., Soldatenkova A.V., Leonova E.I., Zlygostev S.A., Mikhaylova N.A.Солдатенкова А.В., Леонова Е.И., Злыгостев С.А., Михайлова Н.А., Soldatenkova A.V., Leonova E.I., Zlygostev S.A., Mikhaylova N.A.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://microbiol.crie.ru/jour/article/view/13727

Aim. Study of biological properties of strains-producers of a number of Pseudomonas aeruginosa recombinant proteins compared with the initial strains. Materials and methods. 5 Escherichia coli strains (initial strains E. сoli M15 and E. сoli BL21(DE3) and strains-producers of OprL, OprF, aTox3 recombinant proteins (E. coli М15/oprF, E. coli М15/oprL, E. coli BL21-аTox3) were studied. Toxicity, toxigenicity and virulence determination were carried out in experiments in non-linear mice. Enzymatic properties of the initial strains and strains-producers were compared in a number of biochemical tests. Results. The studied strains-producers of the most immunogenic P. aeruginosa recombinant proteins were confirmed to be biosafe, belong to Enterobacteriaceae family and Escherichia genus. As a result of genetic engineering manipulations carried out with E. coli М15 and E. coli BL21(DE3) alterations of biochemical and growth properties, virulence, to xicity and toxigenicity in the constructed strains-producers of recombinant proteins - E. coli М15/oprF, E. coli М15/oprL, E. coli BL21-аTox3 - were not detected. Conclusion. The results obtained allow to consider the possibility of use of E. coli М15/oprF, E. coli М15/oprL and E. coli BL21-аTox3 strains-producers for production and isolation of candidate proteins for inclusion into vaccine against pseudomonas infection.

Цель. Изучить биологические свойства штаммов-продуцентов ряда рекомбинантных белков P. aeruginosa в сравнении с исходными штаммами. Материалы и методы. Исследовано 5 штаммов Escherichia coli (исходные штаммы E. сoli M15 и E. сoli BL21(DE3) и штаммы-продуценты ре- комбинантных белков OprL, OprF, aTox3 (E. coli М15/oprF, E. coli М15/oprL, E. coli BL21-аTox3). Определение токсичности, токсигенности и вирулентности проводили в опытах на беспородных мышах. Ферментативные свойства исходных штаммов и штаммов-продуцентов сравнивали в ряде биохимических тестов. Результаты. Подтверждено, что исследованные штаммы-проду- центы наиболее иммуногенных рекомбинантных белков P. aeruginosa биобезопасны, при - надлежат к семейству Enterobacteriaceae и роду Escherichia. В результате генно-инженерных манипуляций, проведенных с E. coli М15 и E. coli BL21(DE3), не выявлено изменений био- химических и ростовых свойств, вирулентности, токсичности и токсигенности у созданных штаммов-продуцентов рекомбинантных белков E. coli М15/oprF, E. coli М15/oprL, E. coli BL21-аTox3. Заключение. Полученные результаты позволяют рассматривать возможность использования штаммов-продуцентов E. coli М15/oprF, E. coli М15/oprL и E. coli BL21-аTox3 для получения и выделения белков-кандидатов в состав вакцины против синегнойной ин- фекции.

genetic engineering constructionstrain-producertoxicitytoxigenicityvirulenceгенно-инженерная конструкцияштамм-продуценттоксичностьтоксигенностьвирулентностьБеляков В.Д., Ряпис Л.А., Илюхин В.И. Псевдомонады и псевдомонозы. М., Медицина. 1990.Гатыпова Е.В., Злыгостев С.А., Калошин А.А., Михайлова Н.А. Исследование иммунобиологических свойств рекомбинантного белка OprL наружной мембраны Pseudomonas aeruginosa. Вестн. РАМН. 2009, 4: 25-28.Исаков М.А., Солдатенкова А.В., Калошин А.А., Михайлова Н.А. Изучение иммунобиологических свойств рекомбинантных атоксичных форм экзотоксина А Pseudomonas aeruginosa. Журн. микробиол. 2011, 2: 37-42.Нозокомиальные инфекции. Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии. Л.С.Страчунский, Ю.Б.Белоусов, С.Н.Козлов (ред.). М., 2002.Сидоренко С.В., Резван С.П., Стерхова Г.А., Грудинина С.А. Госпитальные инфекции, вызванные Pseudomonas aeruginosa. Распространение и клиническое значение антибиотикорезистентности. Антибиот. химиотерап. 1999, 44 (3): 25-33.Станиславский Е.С. Бактериальные структуры и их антигенность. М., Медицина, 1961.Doring G., Pier G.B. Vaccines and immunotherapy against Pseudomonas aeruginosa. Vaccine. 2008, 26 (8): 1011-1024.Hancock R.E., Siehnel R., Martin N. Outer membrane proteins of Pseudomonas. Mol. Microbiol. 1990, 4 (7): 1069-1075.Iglewski B.H., Kabat D. NAD-dependent inhibition of protein synthesis by Pseudomonas aeruginosa toxin. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1975, 72 (6): 2284-2288.Kaloshin A.A., Gatypova E.V., Mikhailova N.A. Obtaining recombinant forms of outer membrane protein F (OprF) of Pseudomonas aeruginosa and assessment of their immunogenic properties. Appl. Biochem. Microbiol. 2011, 47 (8): 780-788.