Aim. To study the influence of associative microflora exometabolites on enzymatic activity and persistence potential of Staphylococcus aureus during a day. Materials and methods. Collection strains S.aureus ATCC 25923, Escherichia coli 35218, and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 were used. Exometabolites of E.coli and P.aeruginosa were obtained from broth cultures, which were centrifugated and supernatant was separated and sterilized by addition of chloroform. Exometabolites of microorganisms-associates were mixed with nutrient broth in 1:10 ratio with subsequent addition of pure culture of S.aureus . Broth cultures of staphylococci which do not contain exometabolites were used as controls. Biorhythms of proliferative activity of microorganisms were determined using original method developed by the authors. Catalase, hemolytic, and antilysozyme activities of bacteria were determined by photometric method, whereas activity of protease — by biuretic method. Results were statistically processed by Student's test. Results. Analysis of experimental data on the influence of exametabolites of E.coli and P.aeruginosa collection strains on daily dynamics of activity of aggression and persistence enzymes of S.aureus revealed daily cycles of studied parameters and desynchronization of biorhythms. Conclusion. Use of the developed model system allows to reveal regulatory effects of associated microorganisms on biological (pathogenic) characteristics of causative agent. Bacterial interrelations are significant regulatory action on pathogenic/persistence characteristics of a pathogen which should be taken in account for pathogenic assessment of an agent during infection it caused.
Цель . Оценка влияния экзометаболитов ассоциативной микрофлоры в течение суток на ферментативную активность и персистентный потенциал Staphylococcus aureus. Материалы и методы . Использованы музейные штаммы S.aureus АТСС 25923, Escherichia coli 35218 и Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. Экзометаболиты E.coli и P.aeruginosa получали из бульонных культур, которые центрифугировали, отделяли надосадочную жидкость и стерилизовали ее добавлением хлороформа. Экзометаболиты микроорганизмов-ассоциантов вносили в питательный бульон в соотношении 1:10 и вносили чистую культуру S.аureus. Контролем служили бульонные культуры стафилококков, не содержащие экзометаболитов. Биоритмы пролиферативной активности микроорганизмов определяли по оригинальной методике, ранее разработанной авторами. Активность каталазы, гемолитическую, антилизоцимную активность бактерий определяли фотометрическим методом, активность протеазы — биуретовым способом. Результаты статистически обработаны по Стьюденту. Результаты. Анализ экспериментальных данных по влиянию экзометаболитов музейных штаммов E.coli и P.aeruginosa на суточную динамику активности ферментов агрессии и персистенции S.aureus выявил суточные ритмы изучаемых показателей и дисинхроноз биоритмов. Заключение. Использование разработанной модельной системы позволяет выявлять регуляторные воздействия микроорганизмов-ассоциантов на биологические (патогенные) свойства возбудителя. Межмикробные отношения бактерий — это существенное регуляторное воздействие на патогенные/ персистентные свойства возбудителя, которое следует учитывать при патогенетической оценке возбудителя при инфекции.