Aim . To determine rate of infection of protozoa by enteroviruses to assess the potential role of protozoa as a natural reservoir of enteroviruses. Materials and methods . The samples were collected from flowing and stagnant water reservoirs in Orenburg region in summer and autumn. The samples of sewages were taken in all stages of their treatment. Cultures of protozoa were isolated with micromanipulator equipped with micropipette, incubated on Pratt’s medium at 25°C and fed with Pseudomonas fluorescens culture. RNA of enteroviruses was detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Results . Seventy-two protozoan species were found in Ural river, whereas 15 and 38 species were found in lakes and sewages respectively. Enteroviruses were detected by RT-PCR in 61.8% cultures of protozoa belonging to 23 species of flagellates, amoebae and ciliates isolated from natural water bodies undergoing anthropogenic impact as well as from sewages in all stages of their treatment. Predominant localization of enteroviruses in dominant taxons of protozoa ( Paraphysomonas sp., Spumella sp., Petalomonas poosilla , Amoeba sp.) was noted. Conclusion . Obtained data confirm presence of enteroviruses in protozoa living both in flowing and stagnant recreation natural water bodies as well as in sewages and confirm the hypothesis of persistence of enteroviruses in protozoa and the reservoir role of the latter. Contingency of life cycles of viruses and protozoa allows to explain the seasonality of aseptic meningitis incidence caused by enteroviruses, which peaks in summer and autumn when protozoa massively multiply in water bodies.
Цель . Определить зараженность простейших энтеровирусами и оценить возможную роль простейших в качестве природного резервуара для энтеровирус ов. Материа лы и методы . Пробы отбирали в летне-осенний период из проточных и непроточных водоемов Оренбургской области, также взяты образцы сточных вод на всех этапах очистки. Культуры простейших выделяли с помощью микроманипулятора с микропипеткой и инкубировали на среде Пратта при 25°C с подкормкой культурой Pseudomonas fluorescens. РНК энтеровирусов в культурах простейших обнаруживали методом полимеразной цепной реакции с этапом обратной транскрипции. Результаты . В р. Урал обнаружено 72 вида простейших, в озерах — 15, в сточных водах — 38. С помощью ПЦР энтеровирусы выявлены в 61,8% культур простейших, относящихся к 23 видам флагеллат, амеб и инфузорий, выделенных из природных водоемов, подвергающихся антропогенной нагрузке, а также из сточных вод на всех этапах очистки. Отмечена преимущественная локализация энтеровирусов в доминирующих таксонах простейших Paraphysomonas sp., Spumella sp., Petalomonas poosilla, Amoeba sp. Заключение . Полученные данные подтверждают сохранение энтеровирусов в простейших, обитающих в проточных, стоячих рекреационных природных водоемах, а также в сточных водах, и служат подтверждением гипотезы персистенции энтеровирусов в простейших и их резервуарной роли. Сопряженность жизненных циклов вирусов и простейших позволяет объяснить сезонность заболеваемости серозными менингитами энтеровирусной этиологии, пик которой приходится на летнеосенний период года, характеризующийся массовым развитием простейших в водоемах.