Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза, Оренбург
Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза, Оренбург
Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза, ОренбургОренбургская государственная медицинская академия
Aim. Study the influence of exometabolites of B. bifidum on biological properties of bacteria that are the members of normoflora and their ability to interact with associative microsymbionts. Materials and methods. Bacterial strains that are members of the normal microflora of human intestine: B. bifidum, Lactobacillus acidophilus, Enterococcus faecium and Escherichia coli lactose positive non-hemolytic (lac +/ hly -) were used. As opportunistic microorganisms cultures of E. coli lactose negative hemolytic (lac -/hly +), Klebsiella pneumoniaе and Staphylococcus aureus were used. Isolation and identification of microorganisms was performed by generally accepted methods according to guidances. In the first series of experiments influence of B. bifidum metabolites on biological properties of microorganisms that are members of normoflora was studied. In the second series - the influence of bifidobacteria supernatants on interrelations of B. bifidum, L. acidophilus and E. coli lac +/hly - with opportunistic associants. Growth properties (GP), biofilm formation (BFF) and anti-lysozyme activity (ALA) of microorganisms was studied photometrically. Optical density measurement were performed on ELx808 (BioTek, USA) photometer. The data obtained were treated by nonparametric method using Mann-Whitney criteria. Results. B. bifidum supernatant was established to stimulate in 33.3 - 66.7% of cases or did not alter growth/reproduction, BFF and ALA of microorganisms that are characteristic for eubiosis of intestine including bacteria of the same species that could have implications for realization by bifidobacteria of biotope colonization resistance. Features of interaction of exometabolites of bifidobacteria with microorganisms that are characteristic for eubiosis of human intestine consisting in enchantment or changes of effects of the influence of normoflora members on BFF of associants were revealed. The maximum enchantment of inhibitory effect of indigenous strains under the influence of bifidobacteria was noted in associations E. coli lac +/hly - - E. coli lac -/hly + as well as E. faecium - S. аureus. Conclusion. Thus, the data obtained may be used for detection of mechanisms of functioning of normal microsymbiocenosis in human associative symbiosis.
Цель. Изучение влияния экзометаболитов B. bifidum на биологические свойства бактерий, представителей нормофлоры, и их способность взаимодействовать с ассоциативными микросимбионтами. Материалы и методы. В исследованиях были использованы штаммы бактерий, представителей нормальной микрофлоры кишечника человека: B. bifidum, Lactobacillus acidophilus, Enterococcus faecium и Escherichia coli лактозопозитивные негемолитические (lac +/hly -). В качестве условно патогенных микроорганизмов использовали культуры E. coli лактозонегативные гемолитические (lac -/hly +), Kkebsiella pneumoniaе и Staphylococcus aureus. Выделение и идентификацию микроорганизмов осуществляли общепринятыми методами в соответствии с методическими рекомендациями. В первой серии экспериментов изучали влияние метаболитов B. bifidum на биологические свойства микроорганизмов, представителей нормофлоры. Во второй серии - влияние супернатантов бифидобактерий на взаимоотношения B. bifidum, L. acidophilus, E. faecium и E. coli lac +/hly - с условно патогенными ассоциантами. Ростовые свойства (РС), образование биопленок (БПО) и антилизоцимную активность микроорганизмов исследовали фотометрическим способом. Измерения оптической плотности производили на фотометре ELx808 (BioTek, США). Полученные данные обработали непараметрическим методом с применением критерия Манна-Уитни. Результаты. Установлено, что супернатант B. bifidum в 33,3 - 66,7% случаев стимулировал или не изменял рост/размножение, БПО и АЛА микроорганизмов, характерных для эубиоза кишечника и, в том числе, бактерий своего вида, что может иметь значение при реализации бифидобактериями колонизационной резистентности биотопа. Выявлены особенности взаимодействия экзометаболитов бифидобактерий с микроорганизмами, характерными для эубиоза кишечника человека, заключающиеся в усилении или смене эффектов влияния представителей нормофлоры на БПО ассоциантов. Максимальное усиление ингибирующего действия индигенных штаммов под воздействием бифидобактерий отмечено в ассоциациях E. coli lac +/hly - - E. coli lac -/hly +, а также E. faecium - S. аureus. Заключение. Таким образом, полученные данные возможно использовать для выявления механизмов функционирования нормального микросимбиоценоза при ассоциативном симбиозе человека.